簡(jiǎn)介：點(diǎn)擊查看更多玻璃化凍存對(duì)兔關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞存活率及生物學(xué)活性的影響.pdf精彩內(nèi)容。

簡(jiǎn)介：第四軍醫(yī)大學(xué)碩士學(xué)位論文人骨巨細(xì)胞瘤細(xì)胞系GCT0404的建立和生物學(xué)特性研究姓名張強(qiáng)申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別碩士專(zhuān)業(yè)外科學(xué)（骨外）指導(dǎo)教師范清宇20060501

簡(jiǎn)介：重慶醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文外源性HBMP2、3、6和12對(duì)骨肉瘤細(xì)胞的生物學(xué)作用研究姓名何煥玲申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別碩士專(zhuān)業(yè)腫瘤學(xué)指導(dǎo)教師周蘭20060501重慶醫(yī)科大學(xué)碩士研究生學(xué)位論文英文縮寫(xiě)英文全稱(chēng)ABCADBMPSADGFPALPAOAPAPCBMPRIABMPSBMPSCMSBSACDK2DDABDNADNTPEBECLEDTAEGFPERKFGFGFPGFPCMH符號(hào)說(shuō)明ANTIBIOTINBIOEPIDERMOXIDASERECOMBINATIONADENOVIRUSBONEMORPHOGENETICPROTEINSRECOMBINATIONADENOVIRUSGREENFLUCORESCENTPROTEINALKALINEPHOSPHATASEACRIDINEORANGEAMMONIUMPERSULPHATEANTIGENPRESENTINGCELLBONEMORPHOGENETICPROTEINRECEPTORTYPEIABONEMORPHOGENETICPROTEINSBONEMORPHOGENETICPROTEINSCONDITIONEDMEDIUMSBOVINESERUMALBUMINCYCLIN1EPENDENTKINASES一2DAYDIAMINOBENZIDINEDEOXYRIBONUCLEICACIDDEOXYRIBONUCLEOSIDETRIPHOSPHATEETHIDIUMBROMIDEEILLLANCEDCHEMILUMINESENCEETHYLENEDIAMINETETRAACETICACIDENHANCEDGREENFLUORESCENTPROTEINEXTRACELLULARSIGNALREGULATEDKINASEFIBROBLASTGROWTHFACTORGREENFLUCORESCENTPROTEINGREENFIUCORESCENTPROTEINCONDITIONEDMEDIUM中文全稱(chēng)卵白素一生物素一過(guò)氧化酶表達(dá)骨形成蛋白的重組腺病毒表達(dá)綠色熒光蛋白的重組腺病毒堿性磷酸酶吖啶橙過(guò)硫酸銨抗原提呈細(xì)胞骨形成蛋白受體IA骨形成蛋白骨形成蛋白條件培養(yǎng)液牛血清白蛋白周期素依賴(lài)性蛋白激酶2天二氨基聯(lián)苯胺脫氧核糖核酸脫氧核苷三磷酸溴化乙啶增強(qiáng)型化學(xué)發(fā)光乙二胺四乙酸增強(qiáng)型綠色熒光蛋白細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)性激酶成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子綠色熒光蛋白綠色熒光蛋白條件培養(yǎng)液

簡(jiǎn)介：第一部分納米細(xì)菌的培養(yǎng)、收獲與鑒定目的探討納米細(xì)菌的培養(yǎng)和收獲方法，檢測(cè)培養(yǎng)過(guò)程中物質(zhì)消耗情況和生長(zhǎng)速度變化，鑒定培養(yǎng)后的納米細(xì)菌。方法在納米細(xì)菌的培養(yǎng)過(guò)程中，尋找培養(yǎng)的適宜條件，防污染及收獲方法。用全自動(dòng)生化儀動(dòng)態(tài)檢測(cè)培養(yǎng)上清液中電解質(zhì)和葡萄糖的變化情況。使用酶標(biāo)儀動(dòng)態(tài)檢測(cè)納米細(xì)菌的吸光度值，間接了解其生長(zhǎng)速度。通過(guò)使用納米細(xì)菌單克隆抗體進(jìn)行免疫熒光試驗(yàn)鑒定培養(yǎng)的納米細(xì)菌和利用電鏡進(jìn)一步觀察其形狀。結(jié)果納米細(xì)菌適宜的培養(yǎng)條件是使用細(xì)胞培養(yǎng)方法，含10％FBS的完全培養(yǎng)基，加入納米細(xì)菌后，在培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，培養(yǎng)箱設(shè)置為37℃，5％C02和95％空氣培養(yǎng)。培養(yǎng)過(guò)程中采用一系列措施可有效地避免納米細(xì)菌污染。培養(yǎng)的納米細(xì)菌用細(xì)胞刮子刮離瓶底，吸入離心管中，4℃離心45分鐘，將細(xì)菌粉末20℃保存，可以較好地收獲納米細(xì)菌。培養(yǎng)過(guò)程中，上清液中的K、NA、CL、MG及葡萄糖的濃度無(wú)明顯變化P005，而CA、P進(jìn)行性減少，每周檢測(cè)結(jié)果比較差異有顯著性P005。結(jié)論納米細(xì)菌可以損傷內(nèi)皮細(xì)胞；短時(shí)間內(nèi)24小時(shí)被攻擊內(nèi)皮細(xì)胞的死亡方式是壞死而不是凋亡；高濃度的納米細(xì)菌會(huì)造成內(nèi)皮細(xì)胞更嚴(yán)重的損傷。

簡(jiǎn)介：樹(shù)突狀細(xì)胞（DENDRITICCELLS，DC），是體內(nèi)已知功能最強(qiáng)的專(zhuān)職抗原遞呈細(xì)胞（ANTIGENPRESENTINGCELLS，APC），是免疫應(yīng)答的中心環(huán)節(jié)，不僅能活化初始T細(xì)胞啟動(dòng)免疫應(yīng)答，還能誘導(dǎo)免疫耐受負(fù)向調(diào)節(jié)免疫，有雙重調(diào)節(jié)免疫反應(yīng)維持免疫平衡的作用。DC的最終免疫效應(yīng)取決于其發(fā)育階段及所處的免疫微環(huán)境。免疫微環(huán)境不僅為免疫應(yīng)答提供反應(yīng)場(chǎng)所，還通過(guò)調(diào)控免疫細(xì)胞的分化發(fā)育和功能來(lái)調(diào)節(jié)免疫應(yīng)答。肺臟通過(guò)氣道與外界相通，每天都要接觸大量外界抗原卻能維持免疫平衡，可見(jiàn)肺臟有精確的免疫調(diào)控機(jī)制，我們通過(guò)實(shí)驗(yàn)證實(shí)了肺臟基質(zhì)細(xì)胞微環(huán)境對(duì)免疫細(xì)胞DC的分化發(fā)育及功能有調(diào)節(jié)作用，這與維持免疫平衡有密切關(guān)系。目的觀察小鼠肺臟基質(zhì)細(xì)胞微環(huán)境對(duì)骨髓來(lái)源成熟樹(shù)突狀細(xì)胞分化發(fā)育及功能的影響，并探討其影響機(jī)制。方法通過(guò)小鼠肺臟組織原代培養(yǎng)建立一株成纖維樣基質(zhì)細(xì)胞系，并從細(xì)胞形態(tài)及波形蛋白表達(dá)上給予鑒定，認(rèn)為原代培養(yǎng)的肺臟基質(zhì)細(xì)胞具備成纖維樣細(xì)胞的特點(diǎn)。通過(guò)RTPCR方法檢測(cè)肺臟基質(zhì)細(xì)胞高分泌兩種抑制性細(xì)胞因子TGFΒ、VEGF。此基質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)上清與完全培養(yǎng)基以11的比例混合后用于培養(yǎng)成熟樹(shù)突狀細(xì)胞，一周后成熟樹(shù)突狀細(xì)胞被誘導(dǎo)成具有獨(dú)特生物學(xué)特性的調(diào)節(jié)性樹(shù)突狀細(xì)胞（DCREG）。HE染色后觀察細(xì)胞形態(tài)特征，特異性?shī)A心酶聯(lián)免疫法檢測(cè)培養(yǎng)上清細(xì)胞因子（IL10和IL12P70）的含量，流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞表型表達(dá)水平及吞噬能力，MTT法檢測(cè)DCREG誘導(dǎo)同種異體T增殖能力。將上述檢測(cè)結(jié)果與成熟樹(shù)突狀細(xì)胞進(jìn)行比較，觀察誘導(dǎo)前后樹(shù)突狀細(xì)胞的區(qū)別。結(jié)果調(diào)節(jié)性樹(shù)突狀細(xì)胞（DCREG）分泌的細(xì)胞因子IL10高于成熟樹(shù)突狀細(xì)胞組（P005）而其誘導(dǎo)同種異體T增殖能力明顯低于成熟DC組（MDC）。結(jié)論我們首次證實(shí)了肺臟基質(zhì)細(xì)胞微環(huán)境可誘導(dǎo)成熟樹(shù)突狀細(xì)胞分化發(fā)育為另一種生物學(xué)特性不同的DC亞群一調(diào)節(jié)性樹(shù)突狀細(xì)胞（DCREG），其有抑制同種異體T細(xì)胞增殖進(jìn)而誘導(dǎo)免疫耐受負(fù)向調(diào)節(jié)免疫的作用。明確了解肺臟的免疫調(diào)節(jié)機(jī)制對(duì)預(yù)防和治療呼吸系統(tǒng)的過(guò)敏性疾病有很大的幫助。

簡(jiǎn)介：南方醫(yī)科大學(xué)2010級(jí)碩士學(xué)位論文吉西他濱對(duì)CD34CD38一髓系白血病干細(xì)胞的生物學(xué)效應(yīng)BIOLOGICALEFFECTOFGEMCITABINEONCD34CD38。MYELOIDLEUKEMIASTEMCELLSLEREMTATEMCELLS課題來(lái)源國(guó)家自然科學(xué)基金30973454學(xué)位申請(qǐng)人導(dǎo)師姓名專(zhuān)業(yè)名稱(chēng)培養(yǎng)類(lèi)型培養(yǎng)層次所在學(xué)院韓慧娟郭坤元教授內(nèi)科血液病學(xué)專(zhuān)業(yè)型碩士第二臨床醫(yī)學(xué)院2013年3月30日廣州摘要胞表型的細(xì)胞株，可以應(yīng)用于對(duì)白血病干細(xì)胞的研究。具有CD34CD38一表型的KGLA細(xì)胞對(duì)化療藥物耐藥并抵抗自然殺傷細(xì)胞殺傷作用。因此，本研究擬以處于分化早期階段的急性髓系白血病KGLA細(xì)胞作為研究的靶細(xì)胞。吉西他濱GEMCITABINE，GEM結(jié)構(gòu)為27一脫氧一2’，27一鹽酸二氟胞苷B2異構(gòu)體，在結(jié)構(gòu)上與阿糖胞苷CYTARABINE，ARAC相似，系阿糖胞苷27一碳上的氫和羥基被雙氟取代，是一種新型嘧啶類(lèi)核苷酸抗代謝腫瘤藥物，并且還屬于細(xì)胞周期特異性抗癌藥。其主要作用于細(xì)胞S期，也可以阻止G。期細(xì)胞向S期的進(jìn)展，以此來(lái)影響細(xì)胞周期重分布，使周期敏感細(xì)胞成分增加?，F(xiàn)已證實(shí)該藥目前廣泛應(yīng)用于非小細(xì)胞肺癌、胰腺癌和乳腺癌等實(shí)體瘤治療。GEM在惡性血液系統(tǒng)疾病方面的應(yīng)用，國(guó)外開(kāi)展了GEM治療難治性淋巴瘤及多發(fā)性骨髓瘤的臨床試驗(yàn)，均取得較好的療效。而應(yīng)用于白血病的治療僅限于基礎(chǔ)研究階段。目前生物免疫治療是繼手術(shù)、化療、放療之后的一種新型治療方法。免疫治療具有抗原識(shí)別的靶向性和時(shí)空效應(yīng)性，是以白血病干細(xì)胞為靶的治療的根據(jù)。固有免疫效應(yīng)細(xì)胞治療屬于生物治療的一種，其作用機(jī)制與化學(xué)治療不同，不存在耐藥性問(wèn)題。自然殺傷NATURALKILL，NK細(xì)胞是固有免疫的主要效應(yīng)細(xì)胞，具有免疫監(jiān)視作用，可以清除HLA缺失的腫瘤細(xì)胞，決定腫瘤細(xì)胞被免疫效應(yīng)細(xì)胞殺傷敏感性主要來(lái)自HLAKIR的錯(cuò)配程度和活化性配體NKG2DMICA、MICB、ULBPL、ULBP2、ULBP3的表達(dá)水平。靜息狀態(tài)NK細(xì)胞受到腫瘤細(xì)胞表面NKG2D配體激活，具有殺傷功能，在體外激活后可直接輸注應(yīng)用。通常白血病干細(xì)胞處于靜息狀態(tài)，內(nèi)外源凋亡系統(tǒng)處于關(guān)閉狀態(tài)，表面免疫激活分子低表達(dá)。研究顯示，多酚類(lèi)植物單體能分別激活白血病、淋巴瘤腫瘤干細(xì)胞表達(dá)MICA／B或ULBP分子，激活NK細(xì)胞；可調(diào)節(jié)CSC外源性凋亡受體DR、DCR、CASAPSE一8的表達(dá)，使其成為殺傷敏感細(xì)胞。不同的細(xì)胞因子可以促進(jìn)NK細(xì)胞增殖，而GEM是否能調(diào)節(jié)具有白血病干細(xì)胞特性的CD34CD38一早期急性髓系白血病KGLA細(xì)胞被機(jī)體免疫細(xì)胞對(duì)其的殺傷敏感性呢將是本實(shí)驗(yàn)研究的重點(diǎn)。因此，本實(shí)驗(yàn)以具有白血病干細(xì)胞特性的CD34CD38一早期急性髓系白血病TT

簡(jiǎn)介：研究生個(gè)人簡(jiǎn)介姓名陳洪福性別男年齡28歲學(xué)習(xí)及工作經(jīng)歷時(shí)間單位及職務(wù)201007畢業(yè)于濰坊醫(yī)學(xué)院臨床醫(yī)學(xué)專(zhuān)業(yè)，獲醫(yī)學(xué)學(xué)士學(xué)位201009考入徐州醫(yī)學(xué)院攻讀神經(jīng)外科碩士學(xué)位研究生期間臨床、科研成果及獲獎(jiǎng)情況時(shí)間項(xiàng)目2011年臨床培訓(xùn)12個(gè)月2012年通過(guò)國(guó)家執(zhí)業(yè)醫(yī)師資格考試，通過(guò)CET62013年研究生期間修滿32學(xué)分，核心期刊發(fā)表文章一篇徐州醫(yī)學(xué)院碩士學(xué)位論文縮略詞ACR陋BCPBISBSACCK8DDH20DMEMDMSOFBS剛NBTNCODOEPAGEPBSPMSFRPMISDSSIIINAACRYLAMIDE縮略詞表英文全稱(chēng)ALKALINEPHOSPHATASE5BROMODCHLORO3INDOLYLPHOSPHATEBISACRYLAMIDEBOVINESEIUMALBUMINCELLCOUNTINGKIT8DOUBLEDISTILLEDWATERDULBECCO’SMODIFIEDEAGLEMEDIADIMETHYLSULFOXIDEFETALBOVINESERULNFIBRONEETINNITROBLUETETRAZOLIUMNITROCELLULOSEOPTICALDENSITYOVEREXPRESSIONPOLYACRYLAMIDEGELELECTROPHORESISPHOSPHATEBUFFEREDSALINEPHENYLMETHYLSULFONYLFLUORIDEGOSWELLPARKMEMORIALINSTITUTESODIUMDODCCYLSULFATESMALLINTERFERINGRNA中文全稱(chēng)丙烯酰胺單體堿性磷酸酶5溴_4氯3吲哚磷酸丙烯酰胺雙體牛血清白蛋白細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒雙蒸水DULBECCO改良培養(yǎng)基二甲基亞砜胎牛血清纖維連接蛋白氮蘭四唑硝酸纖維素光密度過(guò)表達(dá)聚丙烯酰胺凝膠電泳磷酸鹽緩沖液苯甲基磺酰氟洛斯維公園紀(jì)念研究所十二烷基磺酸鈉小干擾RNA

簡(jiǎn)介：南昌大學(xué)醫(yī)學(xué)院碩士學(xué)位論文SIRNA沉默P62基因?qū)θ烁伟┘?xì)胞HEP3B的生物學(xué)影響姓名羅小洋申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別碩士專(zhuān)業(yè)內(nèi)科學(xué)指導(dǎo)教師張吉翔20100501ABSTRACTABSTRACTOBJECTIVETOINVESTIGATETHEBIOLOGICALEFFECTSONHEPATOMACELLHEP3BOFP62BYUSEOFP62SIRNAMETHODSTHESIRNASWERETRANSFECTEDINTOHEPATOMACELLHEP3BWITHLIPOFECTAMINE2000FIRST，THEBESTSIRNASEQUENCEWHICHSILENTP62WASSELECTEDFROMTHREESIRNASEQUENCESSPECIFICALLYTARGETINGP62NAMEDASSIHGTF2H1001，SIHGTF2H1002ANDSIHGTF2H1_003THEN，THEEXPREMENTWERECLASSIFIEDFOURGROUPS1BLANKCONTROLGROUP2SIRNAGROUP3NCONTROLNCGROUP4LIPOFECTAMINELIPGROUPTHEEXPRESSIONOFP62，XPD，P53，CYCLINDLWEREDETECTEDBYRTPCRANDWESTERNBLOTTHECELLCYCLEWEREEXAMINEDBYMTTRESULTSTHEBESTSIRNASEQUENCEWHICHSILENTP62WASSIHGTF2H1002CONTRASTWITHBLANKCONTROLGROUP，NCGROUPANDLIPGROUP，THEEXPRESSIONOFP62MRNAWASDECREASEDSIGNIFICANTLYINSIRNAGROUPPO01；THEEXPRESSIONOFXPDMRNAANDP53MRNAWEREDECREASEDOBVIOUSLY；BUTTHEEXPRESSIONOFCYCLIND1MRNAWASENHANCEDOBVIOUSLYTHETRENDSOFPROTEINWASCONSISTENTWITHMRNAMTTRESULTSSHOWEDTHATCELLPROLIFERATIONINCREASEDINSIRNAGROUPCONCLUSIONP62GENEMAYINITERACTWITHXPD，P53ANDCYCLIND1TOINHIBITCANCERCELL，ANDPOSSIBLYREGULATECELLPROLIFERATIONTHROUGHDNADAMAGECHECKPOINTKEYWORDSHEPATOMACELL；SMALLINTERFERENCERNAS；GENE；P62；TRANSFECTION；CELLCYCLE

簡(jiǎn)介：Y．T79295主學(xué)校代碼10610學(xué)號(hào)B0207T7四川大學(xué)口腔醫(yī)學(xué)博士專(zhuān)業(yè)學(xué)位論文磁勝附著體模擬靜磁場(chǎng)對(duì)人牙齦成纖維細(xì)胞題目和人牙周膜成纖維細(xì)胞的生物學(xué)效應(yīng)研究作者楊凌專(zhuān)業(yè)口腔臨床醫(yī)學(xué)指導(dǎo)教師姓名巢永烈教授二OO五年四月二}J日四川大學(xué)華西口腔醫(yī)學(xué)院博士專(zhuān)業(yè)學(xué)位論文縮略詞HGFHPDLFALPDMS0FCMPIMMCNMPALMFAEBSODMDA英文縮略詞表英文全稱(chēng)HUMANGINGIVALFIBMBLASTHUMANPERIODONTALLIGAMENTFIBROBLASTALKALINEPHOSPHATASE3水，5DIMETHYLTHIAZOL一2一Y1一2，5DIPHENYLTETRAZOLIUMBROMIDEDIMETHYLSULFOXIDEFLOWCYTOMETRYPROLIFERATIONINDEXMITOMYCINNORMALMELTINGPOINTAGAROSELOWMELTINGPOINTAGAROSE蹦DIUMBROMIDESUPEROXIDEDISMUTASEMALEIEDIALDEHYDE中文名稱(chēng)人牙齦成纖維細(xì)胞人牙周膜成纖維細(xì)胞堿性磷酸酶34，5一二甲基噻唑一2一2，5一二苯基四氮唑嗅鹽商品名噻唑監(jiān)二甲亞砜流式細(xì)胞術(shù)增殖指數(shù)絲裂霉素常熔點(diǎn)瓊脂糖低熔點(diǎn)瓊脂糖溴化乙啶超氧化物歧化酶丙二醛

簡(jiǎn)介：目的1、分離、培養(yǎng)小鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞MMSCS，確保其良好的增殖能力和多向分化潛能，研究其生物學(xué)特征，并對(duì)相關(guān)生物學(xué)特性進(jìn)行初步研究，為其后應(yīng)用于動(dòng)物模型做準(zhǔn)備。2、制備RAAV1EGFP載體。觀察其感染染小鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞MMSCS及對(duì)MMSCS生物學(xué)特性的影響，并證實(shí)該病毒載體可高效轉(zhuǎn)染MMSCS并獲得高效穩(wěn)定的體外表達(dá)，以符合體內(nèi)實(shí)驗(yàn)要求方法1、沖洗小鼠長(zhǎng)骨后，I型膠原酶消化長(zhǎng)骨碎片，PBS洗凈骨片后完全培養(yǎng)基接種骨片。靜置3天，換液去除骨碎片及未貼壁細(xì)胞。后每3天換液。細(xì)胞融合度達(dá)70％80胰酶消化，按4103CM2密度接種培養(yǎng)。觀察MMSCS生長(zhǎng)特點(diǎn)、表面特異性標(biāo)記、多向分化潛能的變化情況。2、采用PEI轉(zhuǎn)染法將三質(zhì)粒PTREGFP，PXR1，PXX680共轉(zhuǎn)染293T細(xì)胞，包裝RAAV1EGFP，通過(guò)氯化銫密度梯度離心純化獲得RAAV1EGFP通過(guò)實(shí)時(shí)定量PCR檢測(cè)病毒滴度。3、采用不同滴度RAAV1EGFP感染MSCS，需找合適的感染復(fù)數(shù)。觀察轉(zhuǎn)染后MMSCS生長(zhǎng)特點(diǎn)、表面特異性標(biāo)記、多向分化潛能的變化情況。觀察RAAV1EGFP轉(zhuǎn)染對(duì)于MMSCS生物學(xué)特性的影響。結(jié)果1、收集小鼠骨片培養(yǎng)，經(jīng)傳代培養(yǎng)3代以上后細(xì)胞呈現(xiàn)為均質(zhì)性較好的短梭形細(xì)胞。細(xì)胞匯合80?時(shí)G0G1期細(xì)胞百分率8377。P3P6代細(xì)胞表面抗原高表達(dá)CD29、CD44、SCA1，低表達(dá)CD45、CD31、CD34P4代細(xì)胞經(jīng)體外定向誘導(dǎo)培養(yǎng)，可分化為成骨及脂肪細(xì)胞，證實(shí)所培養(yǎng)細(xì)胞具備多向分化潛能。2、通過(guò)實(shí)時(shí)定量PCR檢測(cè)，獲得高純度的滴度為141011VGML的RAAV1EGFP。3、RAAV1EGFP感染MMSCS最合適MOI值為105。流式細(xì)胞儀檢測(cè)RAAV1EGFP感染MMSCS48HGFP的表達(dá)率為975±05。RAAV1EGFP感染MMSCS后，MMSCS可正常貼壁，生長(zhǎng)迅速，形態(tài)上無(wú)明顯改變，其細(xì)胞表面特異性標(biāo)記及多向分化潛能未受明顯影響。結(jié)論1、通過(guò)骨片法成功分離、培養(yǎng)了正常C57BL6小鼠的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞，生物學(xué)特性穩(wěn)定，可用于進(jìn)行動(dòng)物實(shí)驗(yàn)。2、成功構(gòu)建了重組腺相關(guān)病毒載體，并證實(shí)對(duì)其對(duì)MMSCS具有較高的轉(zhuǎn)染效率并獲得高效穩(wěn)定的體外表達(dá)，RAAV1轉(zhuǎn)染未明顯影響MMSCS的生物學(xué)特性。

簡(jiǎn)介：四川大學(xué)碩士學(xué)位論文口腔癌相關(guān)成纖維細(xì)胞的分離培養(yǎng)及其生物學(xué)特性研究姓名劉英申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別碩士專(zhuān)業(yè)口腔臨床醫(yī)學(xué)指導(dǎo)教師周紅梅20030506口巍掌項(xiàng)慚專(zhuān)AT麟T論炎THESTUDIESONSEPARATIONANDCULTUREANDBIOLOGICCL|囂|建E￡ERISTIESOFTHEORALCARCINOMA。ASSOCIATEDFIBROBLASTSPOSTGRADUATELIUYINGTUTORASSOCIATEPROFZHOUHONGMEIABSTRACTBAEKGROUNDTHEMECHANISMSOFTHEOCCURRENCEANDEVOLUTIONOFSQUAMOUSCARCINOMAHAVEN’TBEENCLARIFIEDYETINTHEPAST，MANYSTUDIESONLYFOCUSEDONTHECHANGESOFEPITHELIUMORMESENCHYMEBUTNEGLECTINGTHEIMPORTANTINTERACTIONSBETWEENTHEEPITHELIUMANDMESENCHYMETHISSUBJECTINTENDEDTOAPPLYTHERTEWTHEORYOFMICROECOLOGYOFTHETUMORHOSTINTERFACETOTHEFIELDOFTHEORALMUCOSACARCINOGENESIS，THEMAJORADJUSTMENTFACTORASCARCINOMAASSOCIATEDFIBROBLASTSCAFSWASSELECTEDASTHERESEARCHTOPIC。HOWEVERRTORELATEDPAPERSABOUTORALCAFSWEREREPORTEDPURPOSE①TOSEPARATEANDCULTUREANDV蘸FYTHEORALCAFSPRELIMINARY②TOSTUDYTHEMAINBIOLOGICCHARACTERISTICSOFTHEORALCAFSMETHODSTHEPRIMARYCAFSANDNFSWEREOBTAINEDBYTISSUECULTURE，CELLSWEREPASSAGEDBYO。25％TRYPSINANDPURIFIEDBYCURAGEMETHODANDTRYPSINIZATION；蟄TOVERIFYTHECELLSPRELIMINARILYACCORDINGTOTHECHANGESOFMORPHOLOGYANDTHEEXPRESSIONOFTHECERTAINPROTEINS；③TOCOMPARETHECAFSWITHNFSOFTHEIRBIOLOGICCHARACTERISTICS，SUCHASPROLIFERATIONANDMOTILITYANDKARYOTYPEETCRESULTSTHEORALCAFSWERESUCCESSFULLYSEPARATEDANDCULTUREDANDVERIFIEDPRELIMINARILY；②COMPARETOTHENORMALFIBROLASTSFROMORALMUCOS如THEPROLIFERATIONANDMOTILITYOFTHEORALCAFSINCREASEDSIGNIFICANTLYHOWEVERTHEBASICCHARACTERISTIESOFTHENOLTNALCELLSWEREKEPTINTHEORAL2

簡(jiǎn)介：軍醫(yī)進(jìn)修學(xué)院解放軍總醫(yī)院博士學(xué)位論文慢病毒介導(dǎo)的RNAI沉默HOXB13基因?qū)η傲邢侔㎜NCAP細(xì)胞生物學(xué)行為影響的研究姓名李巖密申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別博士專(zhuān)業(yè)影像醫(yī)學(xué)與核醫(yī)學(xué)指導(dǎo)教師唐杰羅渝昆20090531軍醫(yī)進(jìn)修學(xué)院博學(xué)位論文3．經(jīng)直腸超聲引導(dǎo)下穿刺活檢，收集前列腺癌組織及癌旁組織，提取RNA，逆轉(zhuǎn)錄為CDNA后，實(shí)時(shí)定量PCR法檢測(cè)前列腺癌及癌旁組織中HOXBL3基因的表達(dá)；分析HOXBL3基因與患者的生存PSA表達(dá)的相關(guān)性。結(jié)果1．根據(jù)人HOXBL3基因序列，選擇4個(gè)靶點(diǎn)，設(shè)計(jì)合成了4條寡核苷酸模板，成功構(gòu)建了4條HOXBL3SHRNA慢病毒載體質(zhì)粒，經(jīng)測(cè)序鑒定插入片段序列與預(yù)期序列一致。293FT細(xì)胞包裝構(gòu)建成功重組質(zhì)粒載體，生產(chǎn)出慢病毒顆粒，并進(jìn)行濃縮。2．將HOXB3SHRNA轉(zhuǎn)染前列腺癌細(xì)胞株LNCAP，發(fā)現(xiàn)LNCAP蛋白質(zhì)表達(dá)顯著降低，表明采用的干擾片段有效。HOXBL3沉默使前列腺LNCAP細(xì)胞的生長(zhǎng)加快和遷移細(xì)胞數(shù)目增加。3．HOXBL3基因在前列腺癌及癌旁組織中均有表達(dá)，癌組織CT值高于癌旁組織。結(jié)論成功構(gòu)建了4條HOXBL3特異性SIRNA慢病毒表達(dá)載體。利用構(gòu)建的重組慢病毒表達(dá)載體產(chǎn)生的慢病毒成功感染了前列腺癌細(xì)胞株LNCAP，HOXBL3沉默使前列腺LNCAP細(xì)胞的加快和遷移細(xì)胞數(shù)目增加。HOXBL3基因在前列腺癌及癌旁組織中的表達(dá)有差異。檢關(guān)鍵詞前列腺癌；HOXBL3基因；RNAI；慢病毒載體；經(jīng)直腸超聲前列腺穿刺活4

簡(jiǎn)介：”LF夕後翌大學(xué)博士學(xué)位論文色素上皮衍生因子對(duì)黑素細(xì)胞生物學(xué)活性的影響EFFECTOFPIGMENTEPITHELIUMDERIVEDFACTOR0NHUMANMELANOCYTES院系專(zhuān)業(yè)姓名指導(dǎo)教師導(dǎo)師組成員華山醫(yī)院皮膚病與性病學(xué)張成鋒鄭志忠教授項(xiàng)蕾紅教授祝祿川技師二零零八年五月英文縮略語(yǔ)英文縮略語(yǔ)英文縮略語(yǔ)英文全稱(chēng)ABEAVIDINBIOTINPEROXIDASECOMPLEXAGEBFGFBPBSADABDHANKSDMSOEDTAFCSGAPDHHGFHRPILIBMXMB廿MLVLMMMMPMRNAMRRNTODPBSPDGFPEDFPIGFADVANCEDGLYCATIONENDPRODUCTSBASICFIBROBLASTICGROWTHFACTORBASEPAIRBOVINESERUMALBUMINDIAMINOBENZIDINECA2／MG_FREEHANK’SBALANCEDSALTHANKSSOLUTIONDIMETHYLSULFOXIDEETHYLENEDIAMINETETRAACETICACIDFETALCALFSERUMGLYCERALDEHYDES3PHOSPHATEDEHYDROGENASEHEPATOCYTEGROWTHFACTORHORSE戌IDISHPEROXIDASEINTERLEUKIN3ISOBUTYL1一METHYXANTHINGEMITOGENACTIVATEDPROTEINMILLIMOLPERLITERMALIGNANTMELANOMAMATRIXMETALLOPROTEINASCSMESSENGERRIBONUCLEICACIDMETHYLTHIAZOLETRAZOLIUMNUCLEOTIDEOPTICALDENSITYPHOSPHATEBUFFERSALINEPLATELETDERIVEDGROWTHFACTORPIGMENTEPITHELIUMDERIVEDFACTORPLACENTAGROWTHFACTOR中文譯名抗生物素生物素過(guò)氧化酶復(fù)合物糖化反應(yīng)終產(chǎn)物堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子堿基對(duì)牛血清白蛋白二氨基聯(lián)苯胺無(wú)鈣、鎂的平衡鹽溶液二甲基亞砜乙二胺四乙酸胎牛血清甘油醛3磷酸去氫酶肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子辣根過(guò)氧化物酶白細(xì)胞介素異丁甲基黃嘌呤促分裂原活化蛋白毫摩爾每升惡性黑素瘤金屬蛋白酶信使核糖核酸四甲基偶氮唑藍(lán)核苷酸光密度磷酸緩沖鹽溶液血小板源性生長(zhǎng)因子色素上皮衍生因子胎盤(pán)生長(zhǎng)因子

簡(jiǎn)介：本文主要從以下幾個(gè)部分展開(kāi)論述第一部分基質(zhì)金屬蛋白酶酶解控釋血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子聚乙二醇水凝膠制備與鑒定第一節(jié)四枝化狀丙烯?；垡叶嫉暮铣膳c鑒定目的運(yùn)用接枝聚合方法制備四枝化狀丙烯酰化聚乙二醇4BRANCHEDPEGDA并鑒定其化學(xué)結(jié)構(gòu)及屬性是否符合實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)要求。方法以分子量20000DA線性聚乙二醇PEG單體為原料通過(guò)四步合成方法在單體末端引入四個(gè)丙烯?；p鍵官能團(tuán)。經(jīng)紅外光譜、1H核磁波譜、高效液相色譜、基質(zhì)輔助激光解吸電離及凝膠過(guò)濾色譜檢測(cè)聚合物產(chǎn)品在分子結(jié)構(gòu)、目標(biāo)官能團(tuán)置換度、終產(chǎn)物產(chǎn)率、分子量及產(chǎn)物純度方面是否符合實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)、滿足后續(xù)實(shí)驗(yàn)要求。結(jié)果自制4BRANCHEDPEGDA產(chǎn)物經(jīng)紅外光譜、1H核磁共振檢測(cè)證實(shí)分子結(jié)構(gòu)與設(shè)計(jì)相符、末端雙鍵官能團(tuán)置換度963％高效液相色譜檢測(cè)顯示產(chǎn)物純度為984％基質(zhì)輔助激光解吸電離檢測(cè)提示產(chǎn)物實(shí)際平均分子量與設(shè)計(jì)結(jié)構(gòu)分子量相符凝膠過(guò)濾色譜檢測(cè)結(jié)果顯示產(chǎn)物多分散性數(shù)值為102產(chǎn)物分子量均一純度較高。結(jié)論通過(guò)接枝聚合方法制備4BRANCHEDPEGDA在分子結(jié)構(gòu)、目標(biāo)官能團(tuán)置換度、終產(chǎn)物產(chǎn)率、分子量及產(chǎn)物純度方面均符合實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)、滿足后續(xù)實(shí)驗(yàn)要求。第二節(jié)基質(zhì)金屬蛋白酶酶解控釋血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子聚乙二醇水凝膠制備及釋藥性能研究目的制備基質(zhì)金屬蛋白酶酶解控釋血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子聚乙二醇水凝膠VEGFMMP多肽PEGGEL觀察其形貌結(jié)構(gòu)并研究酶解控釋效應(yīng)為后續(xù)實(shí)驗(yàn)奠定基礎(chǔ)。方法運(yùn)用9芴甲氧羰基FMOC多肽固相法合成含有巰基SH的基質(zhì)金屬蛋白酶MATRIXMETALLOPROTEINASEMMP底物多肽。利用4BRANCHEDPEGDA與血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子165VULARENDOTHELIALGROWTHFACT165VEGF165共價(jià)結(jié)合后根據(jù)MICHAEL加成反應(yīng)原理與含有巰基的MMP底物多肽結(jié)合生成VEGF載藥聚乙二醇水凝膠VEGFMMP多肽PEGGEL。通過(guò)大體形態(tài)及掃描電鏡觀察VEGFMMP多肽PEGGEL形貌及微觀結(jié)構(gòu)。運(yùn)用酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定ENZYMELINKEDIMMUNOSBENTASSAYELISA研究基質(zhì)金屬蛋白酶2MMP2與VEGFMMP多肽PEGGEL之間酶解釋藥的關(guān)系。結(jié)果室溫下VEGFMMP多肽PEGGEL大體形態(tài)為透明果凍狀。經(jīng)掃描電鏡觀察水凝膠表面微觀形態(tài)呈網(wǎng)狀。其中對(duì)MMP敏感的VEGFMMP多肽PEGGELVEGFMMPWXPEGGEL表面孔隙平均直徑為0251±0101UM孔隙率為101±121％。ELISA檢測(cè)結(jié)果顯示VEGFMMP多肽PEGGEL對(duì)VEGF165包封率為8433±118％。凝膠形態(tài)崩解時(shí)相及ELISA檢測(cè)結(jié)果顯示在不同濃度MMP2作用下VEGFMMPWXPEGGEL具有穩(wěn)定的VEGF釋放速率。結(jié)論通過(guò)MICHAEL加成反應(yīng)制備的VEGFMMPWXPEGGEL與MMP2具有穩(wěn)定的控釋關(guān)系滿足后續(xù)實(shí)驗(yàn)要求。第二部分VEGF控釋水凝膠去細(xì)胞瓣復(fù)合支架制備及體外生物相容性研究第一節(jié)VEGF控釋水凝膠去細(xì)胞瓣復(fù)合支架的制備與鑒定目的制備VEGF控釋水凝膠去細(xì)胞瓣復(fù)合支架并通過(guò)形態(tài)學(xué)觀察和免疫熒光染色鑒定是否成功構(gòu)建復(fù)合支架。方法運(yùn)用生物素SULFONHSSSBIOTIN修飾去細(xì)胞瓣支架行免疫熒光染色鑒定。根據(jù)親和素生物素結(jié)合原理將含有生物素的VEGF控釋水凝膠VEGFBIOMMPWXPEGGEL與去細(xì)胞瓣支架復(fù)合行HE染色和掃描電鏡觀察。結(jié)果結(jié)合生物素的去細(xì)胞瓣支架經(jīng)攜帶CY3熒光親和素染色熒光顯微鏡顯示瓣膜基質(zhì)呈紅色。形態(tài)學(xué)觀察顯示水凝膠去細(xì)胞瓣復(fù)合支架具有去細(xì)胞瓣三層基質(zhì)結(jié)構(gòu)和凝膠規(guī)則網(wǎng)狀孔隙微觀結(jié)構(gòu)。結(jié)論按實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)成功制備VEGF控釋水凝膠去細(xì)胞瓣復(fù)合支架。第二節(jié)VEGF控釋水凝膠去細(xì)胞瓣復(fù)合支架體外生物相容性研究目的參照GBT1688國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)體外研究VEGF控釋水凝膠去細(xì)胞瓣復(fù)合支架生物相容性。方法參照GBT1688國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)對(duì)復(fù)合支架進(jìn)行血液相互作用實(shí)驗(yàn)研究其對(duì)血小板激活、凝血時(shí)間、溶血的影響對(duì)復(fù)合支架及其浸提液進(jìn)行細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)研究其對(duì)細(xì)胞增殖與凋亡的影響。結(jié)果經(jīng)掃描電鏡流式細(xì)胞儀檢測(cè)證實(shí)復(fù)合支架可減少去細(xì)胞瓣對(duì)血小板的粘附與激活經(jīng)PTAPTTINR檢測(cè)證實(shí)復(fù)合支架對(duì)凝血時(shí)間無(wú)明顯影響經(jīng)間接、直接溶血實(shí)驗(yàn)證實(shí)復(fù)合支架溶血率低于GBT16886國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)經(jīng)細(xì)胞增殖、凋亡檢測(cè)證實(shí)復(fù)合支架及其浸提液對(duì)MRC5人胚肺細(xì)胞無(wú)明顯影響。結(jié)論參照GBT1688國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)VEGF控釋水凝膠去細(xì)胞瓣復(fù)合支架具有良好的生物相容性。第三部分智能水凝膠去細(xì)胞瓣復(fù)合支架制備及體內(nèi)生物學(xué)性能研究第一節(jié)智能水凝膠去細(xì)胞瓣復(fù)合支架的制備與鑒定目的制備抗CD34抗體VEGF控釋水凝膠去細(xì)胞瓣復(fù)合支架智能水凝膠去細(xì)胞瓣復(fù)合支架并通過(guò)免疫熒光染色鑒定是否成功構(gòu)建復(fù)合支架方法運(yùn)用生物素SULFONHSSSBIOTIN修飾去細(xì)胞瓣支架。根據(jù)親和素生物素結(jié)合原理將VEGFBIOMMPWXPEGGEL與去細(xì)胞瓣支架復(fù)合。同樣原理將經(jīng)生物素化抗CD34抗體與水凝膠去細(xì)胞瓣支架復(fù)合行免疫熒光染色鑒定。結(jié)果結(jié)合抗CD34抗體水凝膠去細(xì)胞瓣復(fù)合支架經(jīng)FITC標(biāo)記抗IGG抗體染色熒光顯微鏡顯示瓣膜基質(zhì)呈綠色。結(jié)論按實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)成功制備智能水凝膠去細(xì)胞瓣復(fù)合支架。第二節(jié)智能水凝膠去細(xì)胞瓣復(fù)合支架體內(nèi)生物學(xué)性能研究目的建立兔頸動(dòng)脈瓣膜管道移植模型評(píng)估智能水凝膠去細(xì)胞瓣復(fù)合支架體內(nèi)生物學(xué)性能方法運(yùn)用改良兔頸動(dòng)脈“CUFF”套管技術(shù)建立兔頸動(dòng)脈瓣膜管道移植模型。分別于術(shù)后24小時(shí)和7天通過(guò)多普勒彩色超聲檢測(cè)管道通暢與否判斷動(dòng)物模型建立是否成功。術(shù)后24小時(shí)取出移植物根據(jù)組織形態(tài)學(xué)檢測(cè)評(píng)估移植管道對(duì)CD34細(xì)胞的粘附能力。術(shù)后7天取出移植物根據(jù)組織形態(tài)學(xué)檢測(cè)及ENOSMRNA定量分析評(píng)估移植管道內(nèi)皮化程度。結(jié)果超聲結(jié)果顯示移植管道通暢兔頸動(dòng)脈瓣膜管道移植模型建立成功。術(shù)后24小時(shí)相應(yīng)檢測(cè)結(jié)果顯示本實(shí)驗(yàn)制備復(fù)合支架對(duì)CD34細(xì)胞有明顯的粘附能力。術(shù)后7天相應(yīng)檢測(cè)結(jié)果顯示本實(shí)驗(yàn)制備復(fù)合支架內(nèi)皮化程度優(yōu)于對(duì)照組支架。結(jié)論智能水凝膠去細(xì)胞瓣復(fù)合支架具有優(yōu)良的生物學(xué)性能。

簡(jiǎn)介：授予單位代碼學(xué)號(hào)或申請(qǐng)?zhí)?045905220101級(jí)公開(kāi)文學(xué)論大位州學(xué)鄭士博論文題目作者姓名沉默核干細(xì)胞因子對(duì)食管癌細(xì)胞生物學(xué)特性的影響張功員學(xué)科門(mén)類(lèi)專(zhuān)業(yè)名稱(chēng)導(dǎo)師姓名、職稱(chēng)醫(yī)學(xué)病理學(xué)與病理生理學(xué)張欽憲教授2008年12月鄭州大學(xué)2008屆博士學(xué)位論文中文摘要沉默核干細(xì)胞因子對(duì)食管癌細(xì)胞生物學(xué)特性的影響博士研究生張功員導(dǎo)師張欽憲教授鄭州大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院鄭州450052摘要中國(guó)是世界上食管癌發(fā)病率和病死率最高的國(guó)家，每年全世界新診斷的30萬(wàn)食管癌患者中121672萬(wàn)以上發(fā)生在中國(guó)。食管癌的浸潤(rùn)轉(zhuǎn)移是引起食管癌患者死亡的主要原因，因此對(duì)食管癌發(fā)生發(fā)展、浸潤(rùn)轉(zhuǎn)移機(jī)制的探討已成為研究的熱點(diǎn)之一。腫瘤的發(fā)生發(fā)展是多因素、多步驟、多階段和多基因改變的過(guò)程，癌基因和抑癌基因是受累最多的兩大類(lèi)型，各種關(guān)鍵基因的改變是人類(lèi)腫瘤形成和發(fā)展的基礎(chǔ)。近年來(lái)發(fā)現(xiàn)核干細(xì)胞因子NUCLEOSTERNIN，NS基因是一種新的P53結(jié)合蛋白，參與干細(xì)胞和腫瘤細(xì)胞的增殖調(diào)控，能維持細(xì)胞的擴(kuò)增并抑制其向成熟細(xì)胞分化。先后發(fā)現(xiàn)胃癌、腎癌、乳癌、膀膚癌等腫瘤組織中NS基因表達(dá)量與腫瘤的侵襲力呈正相關(guān)，NS可能是在細(xì)胞周期的S期末和GZ期通過(guò)已知的腫瘤抑制基因P53發(fā)揮作用來(lái)調(diào)節(jié)干細(xì)胞和癌細(xì)胞的增殖狀態(tài)，NS可能是干細(xì)胞和腫瘤細(xì)胞穿越GZ從關(guān)鍵點(diǎn)的特異性調(diào)控因子。表皮生長(zhǎng)因子EP記ALGROWTHFACT，EGF是近年來(lái)發(fā)現(xiàn)的在細(xì)胞增殖和分化中起重要作用的因子，可促進(jìn)正常細(xì)胞的惡性轉(zhuǎn)化及刺激腫瘤細(xì)胞的增殖。還與腫瘤浸潤(rùn)轉(zhuǎn)移密切相關(guān)。研究表明EGF是通過(guò)細(xì)胞表面的表皮生長(zhǎng)因子受體EPIDALGROWTHFACTREC叩T，EGFR發(fā)揮其生物學(xué)效應(yīng)。在許多腫瘤組織中均發(fā)現(xiàn)EGF及其受體EGFR的過(guò)表達(dá)且二者具有相關(guān)性。RNA干擾RNAI是多種生物體內(nèi)由雙鏈RNA介導(dǎo)同源MRNA降解的現(xiàn)象。在細(xì)胞中，長(zhǎng)的DSRNA被類(lèi)似RNASEIH的DICER酶切割成21一26核普酸的小干擾RNASIRNA。RNAI基因阻斷的有效性和特異性使其可能成為疾病基因療法的理想工具。作者擬聯(lián)合檢測(cè)食管癌組織中NS、EGF、EGFR的表達(dá)，構(gòu)建針對(duì)NS基因的SIRNA真核表達(dá)載體，轉(zhuǎn)染食管癌EC9706細(xì)胞株，觀察EC9706細(xì)胞生物學(xué)特性的變化及NS基因沉默對(duì)裸鼠移植瘤生長(zhǎng)的影響。全文共分3部分，摘要分述如下。