簡介：中科院研究生院碩士研究生入學(xué)考試中科院研究生院碩士研究生入學(xué)考試生物化學(xué)與分子生物學(xué)生物化學(xué)與分子生物學(xué)考試大綱考試大綱一、一、考試內(nèi)容考試內(nèi)容1蛋白質(zhì)化學(xué)蛋白質(zhì)化學(xué)考試內(nèi)容考試內(nèi)容蛋白質(zhì)的化學(xué)組成，20種氨基酸的簡寫符號氨基酸的理化性質(zhì)及化學(xué)反應(yīng)蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)（一級、二級、高級結(jié)構(gòu)的概念及形式）蛋白質(zhì)一級結(jié)構(gòu)測定的一般步驟蛋白質(zhì)的理化性質(zhì)及分離純化和純度鑒定的方法蛋白質(zhì)的變性作用蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)與功能的關(guān)系考試要求考試要求了解氨基酸、肽的分類掌握氨基酸與蛋白質(zhì)的物理性質(zhì)和化學(xué)性質(zhì)了解蛋白質(zhì)一級結(jié)構(gòu)的測定方法（目前關(guān)于蛋白質(zhì)一級結(jié)構(gòu)測定的新方法和新思路很多，而教科書和教學(xué)中涉及的可能不夠廣泛，建議只讓學(xué)生了解即可）理解氨基酸的通式與結(jié)構(gòu)理解蛋白質(zhì)二級和三級結(jié)構(gòu)的類型及特點，四級結(jié)構(gòu)的概念及亞基掌握肽鍵的特點掌握蛋白質(zhì)的變性作用掌握蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)與功能的關(guān)系22核酸化學(xué)核酸化學(xué)考試內(nèi)容考試內(nèi)容核酸的基本化學(xué)組成及分類核苷酸的結(jié)構(gòu)DNA和RNA一級結(jié)構(gòu)的概念和二級結(jié)構(gòu)要特點；DNA的三級結(jié)構(gòu)RNA的分類及各類RNA的生物學(xué)功能核酸的主要理化特性核酸的研究方法考試要求考試要求全面了解核酸的組成、結(jié)構(gòu)、結(jié)構(gòu)單位以及掌握核酸的性質(zhì)考試要求考試要求了解酶的概念掌握酶活性調(diào)節(jié)的因素、酶的作用機制了解酶的分離提純基本方法熟悉酶的國際分類（第一、二級分類）了解特殊酶，如溶菌酶、絲氨酸蛋白酶催化反應(yīng)機制掌握酶活力概念、米氏方程以及酶活力的測定方法了解抗體酶、核酶的基本概念掌握固定化酶的方法和應(yīng)用66維生素和輔酶維生素和輔酶考試內(nèi)容考試內(nèi)容維生素的分類及性質(zhì)各種維生素的活性形式、生理功能考試要求考試要求了解水溶性維生素的結(jié)構(gòu)特點、生理功能和缺乏病了解脂溶性維生素的結(jié)構(gòu)特點和功能77激素激素考試內(nèi)容考試內(nèi)容激素的分類激素的化學(xué)本質(zhì)；激素的合成與分泌常見激素的結(jié)構(gòu)和功能（甲狀腺素、腎上腺素、胰島素、胰高血糖素）激素作用機理考試要求考試要求了解激素的類型、特點理解激素的化學(xué)本質(zhì)和作用機制了解常見激素的結(jié)構(gòu)和功能理解第二信使學(xué)說8新陳代謝和生物能學(xué)新陳代謝和生物能學(xué)考試內(nèi)容考試內(nèi)容新陳代謝的概念、類型及其特點ATP與高能磷酸化合物ATP的生物學(xué)功能電子傳遞過程與ATP的生成呼吸鏈的組分、呼吸鏈中傳遞體的排列順序

簡介：1名詞解釋1基因GENE是一段攜帶功能產(chǎn)物（多肽，蛋白質(zhì)，TRNA和RRNA和某些小分子RNA）信息的DNA片段，是控制某種性狀的的遺傳單位。2基因組GENOME泛指一個有生命體、病毒或細胞器的全部遺傳物質(zhì)；在真核生物，基因組是指一套染色體（單倍體）DNA。3、端粒以線性染色體形式存在的真核基因組DNA末端都有一種特殊的結(jié)構(gòu)叫端粒。該結(jié)構(gòu)是一段DNA序列和蛋白質(zhì)形成的一種復(fù)合體，僅在真核細胞染色體末端存在。4、操縱子是指數(shù)個功能上相關(guān)的結(jié)構(gòu)基因串聯(lián)在一起，構(gòu)成信息區(qū)，連同其上游的調(diào)控區(qū)（包括啟動子和操縱基因）以及下游的轉(zhuǎn)錄終止信號所構(gòu)成的基因表達單位，所轉(zhuǎn)錄的RNA為多順反子。5、順式作用元件是指那些與結(jié)構(gòu)基因表達調(diào)控相關(guān)、能夠被基因調(diào)控蛋白特異性識別和結(jié)合的特異DNA序列。包括啟動子、上游啟動子元件、增強子、加尾信號和一些反應(yīng)元件等。6、反式作用因子是指真核細胞內(nèi)含有的大量可以通過直接或間接結(jié)合順式作用元件而調(diào)節(jié)基因轉(zhuǎn)錄活性的蛋白質(zhì)因子。在反式作用因子中，可直接或間接結(jié)合RNA聚合酶的，稱為轉(zhuǎn)錄因子。轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子結(jié)構(gòu)DNA結(jié)合域酸性活域TF轉(zhuǎn)錄激活域脯氨酸富含域谷氨酰胺富含域蛋白質(zhì)蛋白質(zhì)結(jié)合域（二聚化結(jié)構(gòu)域）7、啟動子是RNA聚合酶特異性識別和結(jié)合的DNA序列。8、增強子位于真核基因中遠離轉(zhuǎn)錄起始點，能明顯增強啟動子轉(zhuǎn)錄效率的特殊DNA序列。它可位于被增強的轉(zhuǎn)錄基因的上游或下游，也可相距靶基因較遠。9、基因表達是指生物基因組中結(jié)構(gòu)基因所攜帶的遺傳信息經(jīng)過轉(zhuǎn)錄、翻譯等一系列過程，合成特定的蛋白質(zhì)，進而發(fā)揮其特定的生物學(xué)功能和生物學(xué)效應(yīng)的全過程。10、信息分子調(diào)節(jié)細胞生命活動的化學(xué)物質(zhì)。其中由細胞分泌的調(diào)節(jié)靶細胞生命活動的化學(xué)物質(zhì)稱為細胞間信息分子；而在細胞內(nèi)傳遞信息調(diào)控信號的化學(xué)物質(zhì)稱為細胞內(nèi)信息分子。11、受體是存在于靶細胞膜上或細胞內(nèi)能特異識別生物活性分子并與之結(jié)合，進而發(fā)生生物學(xué)效應(yīng)的的特殊蛋白質(zhì)。12、分子克隆在體外對DNA分子按照即定目的和方案進行人工重組，將重組分子導(dǎo)入合適宿主，使其在宿主中擴增和繁殖，以獲得該DNA分子的大量拷貝。13、蛋白激酶是指能夠?qū)⒘姿峒瘓F從磷酸供體分子轉(zhuǎn)移到底物蛋白的氨基酸受體上的一大類酶。14、蛋白磷酸酶是具有催化已經(jīng)磷酸化的蛋白質(zhì)分子發(fā)生去磷酸化反應(yīng)的一類酶分子，與蛋白激酶相對應(yīng)存在，共同構(gòu)成了磷酸化和去磷酸化這一重要的蛋白質(zhì)活性的開關(guān)系統(tǒng)。15、基因工程有目的的通過分子克隆技術(shù)，人為的操作改造基因，改變生物遺傳性狀的系列過程。16、載體能在連接酶的作用下和外源DNA片段連接并運送DNA分子進入受體細胞的DNA分子。17、轉(zhuǎn)化指質(zhì)粒DNA或以它為載體構(gòu)建的重組DNA導(dǎo)入細菌的過程。18、感染以噬菌體、粘性質(zhì)粒和真核細胞病毒為載體的重組DNA分子，在體外經(jīng)過包裝成具有感染能力的病毒或噬菌體顆粒，才能感染適當?shù)募毎?，并在細胞?nèi)擴增。19、轉(zhuǎn)導(dǎo)指以噬菌體為載體，在細菌之間轉(zhuǎn)移DNA的過程，有時也指在真核細胞之間通過逆轉(zhuǎn)錄病毒轉(zhuǎn)移和獲得細胞DNA的過程。20、轉(zhuǎn)染指病毒或以它為載體構(gòu)建的重組子導(dǎo)入真核細胞的過程。21、DNA變性在物理或化學(xué)因素的作用下，導(dǎo)致兩條DNA鏈之間的氫鍵斷裂，而核酸分子中的所有共價鍵則不受影響。22、DNA復(fù)性當促使變性的因素解除后，兩條DNA鏈又可以通過堿基互補配對結(jié)合形成DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)。23、退火指將溫度降至引物的TM值左右或以下，引物與DNA摸板互補區(qū)域結(jié)合形成雜交鏈。24、筑巢PCR先用一對外側(cè)引物擴增含目的基因的大片段，再用內(nèi)側(cè)引物以大片段為摸板擴增獲取目的基因。可以提高PCR的效率和特異性。25、原位PCR以組織固定處理細胞內(nèi)的DNA或RNA作為靶序列，進行PCR反應(yīng)的過程。26、定量PCR基因表達涉及的轉(zhuǎn)錄水平的研究常需要對MRNA進行定量測定，對此采用的PCR技術(shù)就叫定量PCR。350、順反子（CISTRON）在反式構(gòu)型中不能互補的各突變型所占有的那部分DNA片斷（見互補測驗）。51、結(jié)構(gòu)域是指超二級結(jié)構(gòu)在空間上進一步聚集形成的緊密穩(wěn)定的在蛋白質(zhì)分子上明顯可分的類似球狀的結(jié)構(gòu)。52、分子生物學(xué)（MOLECULARBIOLOGY）是在分子水平上研究生命現(xiàn)象、生命本質(zhì)、生命活動及其規(guī)律的學(xué)科。53、醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)從分子水平上研究人體在正常和疾病狀態(tài)下的生命活動及其規(guī)律，從分子水平開展人類疾病的預(yù)防、診斷和治療研究的一門科學(xué)。53、抑癌基因是指存在于正常細胞內(nèi)的一大類可抑制細胞生長并具有潛在抑癌作用的基因，當這類基因在發(fā)生突變、缺失或失活時可引起細胞惡性轉(zhuǎn)化而導(dǎo)致腫瘤的發(fā)生。54、基因文庫（GENELIBRARY，GENEBANK）利用限制性內(nèi)切酶將基因組DNA切成片段，每一DNA片段都與一個載體分子拼接成重組DNA。將所有的重組DNA分子都引入到宿主細胞并進行擴增，得到分子克隆的混合體，這樣一個混合體稱為基因文庫。55、CDNA文庫將CDNA的混合體與載體進行連接，使每一個CDNA分子都與一個載體分子拼接成重組DNA。將所有的重組DNA分子都引入宿主細胞并進行擴增，得到分子克隆的混合體，這樣一個混合體就稱為CDNA文庫。56、表達載體（EXPRESSINGVECT）是用來在受體細胞中表達（轉(zhuǎn)錄和翻譯）外源基因的載體。這類載體除具有克隆載體所具備的性質(zhì)以外，還帶有表達構(gòu)件轉(zhuǎn)錄和翻譯所必需的DNA序列。真核細胞病毒做載體；原核細胞質(zhì)粒、噬菌體做載體57、重組DNA技術(shù)采用載體基因與某目的基因在體外重組的方法克隆DNA的技術(shù)，稱為重組DNA技術(shù)。過程包括目的基因的獲取、基因載體的選擇與構(gòu)建、目的基因與載體的拼接、重組DNA分子導(dǎo)入受體細胞、篩選并無性繁殖含重組體分子的受體細胞以及陽性克隆的表達。58C值佯謬這種生物體的進化程度與基因組大小之間不完全成比例的現(xiàn)象稱為C值佯謬（CVALUEPARADOX）；59基因家族GENEFAMILY概念指核苷酸序列或編碼產(chǎn)物的結(jié)構(gòu)具有一定同源性的一些基因。60基因組學(xué)GENOMICS發(fā)展和應(yīng)用基因作圖、DNA測序、基因定位等新技術(shù)以及計算機程序，分析生命體（包括人類）全部基因組結(jié)構(gòu)及功能。61分子伴侶是細胞一類保守蛋白質(zhì)，可識別肽鏈的非天然構(gòu)象，促進各功能域和整體蛋白質(zhì)的正確折疊。62信號肽各種新生分泌蛋白的N端有保守的氨基酸序列稱信號肽。63細胞凋亡（APOPTOSIS有樹葉凋零之意或程序化細胞死亡（PROGRAMMEDCELLDEATHPCD是指多細胞有機體在正常生理或病理情況下，發(fā)生的一種由多基因控制的主動死亡過程。64凋亡小體指凋亡的最后階段，由胞質(zhì)分割形成大小不等，含有細胞質(zhì)膜、細胞器及核碎片的膜包被小體。65DNA片段化（主）凋亡細胞DNA經(jīng)瓊脂糖凝膠電泳呈特征性梯狀條帶圖譜66死亡受體DEATHRECEPTSDR指細胞表面存在的一類能結(jié)合凋亡剌激分子，并將信號傳遞至胞內(nèi)引起細胞凋亡的受體67“死亡結(jié)構(gòu)域”概念是凋亡信號受體共有的、存在于胞內(nèi)的轉(zhuǎn)導(dǎo)細胞凋亡所必需的一段高度同源的AA序列。68周期蛋白框各類周期蛋白均含有一段約100個氨基酸的保守序列，稱為周期蛋白框，介導(dǎo)周期蛋白與CDK結(jié)合。69檢驗點意指當DNA受到損傷時復(fù)制不完全或紡錘體形成不正常，周期將被阻斷。70蛋白質(zhì)組的含義一個基因組、一種生物或一種細胞組織所表達的全套蛋白質(zhì)蛋白質(zhì)組學(xué)就是從整體的角度，分析細胞內(nèi)動態(tài)變化的蛋白質(zhì)組成成份、表達水平與修飾狀態(tài)，了解蛋白質(zhì)之間的相互作用與聯(lián)系，揭示蛋白質(zhì)功能與細胞生命活動規(guī)律的一個新的研究領(lǐng)域71酵母雙雜交系統(tǒng)是在真核模式生物酵母中進行的，研究活細胞內(nèi)蛋白質(zhì)相互作用，對蛋白質(zhì)之間微弱的、瞬間的作用也能通過報告基因的表達產(chǎn)物敏感地檢測得到。它是一種具有很高靈敏度的研究蛋白質(zhì)之間關(guān)系的技術(shù)。72報道株經(jīng)改造的、含報告基因的重組質(zhì)粒的宿主細胞。73克隆CLONE來自于同一始祖的一群相同分子、細菌、細胞或動物（常被成為副本或拷貝）。74克隆化CLONING獲取大量單一拷貝的過程，也稱無性繁殖75DNA克隆應(yīng)用酶學(xué)的方法，在體外將各種來源的遺傳物質(zhì)（同源的或異源的、原核的或真核的、天然的或人工的DNA）與載體DNA接合成一具有自我復(fù)制能力的DNA分子。繼而通過轉(zhuǎn)化或轉(zhuǎn)染宿主細胞，篩選出含有目的基因的轉(zhuǎn)化子細胞。再進行擴增提取獲得大量同一DNA分子，又稱基因克隆GENECLONING或分子克隆MOLECULARCLOING。76載體（VECT）能攜帶外源基因進入受體細胞并在其中進行擴增或誘導(dǎo)外源基因表達的工具。77質(zhì)粒細菌染色質(zhì)以外的雙鏈環(huán)狀DNA，能自我復(fù)制和表達其攜帶的遺傳信息。78限制性核酸內(nèi)切酶由細菌自己產(chǎn)生的一種能識別和切割DNA內(nèi)部特定序列的一類核酸酶79基因組文庫GENOMICLIBRARY，G文庫用基因克隆的方法保存宿主細胞中的DNA重組分子中的集合所有重組子所含的插入片段的總和代表某種生物基因組全部核苷酸序列。

簡介：實例分析分子生物學(xué)技術(shù)的應(yīng)用,以INTERLEUKIN24為例,二、基因功能研究1MRNA水平和蛋白質(zhì)水平表達譜2體外生物學(xué)活性細胞模型，調(diào)節(jié)表達水平細胞活力、細胞增殖、細胞周期、抑瘤活性、等等3體內(nèi)生物學(xué)活性抑瘤活性、成血管活性、等等,內(nèi)容,一、基因的基本信息發(fā)現(xiàn)、序列、染色體定位、表達調(diào)控、同源性分子、修飾、降解、細胞內(nèi)定位、空間結(jié)構(gòu)等等,三、作用機制信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑和相互作用分子四、應(yīng)用,235DOCUMENTS,IF597757227650306938435521341525648,ONCOGENE1995,1124772486CANCERBIOLTHER20032S23–S37,MDA5，MDA6P21，MDA7/IL24，MDA9/SYNTENIN,,SUBTRACTIONHYBRIDIZATION,一、MDA7/IL24,PAULBFISHERCOLUMBIAUNI,1發(fā)現(xiàn),雜交產(chǎn)物的克隆、篩選和測序,除去雜交體、過量探針、鹽和小片段,CANCERBIOLTHER20032S23–S37,2提交序列,NCBI/GENBANK,,,3染色體定位,DATABASEANALYSIS,CYTOGROWTHFACTORREV2003,1435–51,IL10FAMILY,MOLMED200174271282,4與IL24同源的分子,一致的保守的相似的,CYTOKINEGROWTHFACTORREV20031435–51IMMUNOLOGY2005114216670,NCBIBLAST,KEGG,5基因的表達調(diào)控,JCELLPHYSIOL200018513646,基因組文庫,IL24CDNA探針,PCR,測序,啟動子GCG啟動子搜索轉(zhuǎn)錄起始位點引物延伸和作圖,轉(zhuǎn)錄水平,啟動子序列,JCELLPHYSIOL200018513646,AP1PKCACTIVATEDTFC/EBPGROWTHARRESTANDTERMINALDIFFERENTIATIONASSOCIATEDTF,,轉(zhuǎn)錄起始前復(fù)合物真核生物RNA聚合酶不與DNA分子直接結(jié)合，而需依靠眾多的轉(zhuǎn)錄因子。,轉(zhuǎn)錄前起始復(fù)合物,拼板理論一個真核生物基因的轉(zhuǎn)錄需要3至5個轉(zhuǎn)錄因子。轉(zhuǎn)錄因子之間互相結(jié)合，生成有活性和專一性的復(fù)合物，再與RNA聚合酶搭配而有針對性地結(jié)合、轉(zhuǎn)錄相應(yīng)的基因。,RNA聚合酶保護法,LUCIFERASEASSAYSYSTEM,JCELLPHYSIOL200018513646,NDEINHEI是啟動子轉(zhuǎn)錄活性的重要區(qū)域，C/EBPB和CJUN/AP1提高轉(zhuǎn)錄活性。,重要區(qū)域,NUCLEARLYSATES,ARROW1C/EBPBARROW2AP1,JCELLPHYSIOL200018513646,EMSA,C/EBPB和CJUN/AP1結(jié)合在MDA7/IL24啟動子上。,CELLLYSATES,,,IFNΒ和MEZ單獨或聯(lián)合處理不能顯著改變啟動子活性,LUCIFERASEASSAYSYSTEM,ONCOGENE2000191013628,3’UTR的ARE調(diào)節(jié)該基因在終末分化過程中的MRNA水平,AREAURICHELEMENTS,LUCIFERASEASSAYSYSTEM,ONCOGENE2000191013628,7分泌蛋白,MOLTHER20049335567,OVEREXPRESSION,WB,,ADIL24CELLLYSATE,ADIL24SUPERNATANT,分泌作用的抑制劑,MOLTHER20049335567,WB,CYTOKINEGROWTHFACTORREV20031435–51,PNGASEFENDOGLYCANASEFENDOO內(nèi)O糖苷酶,6翻譯后修飾,OVEREXPRESSION,WB,JBIOLCHEM2002277973417,MDA7/IL24蛋白可被糖基化修飾,MOLTHER20049335567,GLYCOPEPTIDASEF,LSN,7細胞內(nèi)定位,MOLTHER20049335567,IFC,MOLTHER20049335567,,QUANTITATIVERECEPTORBINDINGANALYSIS,JBIOLCHEM2002277973417,,,,IL20R2,IL20R1/IL20R2,IL22R1/IL20R2結(jié)合AP的活性高。,8受體,JBIOLCHEM2002277973417,CELLSURFACESTAININGASSAY,RTPCR,EXPDERMAT200615991–1004,CANCERBIOLTHER20032S23–S37,RTPCR,PCNC,CYTOKINE20084116–23,FACS,IFC,IL22R1/IL20R2IL20R1/IL20R2,IMMUNOLOGY2005114216670,CYTOGROWTHFACTORREV2003,1435–51,3前列腺4睪丸5卵巢6小腸7結(jié)腸,1MRNA表達譜分布在人的免疫系統(tǒng),NB,二、基因功能的研究,ONCOGENE2001207051–7063,CYTOGROFACREV20031435–51,?UNTREATEDIFNΒMEZ,24H,NB,ONCOGENE2001207051–7063,REALTIMERTPCR,在黑色素瘤惡性發(fā)展過程中，MDA7/IL24的MRNA表達水平逐漸降低，直至完全喪失。,PHARMACOLTHER20061113596628,KAPLANMEIERSURVIVALANALYSIS,CANCERCELLINTER20101029,2蛋白水平,IHC,CYTOKINE20084116–23,類風(fēng)濕關(guān)節(jié)滑膜,NC,SUBLININGMONONUCLEARCELLS,ENDOTHELIALCELLSOFBLOODVESSELS,CYTOKINE20084116–23,ELISA,免疫系統(tǒng)脾、胸腺、外周血白細胞特定細胞黑色素細胞、痣、早期黑色素瘤細胞、平滑肌細胞、皮膚成纖維細胞、皮膚傷口邊緣和基底類成纖維細胞樣細胞腫瘤細胞50多種，無內(nèi)源性MDA7/IL24蛋白表達。,分布局限性,基因在靶細胞中的過表達,ADENOVIRUS,JCELLPHYSIOL2007210254959,CAR檢測COXSACKIEADENOVIRUSRECEPTORS,FACS,WB,,,人正常卵巢上皮細胞,卵巢癌細胞,靶細胞中重組蛋白的檢測,WB,卵巢癌細胞,MOLCANCER20076111,CANCERIMMUNOLIMMUNOTHER200756205–215,,7D,3細胞活力,CRYSTALVIOLETSTAINING,CANCERGENETHER20061311101122,TRAIL腫瘤壞死因子相關(guān)的凋亡誘導(dǎo)配體,MOLMED200174271282,TRYPANBLUEEXCLUSIONASSAY,CANCERIMMUNOLIMMUNOTHER200756205–215,TRYPANBLUEEXCLUSIONASSAY,,ADMDA7能夠降低腫瘤細胞的活力。,特異性抑制多種腫瘤細胞生長,4體外抑瘤活性細胞增殖,CANCERGENETHER20061311101122,MTT,3HTHYMIDINEASSAY,MOLMED200174271282,,,CANCERRES2006661681828191,COLONYFORMATION,缺失信號肽的突變體SPMDA7具有抗瘤活性,CANCERRES2004642988–2993,WB,MTT,MATRIGELINVASIONASSAY,COLONYFORMATION,C8161,C8161,CANCERRES2004642988–2993,XENOGRAFTTUMORSINNUDEMICE,5體內(nèi)抑瘤活性,,SW620,CANCERGENETHER20061311101122,CANCERBIOLTHER20032S23–S37,,SW620,CANCERGENETHER20061311101122,XENOGRAFTTUMORSINNUDEMICE,IHC,NOAB1,IL24,CANCERGENETHER2006131011–1022,SUBCUTANEOUSSW620TUMORS,抗瘤活性源自MDA7/IL24蛋白的表達,MOLCANCER20076111,MDAH2774TUMORBEARINGANIMAL,PHARMACOLTHER20061113596628,特異性抑制多種腫瘤細胞生長,MDAMB453,CANCERIMMUNOLIMMUNOTHER200756205–215,HUVEC,ONCOGENE20022129455866,5細胞周期分析,FACS,使腫瘤細胞G2/M期阻滯,CANCERIMMUNOLIMMUNOTHER200756205–215,WB,6細胞凋亡,CANCERGENETHER20061311101122,FACSANALYSIS,PISTAINING,,ANNEXINVSTAINING,MOLMED200174271–282,,FO1CELLSSB203580P38MARK的抑制劑,DNALADDER,PNAS20029910054–10059,TUNEL,PBS,IL24,CANCERGENETHER2006131011–1022,SUBCUTANEOUSSW620TUMORS,H1299TUMORBEARINGANIMAL,ONCOGENE2002214558–4566,IHC,TUNEL,PCR,RTPCR,IHC,TUNEL,TUNEL,MCF7,MOLMED200174271282,CANCERIMMUNOLIMMUNOTHER200756205–215,CASPASE3ANALYSIS,MDAMB453,人正常卵巢上皮細胞,卵巢癌細胞,CASPASE3、CASPASE8和PARP被切割,MOLCANCER20076111,腺病毒感染結(jié)直腸癌細胞48H后,CANCERGENETHER20061311101122,,,,肺癌細胞,JCELLPHYSIOL2007210254959,具有劑量依賴效應(yīng),ZVADFMKCASPASE的廣譜抑制劑,CANCERGENETHER20061311101122,,,保護細胞免受凋亡,與BCL2家族基因相關(guān),CANCERGENETHER20061311101122,刺激特定細胞凋亡,參與CASPASE9活化和自切割,腺病毒感染結(jié)直腸癌細胞48H,HUVECADMDA7,HUVECADMDA7MATRIGEL,ONCOGENE20022129455866,TUBEFORMATION,7抗血管形成作用,抑制內(nèi)皮細胞形成管狀結(jié)構(gòu),ONCOGENE20022129455866,血管內(nèi)皮細胞標志物表達降低,H1299TUMORBEARINGANIMALS,1P38MAPK途徑,三、作用機制,MOLCANCER20076111,WB,PKRDOUBLESTRANDEDRNAACTIVATEDPROTEINKINASE,,PNAS20029915100549,SBP38MARK抑制劑P38DNP38負顯性突變體,黑色素瘤細胞FO1,,,,,PNAS20029915100549,NB，WB,GADD生長阻滯和DNA損傷誘導(dǎo)的基因,,,,,NB，WB,3D,PNAS20029915100549,ANTISENSE,MTT,PNAS20029915100549,ADVECWHITEBARSADMDA7BLACKBARS,P38MAPK途徑和GADD家族成員的關(guān)系,PNAS20029915100549,2PI3K信號途徑,MOLTHER20038220719,H1299/ADMDA72400CDNA,MICROARRAY,MOLTHER20038220719,WB,H1299,TRYPANBLUEEXCLUSIONASSAY,MOLTHER20038220719,,,BIOTECHNIQUES2002SUPPL30–39,3選擇性誘導(dǎo)腫瘤細胞凋亡具有多種機制,CANCERRES2004642988–2993,CANCERRES200363238138–8144,MDA7蛋白誘導(dǎo)前列腺癌細胞凋亡的可能機制,CANCERRES200565221012810138,四、臨床應(yīng)用研究,CANCERRES200565221012810138,CYCLE1DAY30,Ⅰ期臨床試驗證明MDA7/IL24使用安全、有臨床療效。,INGN241重組腺病毒INTROGEN公司,Ⅰ期28例Ⅱ期進行中,INGN241ADMDA7TREATMENTOFAMELANOMAMETASTASISINARIGHTSUPRACLAVICULARLYMPHNODE,MOLTHER2005；11,149–159,2ADMDA7/IL24與化療藥物聯(lián)合使用,抗體4D5,TRASTUZUMAB,HERCEPTIN,HER2HUMANEPIDERMALGROWTHFACTORRECEPTOR2,HER2轉(zhuǎn)移乳腺癌,30HER2有效,CANCERGENETHER2006131095868,CANCERGENETHER2006131095868,FACS,CANCERGENETHER2006131095868,TRYPANBLUEEXCLUSIONSTAINING,LADLUC,CANCERGENETHER2006131095868,ADMDA7/IL24HERCEPTIN,,CANCERGENETHER2006131095868,HERCEPTIN1AND2MG/ML,TRYPANBLUEEXCLUSIONSTAINING,MCF7,MDAMB453,MDAMB453,CANCERGENETHER2006131095868,與HERCEPTIN聯(lián)合使用，抗瘤效果更好，并擴大抗瘤譜。,CANCERGENETHER2006131095868,MCF7HER18HER2OVEREXPRESSING,EGFREPIDERMALGROWTHFACTORRECEPTOR,EGFRWILDTYPE,ADMDA7＋GEF,JCELLPHYSIOL2007210254959,,,MTT,GE?TINIBANORALLYACTIVESELECTIVEREVERSIBLEINHIBITOROFTHEEGFRTYROSINEKINASE,JCELLPHYSIOL2007210254959,與GEFITINIB聯(lián)合使用，抗瘤效果提高。,JCELLPHYSIOL2007210254959,SMDA7/IL24,1抑制血管內(nèi)皮細胞成管能力,CANCERRES20036316510513,3基因工程重組MDA7/IL24蛋白藥物,CANCERRES20036316510513,CANCERRES20036316510513,CANCERBIOLTHER20032S23–S37,裸鼠,CANCERRES20036316510513MOLTHER200511572433,MDAMB4543,CANCERIMMUNOLIMMUNOTHER200756220515,具有體內(nèi)抑瘤活性,CANCERRES20036316510513,SMDA7/IL24的抗瘤活性與其受體相關(guān),CANCERIMMUNOLIMMUNOTHER200756220515,SMDA7/IL24能夠抑制多種腫瘤細胞增殖，并誘導(dǎo)凋亡,CANCERIMMUNOLIMMUNOTHER200756220515,小結(jié),思考題,在日常生活中，你遇到哪些感興趣而又不知道答案的生命科學(xué)相關(guān)問題請用假說演繹法對其中的一個問題進行分析和探討。你如何理解研究思路和實驗技術(shù)之間的關(guān)系你認為在公共實驗室做實驗應(yīng)該注意哪些問題請從正、反兩方面說明。在進行PCR實驗之前，你應(yīng)該做哪些準備工作請設(shè)計將MDA7基因CDS插入到真核表達載體PSECTAG2A中的上下游引物。,FIG1,7FIG2是PCR結(jié)果，每個泳道的模板不同，你如何改進PCR條件使得AE樣品能得到特異性好的目的條帶,6你如何評價PCR電泳結(jié)果FIG1為什么如有問題如何解決,FIG1,8你用熱激法將連接產(chǎn)物轉(zhuǎn)化到細菌中，LBAMP平板沒有克隆，請分析可能的原因。9WESTERNBLOT實驗中的影響因素有哪些如果你得到的是沒有任何條帶的白板，你準備怎么辦10一位同學(xué)未能將PCR產(chǎn)物連入表達載體，請分析可能是哪些環(huán)節(jié)出問題,11實驗室現(xiàn)有的試劑如下1MTRISHCL，1MKCL，TRITONX100，305MGCL2MW203；已知1反應(yīng)BUFFER中各試劑的濃度分別是10MMTRISHCL,50MMKCL,1TRITONX100,15MMMGCL2。現(xiàn)在要配5ML的10反應(yīng)BUFFER，如何用現(xiàn)有試劑配制請列出計算過程。,12對于一個分子生物學(xué)的關(guān)鍵詞/術(shù)語，你有哪些想法13就這次課的內(nèi)容，你認為還可以從哪些角度進行MDA7/IL24的研究請說明你的理由。14如果你做某個實驗，三次都未得到你想要的結(jié)果，你準備下一步怎么辦15我們實驗課用過哪些儀器設(shè)備使用時最需要注意的分別是什么16請從講課內(nèi)容、時間安排和授課方式上，談?wù)勀銓Α吧锘瘜W(xué)與分子生物學(xué)實驗技術(shù)”這門課程的建議。,謝謝,

簡介：第一章第一章1簡述孟德爾、摩爾根和沃森等人對分子生物學(xué)發(fā)展的主要貢獻簡述孟德爾、摩爾根和沃森等人對分子生物學(xué)發(fā)展的主要貢獻答孟德爾的對分子生物學(xué)的發(fā)展的主要貢獻在于他通過豌豆實驗，發(fā)現(xiàn)了遺傳規(guī)律、分離規(guī)律及自由組合規(guī)律；摩爾根的主要貢獻在于發(fā)現(xiàn)染色體的遺傳機制，創(chuàng)立染色體遺傳理論，成為現(xiàn)代實驗生物學(xué)奠基人；沃森和克里克在1953年提出DAN反向雙平行雙螺旋模型。2寫出寫出DNARNA的英文全稱的英文全稱答脫氧核糖核酸（DNADEOXYRIBONUCLEICACID），核糖核酸（RNARIBONUCLEICACID）3試述試述“有其父必有其子有其父必有其子”的生物學(xué)本質(zhì)的生物學(xué)本質(zhì)答其生物學(xué)本質(zhì)是基因遺傳。子代的性質(zhì)由遺傳所得的基因決定，而基因由于遺傳的作用，其基因的一半來自于父方，一般來自于母方。4早期主要有哪些實驗證實早期主要有哪些實驗證實DNA是遺傳物質(zhì)寫出這些實驗的主要步驟是遺傳物質(zhì)寫出這些實驗的主要步驟答一，肺炎雙球菌感染實驗，1，R型菌落粗糙，菌體無多糖莢膜，無毒，注入小鼠體內(nèi)后，小鼠不死亡。2，S型菌落光滑，菌體有多糖莢膜，有毒，注入到小鼠體內(nèi)可以使小鼠患病死亡。3，用加熱的方法殺死S型細菌后注入到小鼠體內(nèi)，小鼠不死亡；二，噬菌體侵染細菌的實驗1，噬菌體侵染細菌的實驗過程吸附→侵入→復(fù)制→組裝→釋放。2，DNA中P的含量多，蛋白質(zhì)中P的含量少；蛋白質(zhì)中有S而DNA中沒有S，所以用放射性同位素35S標記一部分噬菌體的蛋白質(zhì)，用放射性同位素32P標記另一部分噬菌體的DNA。用35P標記蛋白質(zhì)的噬菌體侵染后，細菌體內(nèi)無放射性，即表明噬菌體的蛋白質(zhì)沒有進入細菌內(nèi)部；而用32P標記DNA的噬菌體侵染細菌后，細菌體內(nèi)有放射性，即表明噬菌體的DNA進入了細菌體內(nèi)。三，煙草TMV的重建實驗1957年，F(xiàn)RAENKELCONRAT等人，將兩個不同的TMV株系（S株系和HR株系）的蛋白質(zhì)和RNA分別提取出來，然后相互對換，將S株系的蛋白質(zhì)和HR株系的RNA，或反過來將HR株系的蛋白質(zhì)和S株系的RNA放在一起，重建形成兩種雜種病毒，去感染煙草葉片。5請定義請定義DNA重組技術(shù)和基因工程技術(shù)重組技術(shù)和基因工程技術(shù)答DNA重組技術(shù)目的是將不同的DNA片段（如某個基因或基因的一部分）按照人們的設(shè)計定向連接起來，然后在特定的受體細胞中與載體同時復(fù)制并得到表達，產(chǎn)生影響受體細胞的新的遺傳性狀。基因工程技術(shù)是除了包含DNA重組技術(shù)外還包括其他可能是生物細胞基因結(jié)構(gòu)得到改造的體系，基因工程是指技術(shù)重組DNA技術(shù)的產(chǎn)業(yè)化設(shè)計與應(yīng)用，包括上游技術(shù)和下游技術(shù)兩大組成部分。上游技術(shù)指的是基因重組、克隆和表達的設(shè)計與構(gòu)建（即重組DNA技術(shù)）；而下游技術(shù)則涉及到基因工程菌或細胞的大規(guī)模培養(yǎng)以及基因產(chǎn)物的分離純化過程。6寫出分子生物學(xué)的主要研究內(nèi)容。寫出分子生物學(xué)的主要研究內(nèi)容。答1，DNA重組技術(shù)；2，基因表達調(diào)控研究；3，生物大分子的結(jié)構(gòu)功能研究，結(jié)構(gòu)分子生物學(xué)；4，基因組、功能基因組與生物信息學(xué)研究。7分子生物學(xué)的定義分子生物學(xué)的定義答廣義的分子生物學(xué)蛋白質(zhì)及核酸等生物大分子結(jié)構(gòu)和功能的研究都屬于分子生物學(xué)的范疇，即從分子水平闡明生命現(xiàn)象和生物學(xué)規(guī)律狹義的分子生物學(xué)偏重于核酸（基因）的分子生物學(xué)，主要研究基因或DNA的復(fù)制、轉(zhuǎn)錄、表達和調(diào)控等過程，當然也涉及與這些過程相關(guān)的蛋白質(zhì)和酶的結(jié)構(gòu)與功能的研究1111，什么是轉(zhuǎn)座子可以分為哪些種類，什么是轉(zhuǎn)座子可以分為哪些種類答轉(zhuǎn)座子是存在于染色體DNA上可自主復(fù)制和移位的基本單位。轉(zhuǎn)座子可分為兩大類插入序列和復(fù)合型轉(zhuǎn)座子。1212，請說說插入序列與復(fù)合型轉(zhuǎn)座子之間的異同。，請說說插入序列與復(fù)合型轉(zhuǎn)座子之間的異同。答插入序列是最簡單的轉(zhuǎn)座子，它不含有任何宿主基因，它們是細菌染色體或質(zhì)粒DNA的正常組成部分，一般插入序列都是很小的DNA片段，末端帶有倒置重復(fù)序列；復(fù)合型轉(zhuǎn)座子是一類帶有某些抗藥性基因的轉(zhuǎn)座子，其兩翼往往帶有兩個或者相同高度同源的IS序列，一旦形成復(fù)合轉(zhuǎn)座子，IS序列就不能移動，因為他們的功能被修飾了，只能作為復(fù)合體移動。第三章第三章1，什么是編碼鏈什么是模版鏈，什么是編碼鏈什么是模版鏈答與MRNA序列相同的那條DNA鏈稱為編碼鏈（或有意義鏈）；另一條根據(jù)堿基互補原則指導(dǎo)MRNA合成DNA鏈稱為模版鏈（或反義鏈）。2，簡述，簡述RNARNA轉(zhuǎn)錄的概念及其基本過程。轉(zhuǎn)錄的概念及其基本過程。答RNA轉(zhuǎn)錄以DNA中的一條單鏈為模板，游離堿基為原料，在DNA依賴的RNA聚合酶催化下合成RNA鏈的過程。基本過程模版識別轉(zhuǎn)錄開始轉(zhuǎn)錄延伸轉(zhuǎn)錄終止。3，大腸桿菌的，大腸桿菌的RNARNA聚合酶有哪些組成成分各個亞基的作用如何聚合酶有哪些組成成分各個亞基的作用如何答大腸桿菌的RNA聚合酶由2個Α亞基、一個Β亞基、一個Β’亞基和一個Ω亞基組成的核心酶，加上一個Σ亞基后則成為聚合酶全酶。Α亞基肯能與核心酶的組裝及啟動子的識別有關(guān)，并參與RNA聚合酶和部分調(diào)節(jié)因子的相互作用；Β亞基和Β’亞基組成了聚合酶的催化中心，Β亞基能與模版DNA、新生RNA鏈及核苷酸底物相結(jié)合。4，什么是封閉復(fù)合物、開放復(fù)合物以及三元復(fù)合物，什么是封閉復(fù)合物、開放復(fù)合物以及三元復(fù)合物答模版的識別階段，聚合酶與啟動子可逆性結(jié)合形成封閉性復(fù)合物；封閉性復(fù)合物形成后，此時，DNA鏈仍然處于雙鏈狀態(tài)，伴隨著DNA構(gòu)象的重大變化，封閉性復(fù)合物轉(zhuǎn)化為開放復(fù)合物；開放復(fù)合物與最初的兩個NTP相結(jié)合并在這兩個核苷酸之間形成磷酸二脂鍵后即轉(zhuǎn)變成包括RNA聚合酶、DNA和新生RNA的三元復(fù)合物。5，簡述，簡述Σ因子的作用。因子的作用。答1，Σ因子的作用是負責(zé)模版鏈的選擇和轉(zhuǎn)錄的起始，它是酶的別構(gòu)效應(yīng)物，使酶專一性識別模版上的啟動子；2，Σ因子可以極大的提高RNA聚合酶對啟動子區(qū)DNA序列的親和力；3，Σ因子還能使RNA聚合酶與模版DNA上非特異性位點結(jié)合常數(shù)降低。6，什么是，什么是PRIBNOWPRIBNOWBOXBOX它的保守序列是什么它的保守序列是什么答PRIBNOWBOX是原核生物中中央大約位于轉(zhuǎn)錄起始位點上游10BP處的TATA區(qū)，所以又稱作10區(qū)。它的保守序列是TATAAT。7，什么是上升突變什么是下降突變，什么是上升突變什么是下降突變答上升突變細菌中常見的啟動自突變之一，突變導(dǎo)致PRIBNOW區(qū)共同序列的同一性增加；下降突變細菌中常見的啟動子突變之一，突變導(dǎo)致結(jié)構(gòu)基因的轉(zhuǎn)錄水平大大降低，如PRIBNOW區(qū)從TATAAT變成AATAAT。8，簡述原核生物和真核生物，簡述原核生物和真核生物MRNAMRNA的區(qū)別。的區(qū)別。答1，原核生物MRNA常以多順反子的形式存在。真核生物MRNA一般以單順反子的形式存在；2，原核生物MRNA的轉(zhuǎn)錄與翻譯一般是偶聯(lián)的，真核生物轉(zhuǎn)錄的MRNA前體則需經(jīng)轉(zhuǎn)錄后加工，加工為成熟的MRNA與蛋白質(zhì)結(jié)合生成信息體后才開始工作；3，原核生物MRNA半壽期很短，一般為幾分鐘，最長只有數(shù)小時。真核生物MRNA的半壽期較長，如胚胎中的MRNA可達數(shù)日；4，原核與真核生物MRNA的結(jié)構(gòu)特點也不同，原核生物的MRNA的5’端無

簡介：第一章第一章基因的結(jié)構(gòu)與功能基因的結(jié)構(gòu)與功能自測題自測題（一）（一）選擇題選擇題A型題型題1關(guān)于基因的說法錯誤的是A基因是貯存遺傳信息的單位B基因的一級結(jié)構(gòu)信息存在于堿基序列中C為蛋白質(zhì)編碼的結(jié)構(gòu)基因中不包含翻譯調(diào)控序列D基因的基本結(jié)構(gòu)單位是一磷酸核苷E基因中存在調(diào)控轉(zhuǎn)錄和翻譯的序列2基因是指A有功能的DNA片段B有功能的RNA片段C蛋白質(zhì)的編碼序列及翻譯調(diào)控序列DRNA的編碼序列及轉(zhuǎn)錄調(diào)控序列E以上都不對3結(jié)構(gòu)基因的編碼產(chǎn)物不包括ASNRNAC內(nèi)含子不轉(zhuǎn)錄D斷裂基因E外顯子數(shù)目＝內(nèi)含子數(shù)目－17關(guān)于外顯子說法正確的是A外顯子的數(shù)量是描述基因結(jié)構(gòu)的重要特征B外顯子轉(zhuǎn)錄后的序列出現(xiàn)在HNRNA中C外顯子轉(zhuǎn)錄后的序列出現(xiàn)在成熟MRNAD外顯子的遺傳信息可以轉(zhuǎn)換為蛋白質(zhì)的序列信息E以上都對8斷裂基因的敘述正確的是A結(jié)構(gòu)基因中的DNA序列是斷裂的B外顯子與內(nèi)含子的劃分不是絕對的C轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物無需剪接加工D全部結(jié)構(gòu)基因序列均保留在成熟的MRNA分子中E原核和真核生物基因的共同結(jié)構(gòu)特點9原核生物的基因不包括A內(nèi)含子B操縱子C啟動子

簡介：1廣石化分子生物學(xué)試題及答案一、名詞解釋1CDNACDNA與CCCDNACCCDNACDNA是由MRNA通過反轉(zhuǎn)錄酶合成的雙鏈DNA；CCCDNA是游離于染色體之外的質(zhì)粒雙鏈閉合環(huán)形DNA。2標準折疊單位標準折疊單位蛋白質(zhì)二級結(jié)構(gòu)單元Α－螺旋與Β－折疊通過各種連接多肽可以組成特殊幾何排列的結(jié)構(gòu)塊，此種確定的折疊類型通常稱為超二級結(jié)構(gòu)。幾乎所有的三級結(jié)構(gòu)都可以用這些折疊類型，乃至他們的組合型來予以描述，因此又將其稱為標準折疊單位。3CAPCAP環(huán)腺苷酸（CAMP）受體蛋白CRP（CAMPRECEPTPROTEIN），CAMP與CRP結(jié)合后所形成的復(fù)合物稱激活蛋白CAP（CAMPACTIVATEDPROTEIN）4回文序列回文序列DNA片段上的一段所具有的反向互補序列，常是限制性酶切位點。5MICRNAMICRNA互補干擾RNA或稱反義RNA，與MRNA序列互補，可抑制MRNA的翻譯。6核酶核酶具有催化活性的RNA，在RNA的剪接加工過程中起到自我催化的作用。7模體模體蛋白質(zhì)分子空間結(jié)構(gòu)中存在著某些立體形狀和拓撲結(jié)構(gòu)頗為類似的局部區(qū)域8信號肽信號肽在蛋白質(zhì)合成過程中N端有1536個氨基酸殘基的肽段，引導(dǎo)蛋白質(zhì)的跨膜。9弱化子弱化子在操縱區(qū)與結(jié)構(gòu)基因之間的一段可以終止轉(zhuǎn)錄作用的核苷酸序列。10魔斑魔斑當細菌生長過程中，遇到氨基酸全面缺乏時，細菌將會產(chǎn)生一個應(yīng)急反應(yīng)，停止全部基因的表達。產(chǎn)生這一應(yīng)急反應(yīng)的信號是鳥苷四磷酸PPGPP和鳥苷五磷酸（PPPGPP）。PPGPP與PPPGPP的作用不只是一個或幾個操縱子，而33原核生物中有三種起始因子分別是（IF1IF1）、（IF2IF2）和（IF3IF3）。4蛋白質(zhì)的跨膜需要（信號肽信號肽）的引導(dǎo)，蛋白伴侶的作用是（輔助肽鏈折疊成天然構(gòu)象的蛋白質(zhì)）。5啟動子中的元件通?？梢苑譃閮煞N（核心啟動子元件核心啟動子元件）和（上游啟動子上游啟動子元件元件）。6分子生物學(xué)的研究內(nèi)容主要包含（結(jié)構(gòu)分子生物學(xué)結(jié)構(gòu)分子生物學(xué)）、（基因表達與調(diào)控基因表達與調(diào)控）、（DNADNA重組技術(shù)重組技術(shù)）三部分。7證明DNA是遺傳物質(zhì)的兩個關(guān)鍵性實驗是（肺炎球菌感染小鼠肺炎球菌感染小鼠）、（T2T2噬菌體感染大腸桿菌菌體感染大腸桿菌）這兩個實驗中主要的論點證據(jù)是（生物體吸收的外源生物體吸收的外源DNADNA改變了其遺傳潛能改變了其遺傳潛能）。8HNRNA與MRNA之間的差別主要有兩點（HNRNAHNRNA在轉(zhuǎn)變?yōu)樵谵D(zhuǎn)變?yōu)镸RNAMRNA的過程中的過程中經(jīng)過剪接經(jīng)過剪接，）、（MRNAMRNA的5′5′末端被加上一個末端被加上一個M7PGPPPM7PGPPP帽子，在帽子，在MRNA3′MRNA3′末端多了一個多聚腺末端多了一個多聚腺苷酸苷酸POLYAPOLYA尾巴尾巴）。9蛋白質(zhì)多亞基形式的優(yōu)點是（亞基對亞基對DNADNA的利用來說是一種經(jīng)濟的方法的利用來說是一種經(jīng)濟的方法）、（可以減少蛋白質(zhì)合成過程中隨機的錯誤對蛋白質(zhì)活性的影響可以減少蛋白質(zhì)合成過程中隨機的錯誤對蛋白質(zhì)活性的影響）、（活性能夠非活性能夠非常有效和迅速地被打開和被關(guān)閉常有效和迅速地被打開和被關(guān)閉）。10蛋白質(zhì)折疊機制首先成核理論的主要內(nèi)容包括（成核成核）、（結(jié)構(gòu)充實結(jié)構(gòu)充實）、（最后重排最后重排）。11半乳糖對細菌有雙重作用；一方面（可以作為碳源供細胞生長可以作為碳源供細胞生長）；另一方面（它又是細胞壁的成分它又是細胞壁的成分）。所以需要一個不依賴于CAMPCRP的啟動子S2進行本底水平的永久型合成；同時需要一個依賴于CAMPCRP的啟動子S1對高水平合成進行調(diào)節(jié)。有G時轉(zhuǎn)錄從（S2S2）開始，無G時轉(zhuǎn)錄從（S1S1）開始。12DNA重組技術(shù)也稱為（基因克隆基因克?。┗颍ǚ肿涌寺》肿涌寺。?。最終目的是（把一個把一個

簡介：1醫(yī)學(xué)細胞與分子生物學(xué)習(xí)題庫標準答案醫(yī)學(xué)細胞與分子生物學(xué)習(xí)題庫標準答案一、名詞解釋一、名詞解釋1高度重復(fù)基因在真核生物細胞基因組中重復(fù)出現(xiàn)可達106次以上的DNA序列，稱為高度重復(fù)序列基因或高度重復(fù)序列DNA。2斷裂基因真核生物大部分基因含有內(nèi)含子，基因是不連續(xù)的，故稱斷裂基因。3基因組細胞或生物體的整套單倍體遺傳物質(zhì)，稱為基因組?；蚪M的大小用全部DNA的堿基對總數(shù)表示。4基因是核酸分子中遺傳信息的基本單位，是指RNA序列信息及表達這些信息所必需的全部核苷酸序列?，F(xiàn)代分子生物學(xué)的基因概念是合成有功能的蛋白質(zhì)或RNA所必需的全部DNA序列（除部分病毒RNA），即一個基因不僅包括編碼蛋白質(zhì)或RNA的核酸序列，還應(yīng)包括為保證轉(zhuǎn)錄所必需的調(diào)控序列。5微衛(wèi)星DNA6基因文庫是指含有某種生物體（或組織、細胞）全部基因的隨機片段的重組DNA克隆群體。7內(nèi)含子真核生物DNA分子中插入外顯子之間的非編碼序列。8外顯子真核生物DNA分子中編碼蛋白質(zhì)的序列。9基因表達的調(diào)控機體的各種細胞中含有相同的遺傳信息相同的結(jié)構(gòu)基因，但并非在所有細胞中同時表達，而必須根據(jù)機體的不同發(fā)育階段、不同的組織細胞及不同的功能狀態(tài)，選擇性、程序性地表達特定數(shù)量的特定基因，這就叫基因表達的調(diào)控。10衛(wèi)星DNA是出現(xiàn)在非編碼區(qū)的串聯(lián)重復(fù)序列。11基因表達是指原核生物和真核生物基因組中特定的結(jié)構(gòu)基因所攜帶的遺傳信息，經(jīng)過轉(zhuǎn)錄、翻譯等一系列過程，合成具有特定的生物學(xué)功能的各種蛋白質(zhì)。表現(xiàn)出特定的生物學(xué)效應(yīng)的全過程。12增強子指位于啟動子上游或下游并通過啟動子增強鄰近基因轉(zhuǎn)錄效率的DNA順序，增強子本身不具備啟動子活性。13順式作用元件指某些能影響基因表達但不編碼蛋白質(zhì)和RNA的DNA序列，按照功能分為啟動子、增強子、終止子、沉默子和衰減子等。3重組體的過程，其產(chǎn)物常常稱為重組子。重組體是由兩種不同來源的DNA組合而成，所以又稱為異源嵌合DNA。28轉(zhuǎn)化29感受態(tài)細胞30銜接物31溶原生長32探針是指帶有放射性同位素、生物素或其他活性物質(zhì)標記的某種特定的DNA或RNA片段，用于核酸雜交技術(shù)以檢測待測樣品中的靶序列。33核酸雜交來源不同的兩條單鏈核酸分子通過堿基互補可形成異源雙螺旋，稱為核酸分子雜交。34陽性克隆是指目的DNA轉(zhuǎn)化入宿主細胞的克隆。35陰性克隆36PCRPCR是一種體外擴增特異DNA片段的技術(shù)其原理類似于DNA的體內(nèi)擴增。它包括高溫變性、低溫退火、中溫延伸三個基本步驟。37固相雜交結(jié)合于某種固相上的待測樣品，與溶解在雜交液中的探針進行雜交，稱為固相雜交。38液相雜交39預(yù)雜交為減少探針與廣泛存在的非互補核酸的非特異性結(jié)合，在雜交前可用封閉物將這些非特異性位點封閉。這一在雜交前的處理過程，稱為預(yù)雜交。40印跡雜交41雜交嚴格度42解鏈溫度43增色效應(yīng)DNA變性后，DNA溶液的紫外吸收作用增強的效應(yīng)，可以作為DNA變性的指標。44C值每種真核生物的單倍體基因組中的全部DNA量稱為C值。45假陽性克隆46C值悖理C值與生物進化復(fù)雜性不相對應(yīng)的現(xiàn)象，稱為C值悖理。47基因簇48轉(zhuǎn)基因49基因家族真核細胞的基因組中有許多來源相同、結(jié)構(gòu)相似、功能相關(guān)的基

簡介：貴陽中醫(yī)學(xué)院實驗中心分子生物學(xué)實驗室進室須知歡迎您進入本實驗室進行研究工作，請您務(wù)必先仔細閱讀進室須知1進入該室的研究人員必須認真閱讀實驗中心及本室各項規(guī)章制度，初次實驗者須有專人指導(dǎo)和帶領(lǐng)。2本實驗室主要是向每一位研究者（或研究生）提供與實驗相關(guān)的、共享的操作平臺。3本實驗室包括核酸提取分析室、電泳室、儀器室、凈化室、材料消毒室、組培室。4我們將對初進實驗室者或?qū)δ词褂眠^的相關(guān)儀器進行使用指導(dǎo)，以保證您的實驗?zāi)茼樌M行，并同時保證實驗儀器設(shè)備不被損壞。5本實驗室將向您提供所有正常運行的設(shè)備儀器，提供所有儀器的中文操作規(guī)程以方便您使用，請您嚴格按照操作規(guī)程進行操作，保證實驗設(shè)備安全正常運轉(zhuǎn)。6本實驗室不向您提供實驗者實驗所需的試劑、耗材，需要您自購、自備、自管。為了您使用方便，我們?yōu)槟峁┕褡咏栌茫员隳９芎脗€人實驗物品。7本實驗室不對您的課題具體安排負責(zé)，也不對您的實驗結(jié)果承擔(dān)責(zé)任。8為了保證實驗室的正常運行，您離開實驗室時請退還本室借用物品，遺失者將按管理制度作賠償。9進室后請您嚴格遵守實驗室的管理制度和注意事項，嚴格按照操作程序進行操作，并按登記本要求進行登記，如實填寫儀器工作狀態(tài)，發(fā)現(xiàn)異常立即匯報，保證實驗室正常、安全、有效地運行。謝謝您的合作祝您實驗順利實驗者簽字聯(lián)系電話導(dǎo)師簽字聯(lián)系電話郵箱年月日補充說明備注在讀研究生需導(dǎo)師簽字。

簡介：第一章概念基因基因指貯存有功能的蛋白質(zhì)多肽鏈或RNA序列及表達這些信息所需的全部核苷酸序列，由核酸的一些特定堿基序列構(gòu)成的表達遺傳信息的功能單位。結(jié)構(gòu)基因結(jié)構(gòu)基因基因中編碼RNA或蛋白質(zhì)的DNA序列。能參與代謝活動或維持組織結(jié)構(gòu)。調(diào)節(jié)基因調(diào)節(jié)基因基因中編碼RNA或蛋白質(zhì)的DNA序列。調(diào)控其他基因的表達。基因組基因組C值矛盾值矛盾C值是一種生物基因組恒定的DNA含量，反映基因組大小，真核生物基因組的大小并非都與其進化程度呈正相關(guān)的現(xiàn)象為C值矛盾。RFLP（限制性片段長度多態(tài)性）（限制性片段長度多態(tài)性）同一物種不同個體基因組存在DNA多態(tài)性，且約10％多態(tài)性位點導(dǎo)致限制性酶切位點的形成或消失，因而所含限制性酶切位點的數(shù)目和分布不同，其限制性片段的種類和長度也不同。SNP（單核苷酸多態(tài)性）（單核苷酸多態(tài)性）指在基因組水平上由單個核苷酸變異產(chǎn)生的DNA多態(tài)性。真核細胞和原核細胞基因結(jié)構(gòu)的差異（斷裂基因）真核細胞基因組特點如非編碼序列占絕大部分、重復(fù)序列、基因家族真核細胞基因組特點如非編碼序列占絕大部分、重復(fù)序列、基因家族染色體DNA是線性分子，含復(fù)制起點、著絲粒DNA、端粒等功能元件；細胞核DNA形成染色體結(jié)構(gòu)，染色體數(shù)目一定，體細胞一般是二倍體；基因組序列中僅有不到10％是編碼序列；基因在基因組中散在分布；基因組序列中包含高度重復(fù)序列、中度重復(fù)序列等大量重復(fù)序列；蛋白質(zhì)的編碼序列大都屬于單一序列；存在各種基因家族；含大量轉(zhuǎn)座元件。原核細胞基因組特點如編碼序列占絕大部分、類核、質(zhì)粒原核細胞基因組特點如編碼序列占絕大部分、類核、質(zhì)?；蚪MDNA通常為單一閉環(huán)雙鏈分子，只有一個復(fù)制起點；基因組序列的50％是編碼序列；非編碼序列主要是一些調(diào)控序列；所含基因的數(shù)目比病毒多，并且多形成操縱子結(jié)合。病毒基因組特點如重疊基因病毒基因組特點如重疊基因所含核酸的種類與結(jié)構(gòu)、分子數(shù)不同；基因組較小，為單倍體并且所含基因為單拷貝；基因組序列基本上都是編碼序列；基因的連續(xù)性不同；相關(guān)基因串聯(lián)成一個轉(zhuǎn)錄單位。第五章概念基因表達基因表達是由基因指導(dǎo)合成功能產(chǎn)物RNA和蛋白質(zhì)的過程，體現(xiàn)了DNA與蛋白質(zhì)、基因型與表型、遺傳與代謝的關(guān)系。管家基因管家基因編碼細胞基本組分的基因和細胞基本代謝相關(guān)基因。順式作用元件順式作用元件是基因序列的一部分，是RNA聚合酶或調(diào)節(jié)蛋白的結(jié)合位點，包括啟動子、終止子，原核生物的操縱基因和激活蛋白結(jié)合位點、真核生物的增強子和沉默子等。反式作用因子反式作用元件即調(diào)節(jié)基因，通過編碼產(chǎn)物調(diào)控基因表達，其編碼產(chǎn)物為反式作用因子。正調(diào)節(jié)正調(diào)節(jié)指調(diào)節(jié)蛋白與調(diào)控序列結(jié)合促進基因表達。負調(diào)節(jié)負調(diào)節(jié)指調(diào)節(jié)蛋白與調(diào)控序列結(jié)合阻遏基因表達。增強子增強子是真核生物促進轉(zhuǎn)錄的一類調(diào)控序列，與啟動子可以相鄰、重疊或包含，通過結(jié)合調(diào)節(jié)蛋白、改變?nèi)旧|(zhì)構(gòu)象而促進一種或一組基因的轉(zhuǎn)錄。印跡基因印跡基因來自父母的本源基因，一方表達一方不表達。原核生物基因表達調(diào)控的特點原核生物基因表達調(diào)控的特點①既有正調(diào)節(jié)，又有負調(diào)節(jié)②調(diào)節(jié)蛋白都是DNA結(jié)合蛋白③存在衰減調(diào)控機制④存在應(yīng)急應(yīng)答調(diào)控機制操縱子的基本結(jié)構(gòu)操縱子的基本結(jié)構(gòu)一個啟動子、一個操縱基因及其所控制的一組功能相關(guān)的結(jié)構(gòu)基因等組成。乳糖操縱子的兩種調(diào)控模式乳糖操縱子的兩種調(diào)控模式P118試劑的作用試劑的作用蛋白酶K（水解由脂肪族氨基酸、芳香族氨基酸的羧基形成的肽鍵，使DNA游離）、EDTA（使細菌懸?。?、SDS（去污劑裂解細胞、使蛋白質(zhì)變性）、巰基乙醇（快速裂解細胞，解離和蛋白，釋放RNA）、溴化乙錠（染色、解旋DNA）、上樣緩沖液（監(jiān)測電泳進程，增加樣本密度）、DDNTP（DNA測序）核酸純度判定比值核酸純度判定比值①純度較高的DNA≈18如果18可能含有RNA或DNA部分降解OD260OD280OD260OD280如果20可能有RNA降解OD260OD280核酸電泳用于構(gòu)型分析核酸電泳用于構(gòu)型分析①閉環(huán)DNA②快環(huán)DNA③線性DNADNA測序方法類型測序方法類型①鏈終止發(fā)②化學(xué)降解發(fā)③DNA測序自動化第八章概念雜交雜交不同來源單鏈核酸的退火。探針探針是用于指示特定物質(zhì)的性質(zhì)或狀態(tài)的一類標記分子。印跡印跡是指將核酸和蛋白質(zhì)等樣品用類似于吸墨跡的方法從凝膠等電泳或?qū)游鼋橘|(zhì)中轉(zhuǎn)移到合適的印跡膜上，樣品在印跡膜上的相對位置與在凝膠中時一樣。DNA印跡和印跡和RNA印跡方法的差別印跡方法的差別①電泳分離DNA片段通過瓊脂糖凝膠電泳按長度分離；為了保持RNA呈單鏈狀態(tài)進行電泳，以使RNA按分子大小分離，需要先用變性劑將RNA樣品完全變性，在通過瓊脂糖凝膠電泳。②變性DNA用堿液處理電泳凝膠；RNA只能用甲醛、乙二醛、二甲亞砜等變性。蛋白質(zhì)印跡與核酸印跡方法的差別蛋白質(zhì)印跡與核酸印跡方法的差別“探針”不同，是能與目的蛋白特異性結(jié)合的抗體。DNA印跡（印跡（SOUTHERNBLOT）、RNA印跡（印跡（NTHERNBLOTTING）、蛋白質(zhì)印跡（、蛋白質(zhì)印跡（WESTERNBLOT）對應(yīng)的英文簡稱第九章基因芯片的原理基因芯片的原理先將大量已知序列的DNA片段作為探針按照一定的陣列高密度固定于基片表面，這樣陣列中的每一個點實際上代表了一種特定基因，然后與用熒光素標記的待測核酸進行雜交。用專門儀器檢測芯片上的雜交信號，經(jīng)過計算機分析處理，獲得待測核酸的各種信息。第十章PCR反應(yīng)體系反應(yīng)體系組成包括DNA聚合酶、DNA引物、DNTP原料、目的DNA模板和緩沖溶液等。PCR反應(yīng)原理反應(yīng)原理變性、退火、延伸，以上三部的循環(huán)。多重多重PCR、ASPCR、RTPCR、QPCR的應(yīng)用的應(yīng)用基因組DNA擴增、基因分離、基因克隆、克隆鑒定、定點誘變、突變鑒定、探針制備、DNA測序等。

簡介：1第十四、二十一章第十四、二十一章基因工程、分子生物學(xué)常用技術(shù)段里原理及其應(yīng)用基因工程、分子生物學(xué)常用技術(shù)段里原理及其應(yīng)用復(fù)習(xí)測試復(fù)習(xí)測試（一）名詞解釋（一）名詞解釋1DNA重組2基因工程3限制性核酸內(nèi)切酶4基因組DNA文庫5CDNA文庫6聚合酶鏈反應(yīng)（PCR）7載體8轉(zhuǎn)化9感染10核酸分子雜交11SOUTHERN印跡雜交12NTHERN印跡雜交13斑點印跡14原位雜交15DNA芯片16基因診斷17基因治療（二）選擇題（二）選擇題A型題型題1限制性核酸內(nèi)切酶作用特點不包括A在對稱序列處切開DNABDNA兩鏈的切點常不在同一位點C酶切后產(chǎn)生的DNA片段多半具有粘性互補末端DDNA兩鏈的切點常在同一位點E酶辨認的堿基一般為4～6個2限制性核酸內(nèi)切酶A可將單鏈DNA任意切斷B可將雙鏈DNA序列特異切開C可將兩個DNA分子連接起來D不受DNA甲基化影響E由噬菌體提取而得3CDNA文庫包括該種生物的A某些蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)基因B所有基因組C結(jié)構(gòu)基因與不表達的調(diào)控區(qū)D內(nèi)含子和調(diào)節(jié)區(qū)E內(nèi)含子和外顯子3B噬菌體C經(jīng)改造的逆轉(zhuǎn)錄病毒D人類DNAE酵母質(zhì)粒11常用質(zhì)粒有以下特性A是線形雙鏈DNAB插入片段的容量比Λ噬菌體DNA大C含有抗生素抗性基因D含有同一限制性核酸內(nèi)切酶的多個切口E不隨細菌繁殖而進行自我復(fù)制12在重組體中切出插入片段最常用的方法是A以重組時所用限制性核酸內(nèi)切酶將其切出B用其它限制性酶將其切出C用S1核酸酶將其切出D用DNA酶將切出E用多種限制性內(nèi)切酶將其切出13利用PCR擴增特異DNA序列主要原理之一是A反應(yīng)體系內(nèi)存在特異DNA片段B反應(yīng)體系內(nèi)存在特異RNA片段C反應(yīng)體系內(nèi)存在特異DNA引物D反應(yīng)體系內(nèi)存在特異RNA引物E反應(yīng)體系內(nèi)存在的TAQDNA聚合酶具有識別特異DNA序列的作用14表達人類蛋白質(zhì)的最理想的細胞體系是A大腸桿菌表達體系B原核表達體系C酵母表達體系D昆蟲表達體系E哺乳類細胞表達體系15限制性核酸內(nèi)切酶切割DNA后產(chǎn)生A3′磷酸基末端和5′羥基末端B5′磷酸基末端和3′羥基末端C3′磷酸基末端和5′磷酸基末端D5′羥基末端和3′羥基末端E3′羥基末端和5′羥基末端及磷酸16下列描述最能確切表達質(zhì)粒DNA作為克隆載體特性的是A小型環(huán)狀雙鏈DNA分子B攜帶有某些抗生素抗性基因C在細胞分裂時恒定地傳給子代細胞D具有自我復(fù)制功能

簡介：時間就是金錢，效率就是生命唯有惜時才能成功，唯有努力方可成就“生物化學(xué)與分子生物學(xué)生物化學(xué)與分子生物學(xué)”題庫第二軍醫(yī)大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)部第二軍醫(yī)大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)部生物化學(xué)與分子生物學(xué)教研室編制生物化學(xué)與分子生物學(xué)教研室編制2004年7月時間就是金錢，效率就是生命唯有惜時才能成功，唯有努力方可成就C、氨基酸殘基側(cè)鏈處螺旋的外側(cè)D、通過二硫鍵維持其穩(wěn)定E、螺旋每周含36個氨基酸殘基7、學(xué)習(xí)“蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)與功能”的理論后，我們認識到概念錯誤是（）。A、蛋白質(zhì)一級結(jié)構(gòu)決定空間結(jié)構(gòu)B、蛋白質(zhì)變性是肽鍵斷裂所致C、四級結(jié)構(gòu)蛋白質(zhì)必定由二條或二條以上多肽鏈組成D、活性不僅取決于其一級結(jié)構(gòu)，還依賴于高級結(jié)構(gòu)的正確E、活性蛋白質(zhì)必須具有三級或三級以上結(jié)構(gòu)8、蛋白質(zhì)分子發(fā)生變性的原因是（）。A、分子內(nèi)肽鍵的斷裂B、酶水解部分肽鏈片段C、尿素破壞分子的空間結(jié)構(gòu)D、硫酸銨沉淀蛋白質(zhì)分子E、蛋白質(zhì)分子結(jié)晶析出9、有關(guān)“蛋白質(zhì)分子結(jié)構(gòu)與功能”的描述，不正確的是（）。A、三級結(jié)構(gòu)是指整條肽鏈所有原子的相對空間位置B、蛋白質(zhì)分子中的亞基都是相同的C、肽鍵的自由旋轉(zhuǎn)形成肽鏈的不同空間構(gòu)象D、酶原的激活改變分子的一級結(jié)構(gòu)E、亞基是四級結(jié)構(gòu)蛋白質(zhì)分子才具有的組成單位。10、在280NM波長處有最大吸收峰的氨基酸是A、THR和METB、CYS和ASNC、TRP和TYRD、GLU和PROE、LYS和SER11、維持蛋白質(zhì)二級結(jié)構(gòu)穩(wěn)定的主要因素是。A、靜電作用力B、氫鍵C、疏水鍵D、范德華作用力E、二硫鍵12、關(guān)于蛋白質(zhì)Β折疊結(jié)構(gòu)的概念，正確的是（）A、其肽平面由C、H、O、N四個原子組成。B、它只有反平行式結(jié)構(gòu)，沒有平行式結(jié)構(gòu)C、Α螺旋是右手螺旋，Β折疊是左手螺旋D、主鏈骨架成鋸齒狀形成折疊的片層

簡介：分子生物學(xué)知識點總結(jié)1蛋白質(zhì)組PROTEOMEPROTEINSEXPRESSEDBYAGENOME即基因組表達的全套蛋白質(zhì)。蛋白質(zhì)組學(xué)（PROTEMICS）則是以蛋白質(zhì)組為研究對象，從整體角度，分析細胞或組織內(nèi)蛋白質(zhì)構(gòu)成的動態(tài)變化和活動規(guī)律的科學(xué)。（相互作用網(wǎng)絡(luò)PPI）2表達蛋白質(zhì)組學(xué)研究的基本流程蛋白樣品的制備及定量總蛋白的雙向凝膠電泳（染色）凝膠分析軟件分析膠內(nèi)酶解（胰肽酶）質(zhì)譜分析（肽質(zhì)量指紋圖譜）數(shù)據(jù)庫搜索鑒定蛋白性質(zhì)3雙向凝膠電泳相互垂直的兩個方向上，分別基于蛋白質(zhì)不同的等電點和分子量，先經(jīng)等電聚焦電泳ISOELECTRICFOCUSING，IEF，再經(jīng)變性聚丙烯酰胺凝膠電泳（SDSPAGE）把復(fù)雜的蛋白質(zhì)成分分離。4比較蛋白質(zhì)組學(xué)通過比較同一個體腫瘤細胞（組織）與正常細胞（組織）之間蛋白質(zhì)在表達數(shù)量、表達位置和修飾狀態(tài)上的差異，發(fā)現(xiàn)與腫瘤發(fā)病或者發(fā)展有關(guān)的分子標記，用來作為腫瘤診斷的腫瘤相關(guān)蛋白。5軟電離所謂“軟電離”是指樣品分子電離時保留整個分子的完整性，不會形成碎片離子。6腫瘤血清蛋白質(zhì)分析方法（TUMSEROLOGICPROTEOMEANALYSIS，SERPA）是從腫瘤免疫學(xué)觀點出發(fā)建立的一種蛋白質(zhì)組學(xué)和腫瘤免疫學(xué)相結(jié)合的方法。SERPA其實驗過程如下①雙向電泳分離腫瘤組織（細胞）總蛋白質(zhì)；②轉(zhuǎn)膜；③建立WESTERNBLOTTING蛋白質(zhì)印跡反應(yīng)圖譜（與患者或正常人血清反應(yīng)）；④軟件分析確定差異反應(yīng)的蛋白質(zhì)斑點；⑤質(zhì)譜鑒定和生物信息對腫瘤組織平行膠REPLICAGEL中相應(yīng)的差異蛋白質(zhì)點進行鑒定，篩選出腫瘤分子標志物；⑥用ELISA、免疫組化等方法對該分子標志物進行原位驗證，或者進一步分析該蛋白功能，研究其在腫瘤進展中發(fā)揮的作用。7蛋白質(zhì)芯片是將大量蛋白質(zhì)分子按預(yù)先設(shè)置的排列固定于一種載體表面，形成微陣列，根據(jù)蛋白質(zhì)分子間特異性結(jié)合的原理，構(gòu)建微流體生物化學(xué)分析系統(tǒng)，以實現(xiàn)對生物分子的準確、快速、大信息量的檢測。8功能蛋白質(zhì)組學(xué)是指對蛋白質(zhì)間、蛋白質(zhì)與DNARNA間的相互作用的研究。以細胞內(nèi)與某個功能有關(guān)或某種條件下的一群蛋白質(zhì)為主要研究內(nèi)容，由此建立細胞內(nèi)外信號傳遞的復(fù)雜網(wǎng)絡(luò)。研究方法主要有蛋白質(zhì)芯片技術(shù)目前常用蛋白質(zhì)芯片有1SELDITOFMS蛋白質(zhì)芯片2抗體芯片3靶蛋白質(zhì)芯片4液相蛋白質(zhì)芯片噬菌體展示技術(shù)酵母雙雜交系統(tǒng)15CASPASE含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶，是一組對底物的天冬氨酸部位有特異水解作用的，活性中心富含半胱氨酸的蛋白水解酶。CASPASE功能1細胞骨架蛋白和核纖層蛋白，導(dǎo)致細胞解體成凋亡小體2激活DNA酶（CASPASEACTIVATEDDNASE，CAD）。CADCASPASE激活的DNA酶正常情況下CAD與其抑制劑ICAD結(jié)合，在胞質(zhì)內(nèi)，無活性。凋亡時CASPASE水解ICAD游離的CAD有活性，進入胞核，切割DNA。3滅活凋亡抑制物如BCL2、ICAD4水解與DNA損傷修復(fù)相關(guān)的酶和蛋白質(zhì)如聚ADP核糖多聚酶（POLYADPRIBOSEPOLYMERASEPARP）16死亡受體途徑外源性途徑死亡受體TNFR1、FAS、CAR1、NGFR、DR3、DR4、DR5等是一類通過與相應(yīng)配體結(jié)合，傳遞細胞凋亡信號的細胞膜蛋白。通路（PATHWAY）死亡配體（細胞外）死亡受體（細胞膜）相關(guān)蛋白（中介蛋白，細胞質(zhì)內(nèi)）激活CASPASE8激活CASPASE3細胞凋亡17線粒體損傷途徑內(nèi)源性途徑線粒體是細胞生命活動的控制中心，它不僅是細胞呼吸鏈和氧化磷酸化的中心，而且是細胞凋亡的調(diào)控中心。①釋放細胞色素C（CYTC）②釋放凋亡誘導(dǎo)因子（APOPTOSISINDUCINGFACT，AIF）和限制性核酸內(nèi)切酶G（ENDOG）③釋放SMACDIABLOTHESECONDMITOCHONDRIADERIVEDACTIVATOFCASPASESMACDIRECTIAPBINGDINGPROTEINDIABLO④釋放活性氧ROS18細胞周期1G1期（FIRSTGAP）從有絲分裂到DNA復(fù)制前的一段時期，又稱合成前期，此期主要合成RNA和核糖體。該期特點是物質(zhì)代謝活躍，迅速合成RNA和蛋白質(zhì)，細胞體積顯著增大。這一期的主要意義在于為下階段S期的DNA復(fù)制作好物質(zhì)和能量的準備。2S期（SYNTHESIS）即DNA合成期，在此期，除了合成DNA外，同時還要合成組蛋白。DNA復(fù)制所需要的酶都在這一時期合成。3G2期（SECONDGAP）期為DNA合成后期，是有絲分裂的準備期。在這一時期，DNA合成終止，大量合成RNA及蛋白質(zhì)，包括微管蛋白和促成熟因子等。

簡介：1第一章第一章緒論緒論1染色體具有哪些作為遺傳物質(zhì)的特征染色體具有哪些作為遺傳物質(zhì)的特征答①分子結(jié)構(gòu)相對穩(wěn)定；②能夠自我復(fù)制，使親子代之間保持連續(xù)性；③能夠指導(dǎo)蛋白質(zhì)的合成，從而控制整個生命過程；④能夠產(chǎn)生可遺傳的變異。。2什么是核小體簡述其形成過程。什么是核小體簡述其形成過程。答由DNA和組蛋白組成的染色質(zhì)纖維細絲是許多核小體連成的念珠狀結(jié)構(gòu)。核小體是由H2AH2BH3H4各兩個分子生成的八聚體和由大約200BP的DNA組成的。八聚體在中間，DNA分子盤繞在外，而H1則在核小體外面核小體的形成是染色體中DNA壓縮的第一階段。在核小體中DNA盤繞組蛋白八聚體核心，從而使分子收縮至原尺寸的17。200BPDNA完全舒展時長約68NM卻被壓縮在10NM的核小體中。核小體只是DNA壓縮的第一步。核小體長鏈200BP→核酸酶初步處理→核小體單體200BP→核酸酶繼續(xù)處理→核心顆粒146BP3簡述真核生物染色體的組成及組裝過程簡述真核生物染色體的組成及組裝過程答組成蛋白質(zhì)核酸。組裝過程1，首先組蛋白組成盤裝八聚體，DNA纏繞其上，成為核小體顆粒，兩個顆粒之間經(jīng)過DNA連接，形成外徑10NM的纖維狀串珠，稱為核小體串珠纖維；2，核小體串珠纖維在酶的作用下形成每圈6個核小體，外徑30NM的螺線管結(jié)構(gòu)；3，螺線管結(jié)構(gòu)再次螺旋化，形成超螺旋結(jié)構(gòu)；4，超螺線管，形成絆環(huán)，即線性的螺線管形成的放射狀環(huán)。絆環(huán)在非組蛋白上纏繞即形成了顯微鏡下可見的染色體結(jié)構(gòu)。4簡述簡述DNA的一的一二三級結(jié)構(gòu)的特征三級結(jié)構(gòu)的特征答DNA一級結(jié)構(gòu)4種核苷酸的的連接及排列順序，表示了該DNA分子的化學(xué)結(jié)構(gòu)DNA二級結(jié)構(gòu)指兩條多核苷酸鏈反向平行盤繞所生成的雙螺旋結(jié)構(gòu)DNA三級結(jié)構(gòu)指DNA雙螺旋進一步扭曲盤繞所形成的特定空間結(jié)構(gòu)6簡述簡述DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)及其在現(xiàn)代分子生物學(xué)發(fā)展中的意義雙螺旋結(jié)構(gòu)及其在現(xiàn)代分子生物學(xué)發(fā)展中的意義1DNA雙螺旋是由兩條互相平行的脫氧核苷酸長鏈盤繞而成的多核苷酸的方向由核苷酸間的磷酸二酯鍵的走向決定，一條是53，另一條是35。（2）DNA雙螺旋中脫氧核糖和磷酸交替連接，排在外側(cè)，構(gòu)成基本骨架，堿基排列在內(nèi)側(cè)（3）其兩條鏈上的堿基通過氫鍵相結(jié)合，形成堿基對意義該模型揭示了DNA作為遺傳物質(zhì)的穩(wěn)定性特征，最有價值的是確認了堿基配對原則，這是DNA復(fù)制、轉(zhuǎn)錄和反轉(zhuǎn)錄的分子基礎(chǔ)，亦是遺傳信息傳遞和表達的分子基礎(chǔ)。該模型的提出是20世紀生命科學(xué)的重大突破之一，它奠定了生物化學(xué)和分子生物學(xué)乃至整個生命科學(xué)飛速發(fā)展的基石。7DNA復(fù)制通常采取哪些方式復(fù)制通常采取哪些方式①線性DNA雙鏈的復(fù)制將線性復(fù)制子轉(zhuǎn)變?yōu)榄h(huán)狀或多聚分子3個相同或高度同源的IS序列，表明IS序列插入到某個功能基因兩端時就可能產(chǎn)生復(fù)合轉(zhuǎn)座子。一旦形成復(fù)合轉(zhuǎn)座子，IS序列就不能再單獨移動，因為它們的功能被修飾了，只能作為復(fù)合體移動。大部分情況下，這些轉(zhuǎn)座子的轉(zhuǎn)座能力是由IS序列決定和調(diào)節(jié)的。除了末端帶有IS序列的復(fù)合轉(zhuǎn)座子外，還存在一些沒有IS序列的，體積龐大的轉(zhuǎn)座子（5000BP以上）TNA家族。12請說說插入序列與復(fù)合型轉(zhuǎn)座子之間異同。請說說插入序列與復(fù)合型轉(zhuǎn)座子之間異同。答轉(zhuǎn)座子是存在于染色體DNA上的可自主復(fù)制和位移的基本單位。最簡單的轉(zhuǎn)座子不含有任何宿主基因而被稱為插入序列（IS），他們是細菌染色體或質(zhì)粒DNA的正常組成部分。她常常被定位到特定的基團中，造成基因突變。、復(fù)合式轉(zhuǎn)座子是一類帶有某些抗藥性基因的轉(zhuǎn)座子，其兩翼是相同的或高度同源的IS序列，且IS序列是不能單獨移動的只能作為復(fù)合體移動而且IS序列也決定和調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)座子的轉(zhuǎn)座能力。也是有沒有IS序列的轉(zhuǎn)座子TNA家族，其兩翼帶有38BP的倒置重復(fù)序列13組蛋白上都存在哪些修飾其作用是什么組蛋白上都存在哪些修飾其作用是什么P27答甲基化、乙?；⒘姿峄?、泛素化及ADP核糖基化等。以甲基化（基因激活與沉默）、乙?；ㄞD(zhuǎn)錄激活，轉(zhuǎn)錄延伸，DNA修復(fù)拼接復(fù)制，染色體組裝，基因沉默，信號轉(zhuǎn)導(dǎo)）為主。影響染色體的結(jié)構(gòu)和功能、基因的表達和沉默。第三章第三章生物信息的傳遞（上）生物信息的傳遞（上）從DNA到RNA1，什么是編碼鏈什么是模版鏈，什么是編碼鏈什么是模版鏈答與MRNA序列相同的那條DNA鏈稱為編碼鏈（或有意義鏈）；另一條根據(jù)堿基互補原則指導(dǎo)MRNA合成DNA鏈稱為模版鏈（或反義鏈）。2，簡述，簡述RNARNA轉(zhuǎn)錄的概念及其基本過程。轉(zhuǎn)錄的概念及其基本過程。答RNA轉(zhuǎn)錄以DNA中的一條單鏈為模板，游離堿基為原料，在DNA依賴的RNA聚合酶催化下合成RNA鏈的過程。基本過程模版識別轉(zhuǎn)錄開始轉(zhuǎn)錄延伸轉(zhuǎn)錄終止。3，大腸桿菌的，大腸桿菌的RNARNA聚合酶有哪些組成成分各個亞基的作用如何聚合酶有哪些組成成分各個亞基的作用如何答大腸桿菌的RNA聚合酶由2個Α亞基、一個Β亞基、一個Β’亞基和一個Ω亞基組成的核心酶，加上一個Σ亞基后則成為聚合酶全酶。Α亞基肯能與核心酶的組裝及啟動子的識別有關(guān)，并參與RNA聚合酶和部分調(diào)節(jié)因子的相互作用；Β亞基和Β’亞基組成了聚合酶的催化中心，Β亞基能與模版DNA、新生RNA鏈及核苷酸底物相結(jié)合。4，什么是封閉復(fù)合物、開放復(fù)合物以及三元復(fù)合物，什么是封閉復(fù)合物、開放復(fù)合物以及三元復(fù)合物答模版的識別階段，聚合酶與啟動子可逆性結(jié)合形成封閉性復(fù)合物；封閉性復(fù)合物形成后，此時，DNA鏈仍然處于雙鏈狀態(tài)，伴隨著DNA構(gòu)象的重大變化，封閉性復(fù)合物轉(zhuǎn)化為開放復(fù)合物；開放復(fù)合物與最初的兩個NTP相結(jié)合并在這兩個核苷酸之間形成磷酸二脂鍵后即轉(zhuǎn)變成包括RNA聚合酶、DNA和新生RNA的三元復(fù)合物。5，簡述，簡述Σ因子的作用。因子的作用。答1，Σ因子的作用是負責(zé)模版鏈的選擇和轉(zhuǎn)錄的起始，它是酶的別構(gòu)效應(yīng)物，使酶專一性識別模版上的啟動子；2，Σ因子可以極大的提高RNA聚合酶對啟動子區(qū)DNA序列的親和力；3，Σ因子還能使RNA聚合酶與模版DNA上非特異性位點結(jié)合常數(shù)降低。6，什么是，什么是PRIBNOWPRIBNOWBOXBOX它的保守序列是什么它的保守序列是什么

簡介：核酸結(jié)構(gòu)與功能核酸結(jié)構(gòu)與功能一、填空題1病毒ΦX174及M13的遺傳物質(zhì)都是單鏈DNA。2AIDS病毒的遺傳物質(zhì)是單鏈RNA。3X射線分析證明一個完整的DNA螺旋延伸長度為34NM。4氫鍵負責(zé)維持AT間（或GC間）的親和力5天然存在的DNA分子形式為右手B型螺旋。二、選擇題（單選或多選）1證明DNA是遺傳物質(zhì)的兩個關(guān)鍵性實驗是肺炎球菌在老鼠體內(nèi)的毒性和T2噬菌體感染大腸桿菌。這兩個實驗中主要的論點證據(jù)是（C）。A從被感染的生物體內(nèi)重新分離得到DNA作為疾病的致病劑BDNA突變導(dǎo)致毒性喪失C生物體吸收的外源DNA（而并非蛋白質(zhì)）改變了其遺傳潛能DDNA是不能在生物體間轉(zhuǎn)移的，因此它一定是一種非常保守的分子E真核心生物、原核生物、病毒的DNA能相互混合并彼此替代21953年WATSON和CRICK提出（A）。A多核苷酸DNA鏈通過氫鍵連接成一個雙螺旋BDNA的復(fù)制是半保留的，常常形成親本子代雙螺旋雜合鏈C三個連續(xù)的核苷酸代表一個遺傳密碼D遺傳物質(zhì)通常是DNA而非RNAE分離到回復(fù)突變體證明這一突變并非是一個缺失突變3DNA雙螺旋的解鏈或變性打斷了互補堿基間的氫鍵，并因此改變了它們的光吸收特性。以下哪些是對DNA的解鏈溫度的正確描述（CD）A哺乳動物DNA約為45℃，因此發(fā)燒時體溫高于42℃是十分危險的B依賴于AT含量，因為AT含量越高則雙鏈分開所需要的能量越少C是雙鏈DNA中兩條單鏈分開過程中溫度變化范圍的中間值D可通過堿基在260NM的特征吸收峰的改變來確定E就是單鏈發(fā)生斷裂（磷酸二酯鍵斷裂）時的溫度4DNA的變性（ACE）。A包括雙螺旋的解鏈B可以由低溫產(chǎn)生C是可逆的D是磷酸二酯鍵的斷裂E包括氫鍵的斷裂5在類似RNA這樣的單鏈核酸所表現(xiàn)出的“二級結(jié)構(gòu)”中，發(fā)夾結(jié)構(gòu)的形成（AD）。A基于各個片段間的互補，形成反向平行雙螺旋B依賴于AU含量，因為形成的氫鍵越少則發(fā)生堿基配對所需的能量也越少C僅僅當兩配對區(qū)段中所有的堿基均互補時才會發(fā)生D同樣包括有像GU這樣的不規(guī)則堿基配對E允許存在幾個只有提供過量的自由能才能形成堿基對的堿基6DNA分子中的超螺旋（ACE）。從信息方面看，儲存在DNA中的信息是指堿基的順序，而堿基不參與核苷酸之間的共價連接，因此儲存在DNA的信息不會影響分子結(jié)構(gòu)，來自突變或重組的信息改變也不會破壞分子。2在何種情況下有可能預(yù)測某一給定的核苷酸鏈中“G”的百分含量答由于在DNA分子中互補堿基的含量相同的，因此只有在雙鏈中GC的百分比可知時，G（GC）真核基因組的哪些參數(shù)影響C0T12值答C0T12值受基因組大小和基因組中重復(fù)DNA的類型和總數(shù)影響。4哪些條件可促使DNA復(fù)性（退火）降低溫度、PH和增加鹽濃度。5為什么DNA雙螺旋中維持特定的溝很重要形成溝狀結(jié)構(gòu)是DNA與蛋白質(zhì)相互作用所必需。6大腸桿菌染色體的分子質(zhì)量大約是25109DA，核苷酸的平均分子質(zhì)量是330DA，兩個鄰近核苷酸對之間的距離是034NM，雙螺旋每一轉(zhuǎn)的高度（即螺距）是34NM，請問（1）該分子有多長（2）該DNA有多少轉(zhuǎn)答1堿基330DA，1堿基對660DA堿基對2510966038106KB染色體DNA的長度3810603413106NM13MM答轉(zhuǎn)數(shù)3810603434381057曾經(jīng)有一段時間認為，DNA無論來源如何，都是4個核苷酸的規(guī)則重復(fù)排列（如ATCG、ATCG、ATCG、ATCG），所以DNA缺乏作為遺傳物質(zhì)的特異性。第一個直接推翻該四核苷酸定理的證據(jù)是什么答在19491951年間，EGAFF發(fā)現(xiàn)（1）不同來源的DNA的堿基組成變化極大（2）A和T、C和G的總量幾乎是相等的（即GAFF規(guī)則）（3）雖然（AG）（CT）1，但（AT）（GC）的比值在各種生物之間變化極大8為什么在DNA中通常只發(fā)現(xiàn)AT和CG堿基配對答（1）CA配對過于龐大而不能存在于雙螺旋中；GT堿基對太小，核苷酸間的空間空隙太大無法形成氫鍵。（2）A和T通常形成兩個氫鍵，而C和G可形成三個氫鍵。正常情況下，可形成兩個氫鍵的堿基不與可形成三個氫鍵的堿基配對。9為什么只有DNA適合作為遺傳物質(zhì)答是磷酸二酯鍵連接的簡單核苷酸多聚體，其雙鏈結(jié)構(gòu)保證了依賴于模板合成的準確性，DNA的以遺傳密碼的形式編碼多肽和蛋白質(zhì)，其編碼形式多樣而復(fù)雜DNA的復(fù)制的復(fù)制

簡介：1第一章第一章緒論緒論1染色體具有哪些作為遺傳物質(zhì)的特征染色體具有哪些作為遺傳物質(zhì)的特征答①分子結(jié)構(gòu)相對穩(wěn)定；②能夠自我復(fù)制，使親子代之間保持連續(xù)性；③能夠指導(dǎo)蛋白質(zhì)的合成，從而控制整個生命過程；④能夠產(chǎn)生可遺傳的變異。。2什么是核小體簡述其形成過程。什么是核小體簡述其形成過程。答由DNA和組蛋白組成的染色質(zhì)纖維細絲是許多核小體連成的念珠狀結(jié)構(gòu)。核小體是由H2AH2BH3H4各兩個分子生成的八聚體和由大約200BP的DNA組成的。八聚體在中間，DNA分子盤繞在外，而H1則在核小體外面核小體的形成是染色體中DNA壓縮的第一階段。在核小體中DNA盤繞組蛋白八聚體核心，從而使分子收縮至原尺寸的17。200BPDNA完全舒展時長約68NM卻被壓縮在10NM的核小體中。核小體只是DNA壓縮的第一步。核小體長鏈200BP→核酸酶初步處理→核小體單體200BP→核酸酶繼續(xù)處理→核心顆粒146BP3簡述真核生物染色體的組成及組裝過程簡述真核生物染色體的組成及組裝過程答組成蛋白質(zhì)核酸。組裝過程1，首先組蛋白組成盤裝八聚體，DNA纏繞其上，成為核小體顆粒，兩個顆粒之間經(jīng)過DNA連接，形成外徑10NM的纖維狀串珠，稱為核小體串珠纖維；2，核小體串珠纖維在酶的作用下形成每圈6個核小體，外徑30NM的螺線管結(jié)構(gòu)；3，螺線管結(jié)構(gòu)再次螺旋化，形成超螺旋結(jié)構(gòu)；4，超螺線管，形成絆環(huán)，即線性的螺線管形成的放射狀環(huán)。絆環(huán)在非組蛋白上纏繞即形成了顯微鏡下可見的染色體結(jié)構(gòu)。4簡述簡述DNA的一的一二三級結(jié)構(gòu)的特征三級結(jié)構(gòu)的特征答DNA一級結(jié)構(gòu)4種核苷酸的的連接及排列順序，表示了該DNA分子的化學(xué)結(jié)構(gòu)DNA二級結(jié)構(gòu)指兩條多核苷酸鏈反向平行盤繞所生成的雙螺旋結(jié)構(gòu)DNA三級結(jié)構(gòu)指DNA雙螺旋進一步扭曲盤繞所形成的特定空間結(jié)構(gòu)6簡述簡述DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)及其在現(xiàn)代分子生物學(xué)發(fā)展中的意義雙螺旋結(jié)構(gòu)及其在現(xiàn)代分子生物學(xué)發(fā)展中的意義1DNA雙螺旋是由兩條互相平行的脫氧核苷酸長鏈盤繞而成的多核苷酸的方向由核苷酸間的磷酸二酯鍵的走向決定，一條是53，另一條是35。（2）DNA雙螺旋中脫氧核糖和磷酸交替連接，排在外側(cè)，構(gòu)成基本骨架，堿基排列在內(nèi)側(cè)（3）其兩條鏈上的堿基通過氫鍵相結(jié)合，形成堿基對意義該模型揭示了DNA作為遺傳物質(zhì)的穩(wěn)定性特征，最有價值的是確認了堿基配對原則，這是DNA復(fù)制、轉(zhuǎn)錄和反轉(zhuǎn)錄的分子基礎(chǔ)，亦是遺傳信息傳遞和表達的分子基礎(chǔ)。該模型的提出是20世紀生命科學(xué)的重大突破之一，它奠定了生物化學(xué)和分子生物學(xué)乃至整個生命科學(xué)飛速發(fā)展的基石。7DNA復(fù)制通常采取哪些方式復(fù)制通常采取哪些方式①線性DNA雙鏈的復(fù)制將線性復(fù)制子轉(zhuǎn)變?yōu)榄h(huán)狀或多聚分子3個相同或高度同源的IS序列，表明IS序列插入到某個功能基因兩端時就可能產(chǎn)生復(fù)合轉(zhuǎn)座子。一旦形成復(fù)合轉(zhuǎn)座子，IS序列就不能再單獨移動，因為它們的功能被修飾了，只能作為復(fù)合體移動。大部分情況下，這些轉(zhuǎn)座子的轉(zhuǎn)座能力是由IS序列決定和調(diào)節(jié)的。除了末端帶有IS序列的復(fù)合轉(zhuǎn)座子外，還存在一些沒有IS序列的，體積龐大的轉(zhuǎn)座子（5000BP以上）TNA家族。12請說說插入序列與復(fù)合型轉(zhuǎn)座子之間異同。請說說插入序列與復(fù)合型轉(zhuǎn)座子之間異同。答轉(zhuǎn)座子是存在于染色體DNA上的可自主復(fù)制和位移的基本單位。最簡單的轉(zhuǎn)座子不含有任何宿主基因而被稱為插入序列（IS），他們是細菌染色體或質(zhì)粒DNA的正常組成部分。她常常被定位到特定的基團中，造成基因突變。、復(fù)合式轉(zhuǎn)座子是一類帶有某些抗藥性基因的轉(zhuǎn)座子，其兩翼是相同的或高度同源的IS序列，且IS序列是不能單獨移動的只能作為復(fù)合體移動而且IS序列也決定和調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)座子的轉(zhuǎn)座能力。也是有沒有IS序列的轉(zhuǎn)座子TNA家族，其兩翼帶有38BP的倒置重復(fù)序列13組蛋白上都存在哪些修飾其作用是什么組蛋白上都存在哪些修飾其作用是什么P27答甲基化、乙?；?、磷酸化、泛素化及ADP核糖基化等。以甲基化（基因激活與沉默）、乙?；ㄞD(zhuǎn)錄激活，轉(zhuǎn)錄延伸，DNA修復(fù)拼接復(fù)制，染色體組裝，基因沉默，信號轉(zhuǎn)導(dǎo)）為主。影響染色體的結(jié)構(gòu)和功能、基因的表達和沉默。第三章第三章生物信息的傳遞（上）生物信息的傳遞（上）從DNA到RNA1，什么是編碼鏈什么是模版鏈，什么是編碼鏈什么是模版鏈答與MRNA序列相同的那條DNA鏈稱為編碼鏈（或有意義鏈）；另一條根據(jù)堿基互補原則指導(dǎo)MRNA合成DNA鏈稱為模版鏈（或反義鏈）。2，簡述，簡述RNARNA轉(zhuǎn)錄的概念及其基本過程。轉(zhuǎn)錄的概念及其基本過程。答RNA轉(zhuǎn)錄以DNA中的一條單鏈為模板，游離堿基為原料，在DNA依賴的RNA聚合酶催化下合成RNA鏈的過程。基本過程模版識別轉(zhuǎn)錄開始轉(zhuǎn)錄延伸轉(zhuǎn)錄終止。3，大腸桿菌的，大腸桿菌的RNARNA聚合酶有哪些組成成分各個亞基的作用如何聚合酶有哪些組成成分各個亞基的作用如何答大腸桿菌的RNA聚合酶由2個Α亞基、一個Β亞基、一個Β’亞基和一個Ω亞基組成的核心酶，加上一個Σ亞基后則成為聚合酶全酶。Α亞基肯能與核心酶的組裝及啟動子的識別有關(guān)，并參與RNA聚合酶和部分調(diào)節(jié)因子的相互作用；Β亞基和Β’亞基組成了聚合酶的催化中心，Β亞基能與模版DNA、新生RNA鏈及核苷酸底物相結(jié)合。4，什么是封閉復(fù)合物、開放復(fù)合物以及三元復(fù)合物，什么是封閉復(fù)合物、開放復(fù)合物以及三元復(fù)合物答模版的識別階段，聚合酶與啟動子可逆性結(jié)合形成封閉性復(fù)合物；封閉性復(fù)合物形成后，此時，DNA鏈仍然處于雙鏈狀態(tài)，伴隨著DNA構(gòu)象的重大變化，封閉性復(fù)合物轉(zhuǎn)化為開放復(fù)合物；開放復(fù)合物與最初的兩個NTP相結(jié)合并在這兩個核苷酸之間形成磷酸二脂鍵后即轉(zhuǎn)變成包括RNA聚合酶、DNA和新生RNA的三元復(fù)合物。5，簡述，簡述Σ因子的作用。因子的作用。答1，Σ因子的作用是負責(zé)模版鏈的選擇和轉(zhuǎn)錄的起始，它是酶的別構(gòu)效應(yīng)物，使酶專一性識別模版上的啟動子；2，Σ因子可以極大的提高RNA聚合酶對啟動子區(qū)DNA序列的親和力；3，Σ因子還能使RNA聚合酶與模版DNA上非特異性位點結(jié)合常數(shù)降低。6，什么是，什么是PRIBNOWPRIBNOWBOXBOX它的保守序列是什么它的保守序列是什么