簡介：當(dāng)你走在放學(xué)回家的路上，突然間狂風(fēng)大作，電閃雷鳴，這時你會急忙尋找避雨地點，并迅速跑過去。請問你是靠什么器官和系統(tǒng)感知天氣突然變化的,,你怎么判斷出要下雨呢,,,,,烏云,狂風(fēng),閃電,雷鳴,,,,,視覺,感覺,視覺,聽覺,人體的感覺的類型,,視覺（眼從外界獲得的信息最多）,聽覺（耳從外界獲得的信息量居第二位）,觸覺（皮膚感受冷、熱、痛、壓等刺激）,味覺（舌辨別酸、甜、苦、咸）,嗅覺（鼻對氣味敏感）,,靈敏地感知環(huán)境的變化并對自身的生命活動進(jìn)行調(diào)節(jié)，維持自身的生存。,,外界環(huán)境的感知,眼和視覺,一、眼球的結(jié)構(gòu)和功能,虹膜,瞳孔,角膜,晶狀體,鞏膜,脈絡(luò)膜,視網(wǎng)膜,玻璃體,2眼睛的結(jié)構(gòu)各有什么功能呢,有色素，中央有小孔。,光線的通道,無色，透明可以透過光線。,透明，有彈性，像雙凸透鏡能折射光線。,白色，堅固保護(hù)眼球的內(nèi)部結(jié)構(gòu)。,含有許多對光線敏感的細(xì)胞能感受光的刺激。,透明膠狀物,1眼睛有哪些結(jié)構(gòu)呢,視神經(jīng),鞏膜,虹膜,瞳孔,,眼球,眼球,,,內(nèi)容物,外膜,中膜,視網(wǎng)膜（感受光刺激并成像）,,,晶狀體（折光）、玻璃體、房水等,角膜（通光）,鞏膜（保護(hù)）,虹膜（調(diào)節(jié)通光量）,睫狀?。ㄕ{(diào)節(jié)晶狀體）,脈絡(luò)膜（營養(yǎng)，暗室）,眼球壁,內(nèi)膜,物體,1角膜,2瞳孔,3晶狀體,4玻璃體,5視網(wǎng)膜,6視覺神經(jīng),大腦皮層上的視覺中樞7,,,,,,,,,612視覺的形成過程,有一小孩，眼球的結(jié)構(gòu)完整無損，但是她看不見周圍的物體，想一想，這種眼睛可能是哪部分發(fā)生了病變,視覺形成的三個條件,眼球的完好視神經(jīng)沒斷大腦正常,,可能是視神經(jīng)或大腦皮層的視覺中樞發(fā)生了病變。,如果你看電影遲到了，剛進(jìn)電影院時伸手不見五指，過一會兒，你才能看見周圍的人和座位。當(dāng)你剛走出電影院時，你會感到外面太亮了，不由地瞇起雙眼。,圖中畫的是貓在明亮和黑暗環(huán)境中瞳孔的變化，貓能通過調(diào)節(jié)瞳孔的大小使自己在明處和暗處都能看清物體。人的瞳孔也能這樣調(diào)節(jié)的。,明處,暗處,你有過這樣的經(jīng)歷嗎,你知道這是為什么,比較兩張圖片，是否一樣,說一說你什么時候近視的怎么近視的近視給你的生活帶來哪些不便,1,2,如果不注意用眼衛(wèi)生，常常會造成近視。我們班的同學(xué)近視情況如何呢請同學(xué)們調(diào)查一下。,我們?yōu)槭裁磿暷?正常眼的調(diào)節(jié),⊙正常眼睛看遠(yuǎn)處物體時⊙正常眼睛看近處物體時,,,,,,眼球前后徑,近視眼為何看不清物體,⊙近視眼看遠(yuǎn)處物體時晶狀體過度變凸⊙近視眼看遠(yuǎn)處物體時眼球的前后徑過長,,,,,真性近視,假性近視,,,眼球前后徑,,,,近視,矯正,,凹透鏡,,,,,正常眼,遠(yuǎn)視眼,,,,遠(yuǎn)視,矯正,,,凸透鏡,三、近視的形成,,晶狀體調(diào)節(jié)負(fù)擔(dān)過重，過度變凸①形成原因眼球前后徑過長,②矯正戴凹透鏡,近視眼的預(yù)防,“三要”,讀寫姿勢要正確，眼與書的距離要在33厘米左右。,看書、看電視或使用電腦1小時后要休息一下，要遠(yuǎn)眺幾分鐘。,要定期檢查視力，認(rèn)真做眼保健操。,“四不看”,不在直射的光線下看書。,不在光線暗的地方看書。,不躺臥看書。,不走路看書。,11、人們常說照相機的成像跟人的眼球成像的原理相同，根據(jù)你對眼球的認(rèn)識，想一想，眼球的晶狀體、瞳孔和視網(wǎng)膜分別相當(dāng)于照相機的什么結(jié)構(gòu)晶狀體瞳孔視網(wǎng)膜,鏡頭,光圈,膠卷,光圈,,,練一練,1、在眼球的結(jié)構(gòu)中，能改變曲度使人可看清遠(yuǎn)近不同的物體的是（）A、角膜B、瞳孔C、晶狀體D、玻璃體2、眼球內(nèi)具有感光細(xì)胞的結(jié)構(gòu)是（）A、角膜B、鞏膜C、脈絡(luò)膜D、視網(wǎng)膜3、矯正近視眼佩戴的鏡片是（）A、平面鏡B、凹透鏡C、凸透鏡D、凹面鏡,D,C,B,4、外界物體發(fā)射過來的光線，依次經(jīng)過（）到達(dá)視網(wǎng)膜。A、瞳孔、角膜、晶狀體、玻璃體B、瞳孔、角膜、玻璃體、晶狀體C、角膜、瞳孔、晶狀體、玻璃體D、角膜、瞳孔、玻璃體、晶狀體5、眼球中具有折光作用的結(jié)構(gòu)是（）A、角膜B、晶狀體C、鞏膜D、虹膜,C,B,6、視覺是在視網(wǎng)膜上形成的。（）7、為了節(jié)約時間，應(yīng)邊走路邊看書學(xué)習(xí)。（）8、讀寫姿勢要正確，眼與書的距離要在10厘米左右。（）9、躺臥看書很舒服，應(yīng)當(dāng)提倡。（）10、當(dāng)人觀看一個由遠(yuǎn)處移近的物體時，晶狀體會逐漸變厚。（）,,,,,√,1、同學(xué)們在上課時，一會兒看桌上的書，一會兒抬頭看前面的黑板，物像都能落在視網(wǎng)膜上?？吹煤芮宄@主要是因為A瞳孔可以縮小或放大B晶狀體的曲度可以調(diào)節(jié)C視網(wǎng)膜可以前后移動調(diào)節(jié)D眼球的前后徑能隨意調(diào)節(jié)【解析】是問題情境。視覺形成過程中，調(diào)節(jié)功能最明顯的是晶狀體。瞳孔只能調(diào)節(jié)進(jìn)入光線的強度，視網(wǎng)膜和眼球前后徑是不能隨意調(diào)節(jié)的。,中考全真題,B,識圖綜合分析題,下圖為人眼結(jié)構(gòu)和照相機結(jié)構(gòu)示意圖，請回答下列問題,⑴如果把眼睛比喻成心靈的窗戶，那么圖中1就是窗戶上那明亮的玻璃。請寫出1的名稱_________。⑵如果人的眼球比喻成一架照相機，那么，結(jié)構(gòu)示意圖中的3相當(dāng)于照相機結(jié)構(gòu)示意圖中的標(biāo)號_________。⑶結(jié)構(gòu)（視神經(jīng)是屬于傳入神經(jīng)還是傳出神經(jīng)_________。⑷人眼球結(jié)構(gòu)示意圖2的名稱叫瞳孔，人能通調(diào)節(jié)瞳孔的大小使自己在明處和暗處都能看清物體，請問瞳孔相當(dāng)于顯微鏡的哪一構(gòu)造,答案⑴角膜⑵6⑶傳入神經(jīng)⑷C,1假如人失去聽覺，這四個場面各會出現(xiàn)什么情況,2你還能舉出幾個說明耳和聽覺重要性的實例嗎,人若失去聽覺，就不能及時獲取電視中的重要信息；聽不到汽車鳴笛，無法迅速避讓，易發(fā)生危險；聽不到電話鈴聲，無法接聽電話；聽不到同學(xué)的討論，很難積極參與交流。,耳為什么能聽到聲音耳由哪些結(jié)構(gòu)組成,五、耳的結(jié)構(gòu)和功能,耳郭,外耳道,鼓膜,鼓室,聽小骨,半規(guī)管,前庭,耳蝸,咽鼓管,收集聲波,,內(nèi)耳,平衡鼓室內(nèi)外的氣壓,耳的基本結(jié)構(gòu)和功能,五、聽覺的產(chǎn)生,外界聲波,耳朵的衛(wèi)生和保健,1、噪聲對聽覺有什么影響2、怎樣保護(hù)外耳道3、怎樣預(yù)防中耳炎4、怎樣保護(hù)鼓膜,外耳道皮膚的耵聹腺所分泌的一種蠟狀物，叫做耵聹，對外耳道有保護(hù)作用。耵聹干燥后成為固體，就是常說的“耳屎”。,＊耳道內(nèi)耵聹（耳垢）較多時,,不要使用尖銳的器具挖耳朵，以免戳傷外耳道和鼓膜。,＊鼻咽部有炎癥時,,鼻咽部的病菌可能通過咽鼓管進(jìn)入中耳，因此，要及時就診，以免引起中耳炎。,,保護(hù)耳和聽力,1、減少和消除噪聲2、不用尖銳的東西挖耳朵3、遇到巨大的聲音，迅速張開口，或者堵耳、閉嘴。保持鼓膜大氣壓力平衡。4、鼻咽部有炎癥，及時治療，避免中耳炎5、不讓污水進(jìn)入外耳道，避免其感染。,人體的其他感覺器官,鼻嗅覺,鼻、舌和皮膚,舌味覺（酸、甜、苦、咸）,皮膚觸覺（冷、熱、痛、觸、壓等）,知識延伸,鼻腔內(nèi),有嗅覺細(xì)胞,舌的表面,有味覺細(xì)胞,味蕾,皮膚感受壓力,皮膚感受冷與熱,盲文公交車站（觸覺）,感受疼痛,人體的感覺都正確嗎,知識延伸,想一想你吃飯的情景，當(dāng)時你都感覺到什么,聞到了飯菜的氣味看到了飯菜的形狀和顏色嘗到了飯菜的味道手指感覺到飯菜的溫?zé)崧牭郊胰说恼勗?嗅覺視覺味覺觸覺聽覺,△,1、能夠感受頭部位置變動的情況的是（）A聽小骨B半規(guī)管C前庭D耳蝸2、有對聲波敏感的感覺細(xì)胞的是（）A聽小骨B半規(guī)管C前庭D耳蝸,BC,D,3、聽覺形成的過程，下列正確的是（）A聲音→外耳道→鼓膜→耳蝸→聽小骨→聽神經(jīng)B聲音→外耳道→耳蝸→鼓膜→聽小骨→聽神經(jīng)C聲音→外耳道→鼓膜→聽小骨→耳蝸→聽神經(jīng),C,遇到巨大聲響時，要迅速（）①堵耳②張口③閉嘴④喊叫A①②B①④C②或①③D②④其目的是為了（）E聽起來聲音會變小F使鼓膜內(nèi)外氣壓保持平衡G防止聽小骨斷裂H防止產(chǎn)生腦震蕩,C,F,2、在飛機起飛或降落時，乘務(wù)員通常發(fā)給每位乘客一塊口香糖，這樣做的目的是（）,A、保護(hù)耳蝸內(nèi)的聽覺感受器B、保持鼓膜內(nèi)外氣壓平衡，以防鼓膜受損C、防止聽小骨和聽覺神經(jīng)受損D、使咽鼓管張開，保護(hù)聽小骨,B,比一比誰完成的最好,,1、下列各項中，不屬于內(nèi)耳結(jié)構(gòu)的是（）,A、半規(guī)管B、前庭C、鼓膜D、耳蝸,C,2、中耳內(nèi)通過三塊聽小骨傳導(dǎo)的是（）,A、外界聲波B、鼓膜的振動C、神經(jīng)沖動D、聽覺,B,B,A,比一比,3人坐車時不靠視覺也能判斷車速的快慢和左右轉(zhuǎn)彎，因為感受刺激的感受器位于（）Ａ耳蝸和前庭內(nèi)Ｂ前庭和半規(guī)管內(nèi)Ｃ半規(guī)管和鼓膜內(nèi)Ｄ鼓室和耳蝸內(nèi)4在飛機起飛或降落時，應(yīng)將口微微張開，其目的是Ａ使鼓膜內(nèi)外的氣壓平衡，避免鼓膜受損傷Ｂ減緩緊張情緒Ｃ避免嘔吐Ｄ進(jìn)行深呼吸，以適應(yīng)氣壓變化5聽覺形成過程中感受刺激產(chǎn)生興奮的結(jié)構(gòu)是（）Ａ．耳蝸Ｂ．鼓膜Ｃ．聽覺中樞Ｄ．半規(guī)管,A,

簡介：一、DNA復(fù)制,DNA的半保留復(fù)制DNA復(fù)制的主要方式原核生物和真核生物DNA復(fù)制的特點DNA復(fù)制的調(diào)控DNA的修復(fù)1,自學(xué),DNA的轉(zhuǎn)座,“倘若你認(rèn)為自己邁開的步伐是正確的，并且已經(jīng)掌握了專門的知識，那么，任何人都阻撓不了你，不必去理會人們的非難和評頭品足。”BARBARAMCCLINTOCK,“如果你能腳踏實地從事研究并如實報告觀察結(jié)果，同時保持健康長壽，那么，你有可能獲諾貝爾獎?！盉ARBARAMCCLINTOCK,1983年諾貝爾生理醫(yī)學(xué)獎,,DNA的轉(zhuǎn)座DNA的移位TRANSPOSITION,是由可移位因子（TRANSPOSABLEELEMENT）介導(dǎo)的遺傳物質(zhì)重排現(xiàn)象。,,轉(zhuǎn)座子（TRANSPOSON,TN）是存在于染色體DNA上可自主復(fù)制和移位的基本單位。,在轉(zhuǎn)座過程中，有的轉(zhuǎn)座子會留在原來位置上，在新位點上出現(xiàn)的僅僅是它的拷貝。,在生物體內(nèi)普遍存在,“轉(zhuǎn)座”就是轉(zhuǎn)座子的移位嗎,轉(zhuǎn)座子的分類,插入序列（INSERTIONALSEQUENCE,IS因子）,復(fù)合型轉(zhuǎn)座子（COMPOSITETRANSPOSON）,最簡單的轉(zhuǎn)座子，不含任何宿主基因，是細(xì)菌染色體或質(zhì)粒DNA的正常組成部分。,帶IS序列,不帶IS序列,帶有某些抗藥性基因（或其它宿主基因）的轉(zhuǎn)座子，兩翼往往是相同或高度同源的IS序列。,,,TNA家族不帶IS序列體積龐大（5KB）的轉(zhuǎn)座子，帶有Β－內(nèi)酰胺酶（AMPR）基因和兩個轉(zhuǎn)座必需基因。,末端常帶有倒置重復(fù)序列,復(fù)制型轉(zhuǎn)座子,轉(zhuǎn)座子的分類續(xù),非復(fù)制型轉(zhuǎn)座子,在復(fù)制過程中,整個轉(zhuǎn)座子被復(fù)制,所移動的是原轉(zhuǎn)座子的拷貝,轉(zhuǎn)座酶TRANSPOSASE和解離酶RESOLVASE分別作用于原始轉(zhuǎn)座子和復(fù)制轉(zhuǎn)座子,如TNA類轉(zhuǎn)座子。,在復(fù)制過程中，原始轉(zhuǎn)座子作為一個可移動的實體直接被移位，如IS序列、MU、TN5等。,DNA轉(zhuǎn)座的遺傳學(xué)效應(yīng),1、引起插入突變各種IS、TN轉(zhuǎn)座子都可以引起插入突變。2、產(chǎn)生新基因3、產(chǎn)生染色體畸變4、引起生物進(jìn)化,二、從DNA到RNA,RNA轉(zhuǎn)錄的基本過程,RNA鏈合成特點RNA是按方向合成，在催化下，以DNA鏈中的鏈為模板，以為原料，根據(jù)堿基配對原則，各核苷酸間通過磷酸二酯鍵相連，（需要/不需要）引物的參與，合成的RNA帶有與DNA編碼鏈（有意義鏈）相同的序列（AU）。,模板識別,轉(zhuǎn)錄起始,轉(zhuǎn)錄延伸,轉(zhuǎn)錄終止,,,,5’→3’,反義,RNA聚合酶,4種核苷三磷酸,TA、,,AU、,GC,模板識別（TEMPLATERECOGNITION）指RNA聚合酶與啟動子DNA雙鏈相互作用并與之相結(jié)合的過程。,PROMOTER是基因轉(zhuǎn)錄起始所必需的一段DNA序列，是基因表達(dá)調(diào)控的上游順式作用元件之一。,直接識別并結(jié)合,轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子,RNA聚合酶,,,轉(zhuǎn)錄起始前復(fù)合物（PREINTIATIONTRANSCRIPTIONCOMPLEX,PIC）,,,開放復(fù)合物在RNA轉(zhuǎn)錄的模板識別階段，隨著DNA結(jié)構(gòu)變化，聚合酶與啟動子形成的封閉復(fù)合物轉(zhuǎn)變成開放復(fù)合物，此時DNA序列中有一小段雙鏈被解開。,封閉復(fù)合物在RNA轉(zhuǎn)錄的模板識別階段，聚合酶與啟動子可逆性結(jié)合形成的復(fù)合物，此時DNA處于雙鏈狀態(tài)。,三元復(fù)合物在RNA轉(zhuǎn)錄的模板識別階段，開放復(fù)合物與最初的2個NTP相結(jié)合并在它們之間形成磷酸二酯鍵后即轉(zhuǎn)變成包括RNA聚合酶、DNA和新生RNA的復(fù)合物。,強啟動子快速/不可逆封閉復(fù)合物開放復(fù)合物,,,,,模板識別,,轉(zhuǎn)錄起始前復(fù)合物,PIC,轉(zhuǎn)錄起始（INITIATION）,不需要引物,,RNA聚合酶合成9個以上核苷酸并離開啟動子區(qū)，轉(zhuǎn)錄進(jìn)入延伸階段。RNA聚合酶通過啟動子的時間代表一個啟動子的強弱。,轉(zhuǎn)錄延伸（ELONGATION）RNA聚合酶釋放Σ因子離開啟動子后，核心酶沿模板DNA鏈移動并使新生RNA鏈不斷伸長的過程。,ECOLIRNA聚合酶5090個核苷酸/秒,轉(zhuǎn)錄終止（TERMINATION）當(dāng)RNA鏈延伸到轉(zhuǎn)錄終止時，RNA聚合酶不再形成新的磷酸二酯鍵，RNADNA雜合物分離，轉(zhuǎn)錄泡瓦解，DNA恢復(fù)雙鏈狀態(tài)，而RNA聚合酶和RNA鏈都被從模板上釋放出來。,RNA聚合酶,原核生物,ECOLIRNA聚合酶,2個Α亞基,1個Β亞基,1個Β’亞基,1個Ω亞基,1個Σ亞基,,,負(fù)責(zé)模板鏈的選擇和轉(zhuǎn)錄起始，使酶專一性識別模板上的啟動子。存在多個Σ因子，用以識別不同的啟動子。,全酶（HOLOENZYME）,,,催化核心,,核心酶,,,,與模板DNA、新生RNA鏈及核苷酸底物結(jié)合。,可能與核心酶組裝及啟動子識別有關(guān)，并參與RNA聚合酶和部分調(diào)節(jié)因子的相互作用。,,一種RNA聚合酶幾乎合成所有RNA,真核生物,RNA聚合酶I,RNA聚合酶II,RNA聚合酶III,轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物,RRNA,HNRNA,TRNA、5SRRNA、SNRNA,,,,,MRNA,一般由816個亞基組成,Α鵝膏覃堿,,低濃度動植物中，RNA聚合酶II被抑制，RNA聚合酶I沒影響，RNA聚合酶III在各生物中差異大。,高濃度動物細(xì)胞中抑制轉(zhuǎn)錄，但昆蟲中無影響。,啟動子的結(jié)構(gòu),轉(zhuǎn)錄單元（TRANSCRIPTIONUNIT）是一段從啟動子開始至終止子結(jié)束的DNA序列。,你還記得什么是啟動子嗎,,,,RNA,,,轉(zhuǎn)錄起始位點,在RNA聚合酶與DNA結(jié)合的區(qū)域內(nèi)有一個由6個核苷酸組成的序列，是RNA聚合酶的緊密結(jié)合點，該位點的中央約位于起點上游10BP處，又稱10區(qū)。,PRIBNOW區(qū)（PRIBNOWBOX）,,,在PRIBNOWBOX外存在的與RNA聚合酶對啟動子識別有關(guān)的共同序列TTGACA，它位于起點上游35BP處。,35區(qū),原核生物啟動子的特點,10區(qū)和35區(qū)是RNA聚合酶與啟動子的結(jié)合位點，能與Σ因子相互識別，具有很高的親和力。,真核生物啟動子的特點,HOGNESS區(qū)（HOGNESSBOX）,在真核生物中，位于轉(zhuǎn)錄起始點上游3025BP處存在共同序列TATAAA，也稱TATA區(qū)。,CAAT區(qū)（CAATBOX）,在真核生物中，位于轉(zhuǎn)錄起始點上游7870BP處存在一段共同序列CCAAT，它與原核生物中35區(qū)相對應(yīng)。,GC區(qū)、增強子區(qū),將TATA區(qū)上游的保守序列稱為上游啟動子元件（UPE）或上游激活序列（UAS）,,原核與真核生物MRNA的特征比較,原核生物的MRNA,1、半衰期短2、可能以多順反子形式存在3、5’端無帽子結(jié)構(gòu)，3’端沒有或只有較短的POLYA結(jié)構(gòu),單順反子MRNA只編碼一個蛋白質(zhì)的MRNA。,多順反子MRNA編碼多個蛋白質(zhì)的MRNA。,,真核生物的MRNA,1、5’端有“帽子”結(jié)構(gòu)2、3’端有POLYA“尾巴”結(jié)構(gòu),帽子結(jié)構(gòu)是GTP和原MRNA5’三磷酸腺苷（或鳥苷）縮合反應(yīng)的產(chǎn)物。,常被甲基化,組蛋白基因,轉(zhuǎn)錄后,真核基因轉(zhuǎn)錄終止位點上游1530BP處的保守序列AAUAAA,RNA聚合酶II至尾巴下游052KB核苷酸處,,“帽子”是什么所有真核MRNA都有“尾巴”嗎“尾巴”是何時產(chǎn)生的什么是加尾和初級轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物準(zhǔn)確切割所必需的RNA聚合酶都在“尾巴”終止嗎,真核生物初始轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物的加工,DNA轉(zhuǎn)錄生成的原始轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物即MRNA的前體，經(jīng)過和，再經(jīng)過，編碼蛋白質(zhì)的外顯子部分就連接成為一個連續(xù)的，通過核孔進(jìn)入細(xì)胞質(zhì)，即可作為蛋白質(zhì)合成的模板了。,核不均一RNA（HNRNA）,5’加帽,3’加多聚腺苷酸,RNA的剪接,開放閱讀框（ORF,核酶RIBOZYME,是一類具有催化功能的RNA分子,通過催化靶位點RNA鏈中磷酸二酯鍵的斷裂,特異性剪切底物RNA分子,從而阻斷基因的表達(dá)。,,RIBONUCLEICACID,ENZYME,酶不僅是蛋白質(zhì)T4RNA、一些植物類病毒和擬病毒也可自我剪接是繼反轉(zhuǎn)錄之后對中心法則的又一重要修正，說明RNA既是又是。,核酶,遺傳物質(zhì),酶,三、從MRNA到蛋白質(zhì),肽鏈的終止及釋放,翻譯的起始,肽鏈的延伸,,,核糖體與MRNA結(jié)合并與氨基酸TRNA生成起始復(fù)合物,核糖體沿5’端向3’端移動，多肽從N端向C端合成,核糖體從MRNA上解離，準(zhǔn)備新一輪的合成,翻譯的基本過程,將MRNA鏈上的核苷酸從一個特定的起始位點開始，按每3個核苷酸代表一個氨基酸的原則，依次合成一條多肽鏈的過程。,三聯(lián)子密碼CODON的性質(zhì)起始密碼子INITIATIONCODON和終止密碼子TERMINATIONCODONTRNA的特點比較原核與真核細(xì)胞核糖體的組成核糖體的活性中心信號肽葉綠體蛋白質(zhì)的跨膜轉(zhuǎn)運蛋白質(zhì)的翻譯后加工抗生素與蛋白質(zhì)合成,UGA,UAG,UAA,AUG,,,,OCHREAMBEROPAL,,自學(xué),氯霉素可能阻止MRNA與核糖體結(jié)合四環(huán)素類可能阻止AATRNA與核糖體結(jié)合鏈霉素、新霉素、卡那霉素等可能干擾AATRNA與核糖體結(jié)合而產(chǎn)生錯讀,,競爭性抑制劑,,THEENDOFCHAPTERIII,精品課件,精品課件,DNA通過復(fù)制將遺傳信息由親代傳遞給子代；,DNA是遺傳信息的攜帶者,DNADEPENDENTDNAPOLYMERASEDDDPDNADEPENDENTRNAPOLYMERASEDDRPRNADEPENDENTRNAPOLYMERASERDRPRNADEPENDENTDNAPOLYMERASERDDP,

簡介：第二部分題型專訓(xùn)篇第1講高中生物學(xué)“模型建構(gòu)”,核心考點歸納整合,教材涉及的7個模型及其建構(gòu)1必修12個。①教材P54嘗試制作真核細(xì)胞的三維結(jié)構(gòu)模型物理模型。②教材P69利用廢舊物品制作生物膜模型物理模型。2必修23個。①教材P23建立減數(shù)分裂中染色體變化的模型，模擬減數(shù)分裂中染色體數(shù)目及主要行為變化，并模擬減數(shù)分裂過程中非同源染色體的自由組合物理模型。,核心考點歸納整合,②教材P50制作DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)模型關(guān)注磷酸、脫氧核糖及堿基間的連接部位，并關(guān)注脫氧核苷酸及兩條鏈間的連接物理模型。③教材P115用數(shù)學(xué)方法討論基因頻率的變化數(shù)學(xué)模型。3必修32個。①教材P6構(gòu)建人體細(xì)胞與外界環(huán)境的物質(zhì)交換模型物理模型。②教材P65構(gòu)建種群增長的數(shù)學(xué)模型，如公式型NN＝2N細(xì)菌增長模型、NT＝N0ΛT“J”型曲線增長模型；曲線型“J”型、“S”型種群增長曲線等,核心考點歸納整合,類型一概念模型類。,概念模型是指以命題的形式顯示概念間的意義聯(lián)系，并用具體事例加以說明，來展示概念間層級結(jié)構(gòu)的示意圖。其主要目的和作用是理清生物學(xué)概念之間的獨立關(guān)系、從屬關(guān)系等，使分散的生物學(xué)概念系統(tǒng)化，一般采用集合、知識樹的形式呈現(xiàn)。,核心考點歸納整合,?知能儲備一、集合的類型1．集合形式之一獨立型理清具有獨立關(guān)系的生物學(xué)概念1模式圖,核心考點歸納整合,,2實例運用,核心考點歸納整合,,2．集合形式之二包含型理清一系列具有從屬關(guān)系的生物學(xué)概念1模式圖,2實例運用,核心考點歸納整合,,,3．集合形式之三重合型理清完全等同關(guān)系的生物學(xué)概念1模式圖,2實例運用,核心考點歸納整合,4．集合形式之四重疊型理清具有公共關(guān)系的生物學(xué)概念1模式圖,2實例運用,核心考點歸納整合,,5．集合形式之五混合型將分散的生物學(xué)概念知識理順為系統(tǒng)化1模式圖以上幾種圖示的混合型。,核心考點歸納整合,,2實例運用,核心考點歸納整合,,二、知識樹的類型,1．模式圖,核心考點歸納整合,2．實例運用1細(xì)胞的生命歷程概念圖,核心考點歸納整合,,2遺傳的分子基礎(chǔ)概念圖,核心考點歸納整合,3物種的形成概念圖,核心考點歸納整合,,,4內(nèi)環(huán)境的組成與穩(wěn)態(tài)概念圖,核心考點歸納整合,,,5種群的數(shù)量特征及變化,核心考點歸納整合,?跟蹤訓(xùn)練1．下圖表示人體通過體液免疫消滅破傷風(fēng)桿菌外毒素的過程，下列相關(guān)敘述錯誤的是B,A．細(xì)胞2、細(xì)胞3均起源于造血干細(xì)胞B．能特異性識別抗原的細(xì)胞有細(xì)胞2、細(xì)胞3、細(xì)胞4、細(xì)胞5C．HIV入侵人體后，會感染人體的細(xì)胞2D．物質(zhì)A主要分布在血清中,核心考點歸納整合,解析首先明確細(xì)胞1為吞噬細(xì)胞，細(xì)胞2是T細(xì)胞，細(xì)胞3是B細(xì)胞，細(xì)胞4為漿細(xì)胞，細(xì)胞5是記憶細(xì)胞，物質(zhì)A為抗體。細(xì)胞2、3分別是T細(xì)胞、B細(xì)胞，它們起源于造血干細(xì)胞；B細(xì)胞、T細(xì)胞、效應(yīng)T細(xì)胞和記憶細(xì)胞具有特異性識別抗原靶細(xì)胞的功能；吞噬細(xì)胞雖能識別抗原，但不具有特異性；漿細(xì)胞則不能識別抗原，但漿細(xì)胞分泌的抗體能特異性識別抗原，B錯；艾滋病病毒HIV攻擊人體免疫系統(tǒng)，特別是能夠侵入人體的T細(xì)胞，使T細(xì)胞大量死亡，導(dǎo)致患者喪失一切免疫功能，各種傳染病則乘虛而入；抗體分布在血清主要、組織液和外分泌液中。,核心考點歸納整合,2．仔細(xì)分析下圖，三個圓圈①、②、③分別表示含細(xì)胞壁、核糖體、中心體的細(xì)胞，那么陰影部分表示的細(xì)胞可能是B,A．乳酸菌B．小球藻C．肝細(xì)胞D．棉花葉肉細(xì)胞,核心考點歸納整合,解析本題考查多種多樣的細(xì)胞。乳酸菌屬于細(xì)菌，細(xì)胞內(nèi)唯一的細(xì)胞器是核糖體，不含中心體，A錯誤；小球藻是綠藻，屬于低等植物，含有細(xì)胞壁、核糖體和中心體結(jié)構(gòu)，B正確；肝細(xì)胞屬于高等動物細(xì)胞，無細(xì)胞壁，C錯誤；中心體存在于動物細(xì)胞和低等植物細(xì)胞中，棉花葉肉細(xì)胞是高等植物細(xì)胞，不含中心體，D錯誤。,核心考點歸納整合,,類型二物理模型類,物理模型是指客觀實物的相似模型或者是客觀現(xiàn)實的形象顯示，一般分為形態(tài)結(jié)構(gòu)模型和過程模型兩類，通常是用特殊的符號、色彩和圖形來反映生命現(xiàn)象的發(fā)生、發(fā)展以及生物的結(jié)構(gòu)、生理和相互聯(lián)系。它濃縮了大量的生物知識信息，是生物知識的重要表達(dá)方式。此類試題的特點是①新情境。即通過圖解、圖示創(chuàng)設(shè)新情境，提供新材料。②重能力。以圖解、圖示的方式展示生物原理、過程等，對考生綜合能力要求較高。,核心考點歸納整合,?知能儲備物理模型歸類總結(jié)1形態(tài)結(jié)構(gòu)模型描述生物體、器官、組織、細(xì)胞的形態(tài)結(jié)構(gòu)示意圖或模式圖或部分圖解。?？嫉男螒B(tài)結(jié)構(gòu)模型如下,核心考點歸納整合,核心考點歸納整合,2過程模型描述生命活動的動態(tài)過程或生物進(jìn)化的過程。常考的過程模型如下,核心考點歸納整合,核心考點歸納整合,核心考點歸納整合,核心考點歸納整合,核心考點歸納整合,核心考點歸納整合,?跟蹤訓(xùn)練3．下列中可以借助電子顯微鏡觀察到的是B,解析電子顯微鏡看到的結(jié)構(gòu)叫作亞顯微結(jié)構(gòu)。細(xì)胞膜的結(jié)構(gòu)和DNA的雙螺旋結(jié)構(gòu)及染色體都可以用光學(xué)顯微鏡觀察到。線粒體的內(nèi)部結(jié)構(gòu)只能用電子顯微鏡觀察。,核心考點歸納整合,4．細(xì)胞是生物體結(jié)構(gòu)和功能的基本單位。對下列有關(guān)細(xì)胞的敘述，正確的是B,A．三種細(xì)胞中共同具有的細(xì)胞器是核糖體和DNAB．水分子進(jìn)入三種細(xì)胞的方式都為滲透C．A、B都有細(xì)胞周期，其內(nèi)的化學(xué)成分也在不斷更新D．A能進(jìn)行光合作用，C不會發(fā)生質(zhì)壁分離,核心考點歸納整合,解析DNA不是細(xì)胞器，A錯誤，圖A為高度分化的細(xì)胞不能增殖，C錯誤。C也能發(fā)生質(zhì)壁分離，D錯誤。,核心考點歸納整合,5．下圖中①～④表示某細(xì)胞的部分細(xì)胞器，下列有關(guān)敘述正確的是C,A．此細(xì)胞不可能是原核細(xì)胞，只能是動物細(xì)胞B．結(jié)構(gòu)③是合成脂質(zhì)的場所，結(jié)構(gòu)②無磷脂C．結(jié)構(gòu)①不能將葡萄糖分解成二氧化碳和水D．結(jié)構(gòu)①和④都存在堿基A和T的互補配對,核心考點歸納整合,解析圖示此細(xì)胞中含有①線粒體、②中心體、③高爾基體、④核糖體和細(xì)胞核等結(jié)構(gòu)，為真核生物，可能為動物細(xì)胞或低等植物細(xì)胞，A錯誤；高爾基體是蛋白質(zhì)的加工場所，不是脂質(zhì)合成場所，脂質(zhì)合成場所是內(nèi)質(zhì)網(wǎng)，B錯誤；線粒體是有氧呼吸的主要場所，但葡萄糖氧化分解的第一階段是在細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)中進(jìn)行，因此線粒體不能將葡萄糖分解成二氧化碳和水，C正確；線粒體和核糖體中均存在堿基互補配對行為，但是在核糖體中進(jìn)行的是MRNA與TRNA的配對，沒有A和T的互補配對，D錯誤。,核心考點歸納整合,,類型三數(shù)學(xué)模型類,?知能儲備一、坐標(biāo)曲線型解答生物坐標(biāo)曲線分析題時，要明確無論曲線多么復(fù)雜，關(guān)鍵都是數(shù)和形。數(shù)就是坐標(biāo)曲線中的點，如起點、轉(zhuǎn)折點和終點；形就是曲線的變化趨勢，乃至將來的動態(tài)，“讀軸看線綜合”是坐標(biāo)曲線類試題思維分析過程的“三步曲”。讀軸即明確橫軸自變量和縱軸因變量各是什么，弄清它們的含義，做到“讀軸而能識變量”；“看線”即看曲線的走勢，弄清自變量是如何影響因變量的，領(lǐng)會曲線表示了什么、說明了什么，做到“看線而能理關(guān)系”；“綜合”即綜合分析各曲線間的關(guān)系，是相互依賴還是相互制約，做到“綜合而能求突破”。,核心考點歸納整合,1．單曲線單曲線常表示某種生物的數(shù)量或某一生理過程與某一相關(guān)因素之間的關(guān)系。常有以下種類1升曲線。,核心考點歸納整合,2降曲線。,核心考點歸納整合,3先升后降。,核心考點歸納整合,4先降后升。,核心考點歸納整合,5升降不斷變化。,核心考點歸納整合,2．雙曲線和多曲線雙曲線和多曲線指在一個坐標(biāo)系中，有兩條或兩條以上的曲線，通常表示不同生物的數(shù)量或同一生物的不同器官或生理過程與某一相關(guān)因素之間的關(guān)系。,核心考點歸納整合,核心考點歸納整合,核心考點歸納整合,?跟蹤訓(xùn)練6．某校生物興趣小組以玉米為實驗材料，研究不同條件下細(xì)胞光合作用速率和呼吸速率的關(guān)系，并繪制了甲、乙、丙、丁四幅圖。其中圖中“A”點不能表示光合作用速率與細(xì)胞呼吸速率相等的是A,核心考點歸納整合,解析圖甲中所示A點代表凈光合速率與呼吸速率相等，其余各圖的A點均代表總光合速率與呼吸速率相等。,核心考點歸納整合,解析寒冷刺激時，甲狀腺激素含量增多，A錯誤；正常人空腹?fàn)顟B(tài)下口服一定量葡萄糖一段時間后，血糖含量仍應(yīng)維持在80～120MG/DL，B錯誤；進(jìn)食后隨血糖濃度的變化，人體內(nèi)胰島素的降血糖作用和胰高血糖素的升血糖作用相互拮抗，共同實現(xiàn)對糖代謝的調(diào)節(jié)，C錯誤；當(dāng)空腹時，肝糖原分解，從而血糖升高，但隨時間進(jìn)行肝糖原越來越少，血糖先增加后減少，然后處于動態(tài)平衡，故D正確。,核心考點歸納整合,7．下圖表示不同條件下，人體內(nèi)某些物質(zhì)含量變化的趨勢，其中正確的是D,核心考點歸納整合,解析寒冷刺激時，甲狀腺激素含量增多，A錯誤；正常人空腹?fàn)顟B(tài)下口服一定量葡萄糖一段時間后，血糖含量仍應(yīng)維持在80～120MG/DL，B錯誤；進(jìn)食后隨血糖濃度的變化，人體內(nèi)胰島素的降血糖作用和胰高血糖素的升血糖作用相互拮抗，共同實現(xiàn)對糖代謝的調(diào)節(jié)，C錯誤；當(dāng)空腹時，肝糖原分解，從而血糖升高，但隨時間進(jìn)行肝糖原越來越少，血糖先增加后減少，然后處于動態(tài)平衡，故D正確。,核心考點歸納整合,二、表格分析型表格“三看”法此法主要適用于表格數(shù)據(jù)類實驗題。一看“點”就是要注意表格中的特殊數(shù)據(jù)，如最多、最少、平均等，尤其是表格中出現(xiàn)“0”的地方；二看“線”就是要注意弄清數(shù)據(jù)變化規(guī)律，如上升或下降；三看“面”就是要注意采取對比或分組對比的方法，找出各個組數(shù)據(jù)之間的關(guān)系及各組之間的相同點和不同點。,核心考點歸納整合,,,,?跟蹤訓(xùn)練8．某種鐵線蓮的根莖可作中藥，有重要經(jīng)濟價值。下表為不同遮光處理對其光合作用影響的結(jié)果，相關(guān)敘述正確的是C,核心考點歸納整合,,,,A．適當(dāng)?shù)恼诠馓幚?，會降低其干重B．葉綠素含量與凈光合速率呈正相關(guān)C．葉綠素A/B可作為其利用弱光能力的判斷指標(biāo)D．遮光90時，鐵線蓮不進(jìn)行光合作用,解析從植株干重一列看，適當(dāng)?shù)恼诠馓幚頃r，可以提高干重，A錯誤。但葉綠素的含量與凈光合作用之間數(shù)據(jù)變化不是一直增加，所以B不正確。據(jù)表格中的A/B的比值看比值越大植株增重越多，可以作為利用光的判斷指標(biāo)。當(dāng)遮光達(dá)90時，雖然凈光合作用為0，但還是進(jìn)行了光合作用，且光合作用產(chǎn)生的有機物剛好滿足呼吸作用消耗的；所以凈光合作用為0。,核心考點歸納整合,,,,9．根據(jù)有關(guān)材料作答。Ⅰ植物光合作用吸收的CO2與呼吸作用釋放的CO2相等時的光照強度稱為光補償點。光照強度增加到某一點時，再增加光照強度，光合強度也不增加，該點的光照強度稱為光飽和點。A～D4種植物的單個植株在自然CO2濃度及最適溫度下的光補償點和光飽和點如下表。,核心考點歸納整合,,,,1植物細(xì)胞產(chǎn)生CO2的具體部位是________________；利用CO2的具體部位是__________。2光照強度為04KLX時，表格中______植物的呼吸作用產(chǎn)生的CO2多于光合作用吸收的CO2。3僅考慮溫度和CO2含量的影響，在溫度較高，CO2較少的密閉溫室中，植物的光補償點較________。大田玉米群體的光飽和點比單株玉米的光飽和點要高，主要原因是______________________________________________________。,核心考點歸納整合,,,,Ⅱ科學(xué)家在黑暗時把葉綠體基粒放在PH＝4的溶液中，讓基粒類囊體膜腔的PH值下降至4，然后將基粒移入PH＝8并含有ADP和PI的緩沖溶液中如下圖。一段時間后，有ATP產(chǎn)生。,核心考點歸納整合,,,,4為獲取葉綠體，先要破碎葉肉細(xì)胞，再用__________法分離。5上述實驗結(jié)果表明，基粒類囊體合成ATP的原因是________________。據(jù)此推測，葉綠體在自然狀態(tài)下產(chǎn)生ATP的過程中，光能的作用是_______________________________________________________________________________。,核心考點歸納整合,,,,解析1植物在有氧呼吸和無氧呼吸中均可產(chǎn)生CO2，植物產(chǎn)生CO2的部位為細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)和線粒體基質(zhì)。光合作用過程中CO2參與的暗反應(yīng)是在葉綠體基質(zhì)中完成的，植物利用CO2的具體部位是葉綠體基質(zhì)。2題目中給出的實際光照強度為04KLX，要滿足題目中要求的呼吸作用產(chǎn)生的CO2多于光合作用釋放的CO2，該光照強度應(yīng)小于光補償點，只有A、C兩種植物滿足此要求。3在該條件下溫度升高與呼吸作用相關(guān)的酶活性增強，呼吸作用消耗的有機物較之前有所增加，而此時容器中CO2較少，要制造出與呼吸作用相等量的有機物，植物需利用更強的光照，即光補償點會升高。在大田玉米群體中給予相同的光照強度，由于在群體中葉片間有相互遮擋的現(xiàn)象，下部的很多葉片所接收的光能在光飽和點以下，要想使下部葉片也達(dá)到光飽和點，需要再增強光照，即光飽和點會上升。,核心考點歸納整合,,,,4要從破碎葉肉細(xì)胞的眾多微粒中獲取葉綠體，可采用差速離心法或采用密度梯度法。5ATP的合成與基粒類囊體膜內(nèi)外的PH差值有關(guān)，而造成PH差值的原因則為膜內(nèi)外H＋濃度的不同，即H＋濃度差。由此可推知，葉綠體在自然狀態(tài)下產(chǎn)生ATP也應(yīng)與H＋有關(guān)，具體原因可能是在光的作用下水分解產(chǎn)生H＋，使類囊體膜腔內(nèi)PH下降，形成類囊體膜內(nèi)外的H＋濃度差，從而導(dǎo)致葉綠體基質(zhì)中的ADP和PI合成ATP。答案1線粒體基質(zhì)和細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)葉綠體基質(zhì)2A、C3高植株間存在遮光現(xiàn)象CO2濃度增加4差速離心5膜內(nèi)外存在H＋梯度H＋濃度差使水分解產(chǎn)生H＋；使類囊體膜內(nèi)外之間產(chǎn)生H＋梯度H＋濃度差,核心考點歸納整合,,,,三、坐標(biāo)直方圖型第一步看清楚縱、橫坐標(biāo)軸的含義以及坐標(biāo)系中直方圖所代表的意義，即分析直方圖所蘊含的生物學(xué)信息。第二步認(rèn)真分析、對比各變量之間的關(guān)系，找出各變量之間的內(nèi)在聯(lián)系。第三步結(jié)合相關(guān)的生物學(xué)知識做進(jìn)一步的推理分析，并進(jìn)行圖文轉(zhuǎn)化，正確作答。,核心考點歸納整合,,,,?跟蹤訓(xùn)練10．在黃瓜冬、春季生產(chǎn)中，由于光照弱，連陰天較多，溫室大棚內(nèi)易形成弱光環(huán)境。研究人員研究了含水量對黃瓜弱光光合適應(yīng)性的影響，獲得如下結(jié)果。,核心考點歸納整合,,,,請回答1選取長勢一致的________黃瓜品種的健壯幼苗若干株，分成________組分別進(jìn)行不同處理。為了保證各水分處理始終保持試驗要求，要每日補水，補水時需要進(jìn)行________。,核心考點歸納整合,,,,220天后，測定各項指標(biāo)測定____________________的含量時，需使用酒精作為溶劑。3在弱光條件下________對于吸收光能有更大的作用，C5最大再生速率下降的原因是_________________________________________________________________________________________。4實驗結(jié)果表明，在弱光條件下，可以通過__________________方法提高溫室大棚內(nèi)黃瓜的光合效率，其可能的原因是弱光時蒸騰作用較弱，水分過多會抑制______________________從而影響光合作用。,核心考點歸納整合,解析1由題目信息可知，應(yīng)選擇耐弱光黃瓜幼苗，分成4組進(jìn)行實驗。2葉綠素A、葉綠素B易溶于有機溶劑中，故測定葉綠素A、葉綠素B的含量時，需使用酒精作為溶劑。3由表格信息可知，在弱光條件下葉綠素B對于吸收光能有更大的作用。C5最大再生速率下降的原因是弱光下光反應(yīng)弱，生成的ATP和H不足。4弱光下，含水量低的植物光合作用比較強，故可通過適當(dāng)減少澆水提高溫室大棚內(nèi)黃瓜的光合效率，水分過多會抑制根細(xì)胞的呼吸作用從而影響光合作用。,核心考點歸納整合,答案1耐弱光四稱重2葉綠素A、葉綠素B3葉綠素B光反應(yīng)生成的ATP和H不足4適當(dāng)減少澆水根細(xì)胞的呼吸作用,核心考點歸納整合,11．2014深圳外國語學(xué)校月考同位素標(biāo)記法在生物學(xué)實驗中使用廣泛，下列哪組實驗最適于研究分泌蛋白的合成和分泌的過程B,核心考點歸納整合,解析研究分泌蛋白的合成和分泌的過程，應(yīng)標(biāo)記原料氨基酸，所以A錯誤；唾液腺細(xì)胞的分泌物為唾液淀粉酶，屬于蛋白質(zhì)，B正確；汗腺細(xì)胞的分泌物汗液不含蛋白質(zhì)成分，C錯誤；性腺細(xì)胞分泌性激素是固醇類不含蛋白質(zhì)成分，D錯誤。,,

簡介：第14章同位素標(biāo)記技術(shù)在分子生物學(xué)實驗中的應(yīng)用,中國農(nóng)業(yè)大學(xué)齊孟文,標(biāo)記探針,探針（PROBLE帶有檢測標(biāo)記的，與被檢測目標(biāo)物分子具有特異性互補反應(yīng)性能的探測物分子或分子片斷。探針類別核酸探針DNA、RNA探針非核酸探針，抗體、蛋白質(zhì)分子標(biāo)簽等,,核酸探針,標(biāo)記類別,標(biāo)記核素,標(biāo)記單體,摻入DNA探針的常用單體標(biāo)記化合物?32PDATP，?32PDCTP，?32PUTP，?32PATP。國內(nèi)供應(yīng)商北京福瑞國外供應(yīng)商UK,標(biāo)記單體,在分子克隆操作中用于標(biāo)記核酸分子的標(biāo)記物主要是放射性同位素，如32P，33P和35S。在摻入核苷酸的標(biāo)記過程中，只有三磷酸核苷酸的Α位磷酸整合到核酸鏈中，因此使用Α位磷酸被標(biāo)記的三磷酸核苷酸，如Α32PDATP。而在標(biāo)記5末端磷酸基團(tuán)的反應(yīng)中一般使用Γ位磷酸被標(biāo)記的ATP。放射性的信號通過X光片放射自顯影或磷屏掃描獲取。,核酸探針標(biāo)記法,1雙鏈DNA探針⑴切口平移法首先用DNAASEI在探針DNA雙鏈上造成缺口，然后借助于ECOLIDNA聚合酶I的5→3外切酶活性，切去帶有5磷酸的核苷酸；同時利用該酶5→3聚合酶活性，使同位素標(biāo)記的互補核苷酸補入缺口。這兩種活性同時作用，缺口不斷向3方向移動，DNA鏈上的核苷酸不斷為標(biāo)記的核苷酸取代，成為帶有標(biāo)記的DNA，純化除去游離脫氧核苷酸后成為標(biāo)記DNA探針。最合適的切口平移片段一般為50500個核苷酸,產(chǎn)生均勻標(biāo)記的探針。切口平移反應(yīng)受幾種因素的影響A產(chǎn)物的比活性取決于Α32PDNTP的比活性和模板中核苷酸被置換的程度。BDNA酶Ⅰ的用量和ECOLIDNA聚合酶的質(zhì)量會影響產(chǎn)物片段的大小。CDNA模板中的抑制物如瓊脂糖會抑制酶的活性,故應(yīng)使用仔細(xì)純化后的DNA。,,,切口平移法,2隨機引物法通過熱變性使模板DNA變?yōu)閱捂淒NA，隨機引物與單鏈DNA退火后，利用KLENOWFRAGMENT合成互補鏈。此時如果底物中DNTP的一種或幾種被Α32P,Α35S,3H等標(biāo)記時，那么合成的互補鏈DNA也被標(biāo)記。合成后的雙鏈DNA通過熱變性變成單鏈后即可用作雜交探針。,,隨機引物法,DNA標(biāo)記法比較,2單鏈DNA探針,⑴從M13載體衍生序列合成單鏈DNA探針M13噬菌體是一種單鏈DNA噬菌體，但它在感染宿主（大腸桿菌）后，在菌體細(xì)胞內(nèi)復(fù)制成為雙鏈并繁殖，又以單鏈形式透出菌體，再度感染新的宿主菌。將模板序列克隆到M13噬菌體,以特定的同用引物或人工合成寡合苷酸為引物，在?32PDNTP存在下，由KLENOW片斷酶促合成標(biāo)記探針，反應(yīng)完畢后，酶切長短不一的產(chǎn)物，然后通過變性凝膠電泳與模板分離。,,⑵從RNA合成單鏈CDNA探針用RNA為模板合成CDNA探針?biāo)玫囊镉袃煞NA寡聚DT為引物合成CDNA探針。本方法只能用于帶POLYA的MRNA,并且產(chǎn)生的探針極大多數(shù)偏向于MRNA3‘末端序列。B可用隨機引物合成CDNA探針。該法可避免上述缺點,產(chǎn)生比活性較高的探針。但由于模板RNA中通常含有多種不同的RNA分子,所得探針的序列往往比以克隆DNA為模板所得的探針復(fù)雜得多,應(yīng)預(yù)先盡量富集MRNA中的目的序列。反轉(zhuǎn)錄得到的產(chǎn)物RNA/DNA雜交雙鏈經(jīng)堿變性后,RNA單鏈可被迅速地降解成小片段,經(jīng)SEPHADEXG50柱層析即可得到單鏈探針。,3寡核苷酸探針,若只知道待分離的目的基因編碼的蛋白質(zhì)產(chǎn)物，而對其核苷酸序列一無所知，即可設(shè)計合成寡核苷酸探針。利用寡核苷酸探針可檢測到靶基因上單個核苷酸的點突變。單一已知序列的寡核苷酸探針種類許多兼并性寡核苷酸探針組成的寡核苷酸探針庫,,4RNA探針,許多載體如PBLUESCRIPT,PGEM等均帶有來自噬菌體SP6或ECOLI噬菌體T7或T3的啟動子,它們能特異性地被各自噬菌體編碼的依賴于DNA的RNA聚合酶所識別,合成特異性的RNA。在反應(yīng)體系中若加入經(jīng)標(biāo)記的DNTP，則可合成RNA探針。RNA探針一般都是單鏈,它具有單鏈DNA探針的優(yōu)點,又具有許多DNA單鏈探針?biāo)鶝]有的優(yōu)點，主要是RNADNA雜交體比DNADNA雜交體有更高的穩(wěn)定性,所以在雜交反應(yīng)中RNA探針比相同比活性的DNA探針?biāo)a(chǎn)生信號要強。RNARNA雜交體用RNA酶A酶切比S1酶切DNARNA雜交體容易控制,所以用RNA探針進(jìn)行RNA結(jié)構(gòu)分析比用DNA探針效果。,5末端標(biāo)記,（1）一種是在5末端加成標(biāo)記法先用堿性磷酸酶（AP）去掉DSDNA5磷酸，再用T4多核苷酸激酶催化標(biāo)記的ATP轉(zhuǎn)移加到DNA片段5OH上。（2）在探針3末端用末端轉(zhuǎn)移酶摻入一個單標(biāo)記的DDUTP。,6PCR擴增標(biāo)記,在PCR擴增時加入標(biāo)記的DNTP，不僅能對探針DNA進(jìn)行標(biāo)記還可進(jìn)行大量擴增，尤其適合于探針DNA濃度很低的情形。,標(biāo)記一般流程,,核酸分子雜交,互補的核苷酸序列通過WALSONCRICK堿基配對形成穩(wěn)定的雜合雙鏈分子DNA分子的過程稱為雜交。雜交過程是高度特異性的,可以根據(jù)所使用的探針已知序列進(jìn)行特異性的靶序列檢測。,雜交類型,SOUTHERN雜交,DNA片段經(jīng)電泳分離后,從凝膠中轉(zhuǎn)移到硝酸纖維素濾膜或尼龍膜上,然后與探針雜交。被檢對象為DNA,探針為DNA或RNA。SOUTHERN雜交可用來檢測經(jīng)限制性內(nèi)切酶切割后的DNA片段中是否存在與探針同源的序列,它包括下列步驟1酶切DNA,凝膠電泳分離各酶切片段,然后使DNA原位變性。2將DNA片段轉(zhuǎn)移到固體支持物硝酸纖維素濾膜或尼龍膜上。3預(yù)雜交濾膜,掩蓋濾膜上非特異性位點。4讓探針與同源DNA片段雜交,然后漂洗除去非特異性結(jié)合的探針。5通過顯影檢查目的DNA所在的位置。,檢測靈敏SOUTHERN雜交能很靈敏地檢測出低于01PG與32P標(biāo)記的高比活性探針的109CPM/ΜG互補DNA。如果將10ΜG基因組DNA轉(zhuǎn)移到濾膜上，并與長度為幾百個核苷酸的探針雜交,曝光過夜,則可檢測出哺乳動物基因組中1KB大小的單拷貝序列。,,帶有DNA片段的凝膠,,SOUTHERN印跡雜交的技術(shù)流程,,電泳示意圖,凝膠電泳,轉(zhuǎn)印方法1毛細(xì)管虹吸優(yōu)點是簡單,不需要用其他儀器。缺點是轉(zhuǎn)移時間較長,轉(zhuǎn)移后雜交信號較弱。2電泳轉(zhuǎn)印將DNA變性后,經(jīng)電泳印移至帶電荷的尼龍膜上。優(yōu)點是可直接轉(zhuǎn)移較大的DNA片段，缺點是轉(zhuǎn)移中電流較大,溫度難以控制。通常只有當(dāng)毛細(xì)管和真空轉(zhuǎn)移無效時,才予以采用。3真空轉(zhuǎn)移一般是將硝酸纖維素膜或尼龍膜放在真空室上面的多孔屏上,再將凝膠置于濾膜上,緩沖液從上面的一個貯液槽中流下,洗脫出凝膠中的DNA,使其沉積在濾膜上。該法的優(yōu)點是快速,在30分鐘內(nèi)就能從正常厚度45MM和正常瓊脂糖濃度1的凝膠中定量地轉(zhuǎn)移出來。轉(zhuǎn)移后得到的雜交信號比SOUTHERN轉(zhuǎn)移強23倍。缺點是如不小心，會使凝膠碎裂,在洗膜不嚴(yán)格時,其背景比毛細(xì)管法的要高。,,虹吸印跡,,分子雜交爐,雜交過程,,成像觀測,放射性自顯影利用標(biāo)記核素自身的放射性射線使感光材料感光成象的過程。目前常用的方法有傳統(tǒng)的膠片自顯影感光屏醫(yī)用X光片；原理爆光過程，射線粒子使X光片乳膠基質(zhì)中均勻分布的溴化銀晶粒感光形成物點的潛影，然后經(jīng)顯影及定影得像圖。膠片影象可在底片上直接觀察。,,X光自顯影暗盒及圖像增強屏,,成像觀測,儲存磷光屏（STORAGEPHOSPHORSCREEN）一種由磷光晶體制成的影像屏（IMAGINGPLATE。經(jīng)射線爆光后IP以潛能儲存射線能，當(dāng)在讀取裝置下掃描讀取時，IP在掃描激光下釋放潛能發(fā)出藍(lán)綠光，光強與爆光時射線強度成正比，用光電傳感器轉(zhuǎn)換電信號，再經(jīng)模數(shù)轉(zhuǎn)換成二進(jìn)制編碼信號，由計算機成象系統(tǒng)合成為影象圖。操作用塑料薄膜蓋電泳凝膠，貼附于裝于暗盒的磷光屏曝光，然后在成像儀上，通過掃描磷光屏上儲存的光能進(jìn)行成象。,,UVI化學(xué)發(fā)光凝膠成像系統(tǒng),與著名的MOLECULARDYNAMICSTMPHOSPHORIMAGERTM系統(tǒng)是一樣，臺風(fēng)儲磷技術(shù)磷屏TYPHOON9000系列能對所有電離輻射源提供高分辨率圖像并精確定量3H32P14C33P125I35S18F99MTC大成像面積，高分辯光學(xué)系統(tǒng)和靈敏的磷屏組合，為您提供可靠的實驗結(jié)果。下圖給出的是用32P標(biāo)記的ATLASTM微陣列MACROARRAY在GP屏上的圖像。,,成像觀測,閃爍光纖屏由塑料光纖制成的板，光纖中填有鉛和發(fā)光染料，使射線能轉(zhuǎn)換為可見光光子，然后再由電荷耦合器件CCD攝像機成像。較膠片和磷光屏的分辨率好，近實時成像且需曝光量低。,成像觀測,放射性薄層掃描儀由空間位置靈敏探測器組成核探測儀器?？捎糜诒訉游霭?、凝膠電泳轉(zhuǎn)印膜上放射性條帶的直接定位測定。,美國的BIOSCAN公司AR2000圖像掃描儀,AR2000圖像掃描儀可對所有類型同位素（包括3H）標(biāo)記的TLC板、凝膠、印跡進(jìn)行直接定位定量計數(shù)測量。掃描儀采用充氣式計數(shù)器，可檢測Γ和Β射線的同位素。對整塊薄層層析條帶的掃描可在1分鐘內(nèi)完成。整套系統(tǒng)包括一個儀器控制和數(shù)據(jù)采集軟件，掃描結(jié)果以層析圖或2D圖像顯示，自動完成對峰的定量，并以多種方式顯示結(jié)果。應(yīng)用于TLC板、凝膠和印跡不需破壞TLC板即可進(jìn)行定量對所有類型同位素（包括3H）靈敏簡單易用的WINSCAN軟件快速、自動、可靠的運行提供出色的空間分辨率針對1、2、3塊TLC板可選擇不同的型號2D彩色圖像主要應(yīng)用于放射化學(xué)純度、脂類生物化學(xué)、代謝研究、酶分析、毒理學(xué)研究等領(lǐng)域。,,瑞士卡瑪產(chǎn)地德國,同位素薄層掃描儀技術(shù)參數(shù)掃描面積為400200MM（GITA,RITA）50200MMMINIGITA,MINIRITA掃描速度可選軌道數(shù)目180檢測器ΓRADIATIONBGODETECTOR，?RADIATIONGMCOUNTINGTUBE，GASFLOW檢測能量范圍02000KEV可檢測的放射物ΓRADIATIONBGOSCINTILLATIONPROBE背景129I07CPS20100KEV靈敏度129I20BQIN10MIN分辨率129I23MMDEPENDINGONTHEUSEDCOLLIMATOR可檢測的放射物?RADIATIONOPENPROPORTIONALCOUNTINGTUBERECOMMENDEDFOR3HREQUIRESCOUNTINGGASP1090AR10CH4背景18F01CPS靈敏度18F10BQIN10MIN分辨率18F12MM,防護(hù)措施,,,INSPECTOR,NORTHERN雜交,NORTHERN雜交與SOUTHERN雜交很相似,主要區(qū)別是被檢測對象為RNA,其電泳在變性條件下進(jìn)行,以去除RNA中的二級結(jié)構(gòu),保證RNA完全按分子大小分離。變性劑主要有3種乙二醛，甲醛，羥甲基汞。電泳后的瓊脂糖凝膠用與SOUTHERN轉(zhuǎn)移相同的方法將RNA轉(zhuǎn)移到硝酸纖維素濾膜上,然后與探針雜交。,菌落原位雜交,對分散在若干個瓊脂平板上的少數(shù)菌落（100200）進(jìn)行克隆篩選時，可采用本方法。將這些菌落歸并到一個瓊脂主平板以及已置于第二個瓊脂平板表面的一張硝酸纖維素濾膜上。經(jīng)培養(yǎng)一段時間后，對菌落進(jìn)行原位裂解。主平板應(yīng)貯存于4℃直至得到篩選結(jié)果。,,菌落原位雜交,,斑點雜交,斑點雜交是指將DNA或RNA樣品直接點在硝酸纖維素濾膜上,然后與核酸探針分子雜交，以顯示樣品中是否存在特異的DNA或RNA。同一種樣品經(jīng)不同倍數(shù)的稀釋,還可以得到半定量的結(jié)果。所以它是一種簡便、快速、經(jīng)濟的分析DNA或RNA的方法,在基因分析和基因診斷中經(jīng)常用到,是研究基因表達(dá)的有力工具。但由于目的序列未與非目的序列分離,不能了解目的序列的長度。尤其當(dāng)本底干擾較高時,難以區(qū)分目的序列信號和干擾信號。,,DNA序列分析,SANGER雙脫氧鏈終止法CAMBRIDGE的FSANGER于1977年發(fā)明?；驹恝貲NA聚合酶能夠以單鏈DNA作為模板，準(zhǔn)確合成的DNA互補鏈；②該酶能夠用2，3雙脫氧核苷三磷酸作底物并將其聚合到新生寡核苷酸鏈的3末端，從而終止其延伸反應(yīng)。在DNA測序反應(yīng)中，加入模板DNA，引物（特異性引物，如T7，T3，M13等），DNA聚合酶，DA，DT，DG，DC和一種DDNTP。常用KLENOW大片段，無5→3外切酶活性。,,DNA序列分析,MAXAMGILBERT化學(xué)修飾法哈佛大學(xué)對一個末端標(biāo)記的DNA片段，用化學(xué)試劑在A、G、C、T處特定地裂解DNA片段。把反應(yīng)分為四組，每一組反應(yīng)特異性地針對某一種或某一類堿基，并且要保證每個DNA分子平均只有一個靶堿基被修飾，這樣，在每一組反應(yīng)中都在同一個或兩個核苷酸處DNA鏈發(fā)生斷裂，由于堿基位置不同，就會產(chǎn)生一組不同長度的DNA片段。最后，經(jīng)過變性聚丙烯酰胺凝膠電泳分離，放射自顯影后就可讀出待測DNA的核苷酸序列。,化學(xué)修飾法,,MAXAMGILBERT法所用的化學(xué)修飾技術(shù),DNA序列分析,DNA序列分析自動化用四甲基若丹明TETRAMETHYLRHODAMINE作為熒光劑標(biāo)記DNA引物，帶有這種引物的DNA片段能在激光誘導(dǎo)下發(fā)出熒光。按照標(biāo)準(zhǔn)的雙脫氧終止法或化學(xué)終止法進(jìn)行測序反應(yīng)，跑DNA凝膠后用計算機檢測。,,熒光標(biāo)記物,,,,,,DDGTP,DDATP,DDTTP,DDCTP,,,,,,,,,,,,,單泳道電泳及信號收集,,,,,,,,,正極,負(fù)極,,,,,,,,,,計算機排序,5ˊ,GSFLX系統(tǒng)超高通量測序技術(shù)原理GSFLX系統(tǒng)的測序原理和GS20一樣，也是一種依靠生物發(fā)光進(jìn)行DNA序列分析的新技術(shù)在DNA聚合酶，ATP硫酸化酶，熒光素酶和雙磷酸酶的協(xié)同作用下，將引物上每一個DNTP的聚合與一次熒光信號釋放偶聯(lián)起來圖1。通過檢測熒光信號釋放的有無和強度，就可以達(dá)到實時測定DNA序列的目的。此技術(shù)不需要熒光標(biāo)記的引物或核酸探針，也不需要進(jìn)行電泳；具有分析結(jié)果快速、準(zhǔn)確、靈敏度高和自動化的特點。,GSFLX系統(tǒng)的操作過程GSFLX系統(tǒng)提供了完整的從樣品制備到后續(xù)的生物信息學(xué)分析解決方案。1）樣品種類GSFLX系統(tǒng)支持各種不同來源的樣品序列測定包括基因組DNA，PCR產(chǎn)物，BAC，CDNA，小分子RNA等等。2）樣品DNA打斷樣品例如基因組DNA或者BAC等被打斷成300－800BP的片段；對于小分子的非編碼RNA，這一步驟則不需要。短的PCR產(chǎn)物則可以利用GS融合引物進(jìn)行擴增后直接進(jìn)行步驟4的工作。3）銜接子連接借助一系列標(biāo)準(zhǔn)的分子生物學(xué)技術(shù)，將A和B接頭（3’和5’端具有特異性）連接到DN段上。接頭也將在后繼的純化，擴增和測序步驟中用到。圖中僅僅顯示了后續(xù)步驟中要用到的單鏈的DN段。,GSFLX系統(tǒng)的操作過程4）一條DNA片段＝一個磁珠接頭使成百上千條DN段結(jié)合到它們自己唯一的磁珠上，此磁珠被單個油水混合小滴包被后，在這個小滴里進(jìn)行獨立的擴增，而沒有其他的競爭性或者污染性序列的影響；整個DN段進(jìn)行平行擴增。5）一個磁珠＝一條讀長經(jīng)過PCR擴增后，每個磁珠上的DN段擁有了成千上萬個相同的拷貝。經(jīng)過富集以后，這些片段仍然和磁珠結(jié)合在一起，隨后就可以放入到PICOTITERPLATE板中供后繼測序使用了。6）數(shù)據(jù)讀取和分析工具GSFLX系統(tǒng)在75小時的運行當(dāng)中可獲得40多萬個讀長，讀取超過1億個堿基信息。GSFLX系統(tǒng)提供三種不同的生物信息學(xué)工具對測序數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，適用于不同的應(yīng)用例如多達(dá)3GB序列的重測序，對比已知參考序列進(jìn)行的擴增產(chǎn)物差異分析，及120MB的從頭測序工作等。,,備注,焦磷酸測序PYROSEQUENEING是通過核苷酸和模板結(jié)合后釋放的焦磷酸引發(fā)酶級聯(lián)反應(yīng)，促使熒光素發(fā)光并進(jìn)行檢測的測序技術(shù)。既可進(jìn)行DNA序列分析，又可進(jìn)行基于序列分析的單核昔酸多態(tài)性SINGLE年NUELEOTIDEPOLYMOHISM，SNP檢測及等位基因頻率測定。焦磷酸測序是由DNA聚合酶DNAPOLYMERASE、三磷酸腺酰硫酸化酶ATPSULFURYLASE、熒光素酶LUCIFERASE和雙磷酸酶APYRASE4種酶催化同一反應(yīng)體系的酶級聯(lián)化學(xué)發(fā)光反應(yīng)，反應(yīng)底物為5’磷酰硫酸ADENOSINES5’PHOSPHOSUIFATE，ASP）,,備注,和熒光素。反應(yīng)體系還包括待測序DNA單鏈和測序引物。在每一輪測序反應(yīng)中，加人1種DNTP，若該DNTP與模板配對，聚合酶就可以將其摻人到引物鏈中并釋放出等摩爾數(shù)的焦磷酸基團(tuán)PPI。硫酸化酶催化APS和PPI形成ATP，后者驅(qū)動熒光素酶介導(dǎo)的熒光素向氧化熒光素的轉(zhuǎn)化，發(fā)出與ATP量成正比的可見光信號，并由PYROGRAMMT轉(zhuǎn)化為一個峰值，其高度與反應(yīng)中摻入的核苷酸數(shù)目成正比。根據(jù)加人DNTP類型和熒光信號強度就可實時記錄模板DNA的核昔酸序列。,DNA序列分析,DNA雜交測序法SBHSEQUENCINGBYHYBRIDIZATION如果一段較短的DNA探針能與較長的DNA片段雜交，并形成完全的雙鏈結(jié)構(gòu)，則可認(rèn)為靶DNA上存在著相應(yīng)的互補序列，這就是DNA雜交測序法的基本原理。如果將一種12MER的靶DNA與完全隨機合成的8MER寡核苷酸探針混合雜交，在總數(shù)為4865536種8MER的探針群體中，僅有5種探針會與靶DNA雜交，形成完全互補的雙鏈分子。,DNA雜交測序法,SBH的應(yīng)用①可有效檢測靶DNA中的單堿基突變；②可用于不同DNA片段之間的序列比較；③可用于檢測不同生長發(fā)育狀態(tài)下細(xì)胞中特定基因的表達(dá)狀況；④可用于檢驗傳統(tǒng)測序技術(shù)的準(zhǔn)確性。,蛋白質(zhì)研究技術(shù),WESTERN免疫印跡將蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)移到膜上，然后利用抗體進(jìn)行檢測。對已知表達(dá)蛋白，可用相應(yīng)抗體作為一抗進(jìn)行檢測，對新基因的表達(dá)產(chǎn)物，可通過融合部分的抗體檢測。WESTERNBLOT采用的是聚丙烯酰胺凝膠電泳，被檢測物是蛋白質(zhì)，“探針”是抗體。經(jīng)過PAGE分離的蛋白質(zhì)樣品，轉(zhuǎn)移到固相載體（如硝酸纖維素膜）上，固相載體以非共價鍵形式吸附蛋白質(zhì)，且保持電泳分離的多肽類型及其生物學(xué)活性不變。以固相載體上的蛋白質(zhì)或多肽作為抗原，與對應(yīng)的抗體起免疫反應(yīng)，再與酶或同位素標(biāo)記的第二抗體起反應(yīng)，經(jīng)過底物顯色或放射自顯影以檢測電泳分離的特異性目的基因表達(dá)的蛋白成分。該技術(shù)也廣泛應(yīng)用于檢測蛋白水平的表達(dá)。,,WB,,PCR應(yīng)用,1PCR技術(shù)的原理無細(xì)胞克隆法以擬擴增的DNA片段為模板，一對分別與模板互補的寡核苷酸為引物，在4種脫氧核苷酸（DNTP）存在下，由DNA聚合酶在引物所結(jié)合的位置向3’方向合成新的互補鏈。其反應(yīng)以雙鏈DNA的變性、退火、延伸為一個循環(huán)。經(jīng)過多次循環(huán)（2530次），便目標(biāo)DNA片段得以大量擴增。由于每一次循環(huán)所產(chǎn)生的新鏈均可成為新的模板用于下一輪循環(huán)，故PCR產(chǎn)物以指數(shù)方式增加。,MULLIS的PCR構(gòu)思,,,預(yù)變性9395?C,25M,變性9395?C,30S,復(fù)性5070?C,30S,延伸75?C,3060S,總延伸75?C,7M,,,,,,2535,PCR的一般過程,經(jīng)過30次的循環(huán),擴增的DNA片段可達(dá)100萬倍以上。,PCR技術(shù)的原理,PCR步驟（1）高溫變性，雙鏈DNA變性（90～95℃）成為單鏈；（2）低溫退火（3760℃），引物與單鏈DNA互補序列結(jié)合；（3）適溫延伸，DNA聚合酶催化（7075℃）使引物延伸。（4）重復(fù)（1）（3）步。,PCR技術(shù)的原理,實驗材料、儀器和試劑1材料含1KB插入片段的克隆載體PMD18T質(zhì)粒DNA2儀器微量移液器及吸頭、PCR儀及PCR管瓊脂糖凝膠電泳設(shè)備3試劑10XPCR反應(yīng)緩沖液25MMOL/LMGCL210MMOL/LDNTP10ΜMOL/L引物1和引物2,PCR操作步驟,1按照如下體積向PCR管中按順序加入各試劑并混勻10XPCR反應(yīng)緩沖液25ΜL25MMOL/LMGCL220ΜL10MMOL/LDNTP10ΜL10ΜMOL/L引物110ΜL10ΜMOL/L引物210ΜL質(zhì)粒DNA10ΜLTAQ01ΜL5U水補充至250ΜL,2PCR循環(huán),,PCR儀,,3反應(yīng)完成后,將反應(yīng)液與凝膠電泳緩沖液按比例混勻,上樣電泳。,PCR操作步驟,,,,PCR應(yīng)用,,PCR應(yīng)用,2與標(biāo)記相結(jié)合的應(yīng)用LPPCRLABELLEDPRIMERS利用同位素、熒光素等對PCR引物進(jìn)行標(biāo)記，可用以直觀的檢測目的基因，特別適合于臨床基因診斷，同時可以檢測多種基因成分。,PCR應(yīng)用,2與標(biāo)記相接合的應(yīng)用原位PCRISPCR以整個細(xì)胞作為反應(yīng)體系，對目的基因進(jìn)行擴增，然后通過原位雜交等不破壞細(xì)胞結(jié)構(gòu)的方法進(jìn)行檢測的方法。其檢測標(biāo)本一般為細(xì)胞涂片或組織切片，適合低拷貝靶序列的檢測。可用于細(xì)胞內(nèi)的病毒感染、基因重排，以及基因表達(dá)的檢測。,

簡介：微生物學(xué)檢驗一選擇題1用來測量細(xì)菌大小的單位是ACMBMMCUMDNM2細(xì)菌缺乏下列哪一種結(jié)構(gòu)仍可存活（）A細(xì)胞壁B細(xì)胞核C細(xì)胞質(zhì)D核3抗毒素（）A為外毒素經(jīng)甲醛處理后獲得B可中和游離外毒素性作用C可中和與易感細(xì)胞結(jié)合的外毒素的毒性作用D由細(xì)菌內(nèi)毒素刺激機體產(chǎn)生4關(guān)于病毒核酸（）A可控制病毒的遺傳和變異B決定病毒包膜所有成分的形成CRNA不能攜帶遺傳信息D不能決定病毒的感染性5病毒的致病因素（）A內(nèi)毒素B外毒素C莢膜D以上都不是6對外界抵抗力最強的細(xì)菌結(jié)構(gòu)（）A細(xì)胞壁B莢膜C芽孢D核質(zhì)7L型細(xì)菌特性（）A需用低滲含血清培養(yǎng)基B對青霉素敏感C細(xì)胞膜缺乏D細(xì)胞壁缺損A喹諾酮類B大環(huán)內(nèi)脂類C糖肽類D頭孢菌素類16下列屬于殺菌劑的抗生素是（）A羅紅霉素B卡那霉素C米諾環(huán)素D克林霉素17不能抑制Β內(nèi)酰胺酶的制劑是（）A他唑巴坦B克拉維酸C舒巴坦D呋喃唑坦18在Β內(nèi)酰胺類抗生素中，具有單環(huán)的抗生素為（）A氨曲南B美洛培南C氨芐青霉素D頭孢匹胺19細(xì)菌耐藥機制不包括（）A產(chǎn)生鈍化酶和滅活酶B青霉素結(jié)合蛋白改變C藥物濃度的改變C藥物作用靶位的改變20下列選項中不屬于膜耐藥范疇的是（）APBP突變B膜通透性降低C藥物濃度的改變D藥物作用靶位的改變21屬于Β內(nèi)酰胺酶的是（）A氨基糖苷類B紅霉素酶C頭孢菌素酶D拓?fù)洚惤Y(jié)構(gòu)22加入某種化學(xué)成分以抑制某些細(xì)菌的生長而有助于需要的細(xì)菌生長的培養(yǎng)基稱為（）A基礎(chǔ)培養(yǎng)基B鑒別培養(yǎng)基

簡介：臨床執(zhí)業(yè)醫(yī)師微生物學(xué)模擬習(xí)題及答臨床執(zhí)業(yè)醫(yī)師微生物學(xué)模擬習(xí)題及答案A型題1甲型肝炎病毒屬于A腸道病毒70型B腸道病毒72型C腺病毒8型D皰疹病毒6型EECHO病毒A形態(tài)B大小C結(jié)構(gòu)D對熱的抵抗力E目前無法細(xì)胞培養(yǎng)4HAV隨糞便排出體外最主要的時間是A感染后1周內(nèi)

簡介：臨床助理醫(yī)師微生物學(xué)模擬習(xí)題臨床助理醫(yī)師微生物學(xué)模擬習(xí)題41、維生素D3的活性形式是A2425H2D3B125H2D3C24OHD3D1H3E25HD342、哺乳類動物體內(nèi)氨的主要去路是B氫氯噻嗪C呋塞米D氨苯蝶啶E甘露醇44、65歲以上單純主動脈瓣狹窄的常見病因是A單純主動脈瓣狹窄B風(fēng)濕性瓣膜病C二葉式主動脈瓣鈣化

簡介：臨床執(zhí)業(yè)醫(yī)師微生物學(xué)模擬習(xí)題臨床執(zhí)業(yè)醫(yī)師微生物學(xué)模擬習(xí)題A型題1流行性乙型腦炎病毒的傳染源是A幼豬B三帶喙庫蚊C虱D蜱E螨A野生動物B蜱C病人D螨E豬4預(yù)防乙腦的關(guān)鍵是A防蚊滅蚊B易感人群普遍接種疫苗

簡介：臨床執(zhí)業(yè)醫(yī)師微生物學(xué)練習(xí)題臨床執(zhí)業(yè)醫(yī)師微生物學(xué)練習(xí)題A型題1下列哪種結(jié)構(gòu)與細(xì)菌侵襲力有關(guān)A芽胞B莢膜C細(xì)胞壁D中介體E核糖體A由活菌釋放到菌體外的一種蛋白質(zhì)C主要由革蘭陽性菌產(chǎn)生，少數(shù)革蘭陰性菌也能產(chǎn)生E性質(zhì)穩(wěn)定，耐熱F毒力強G抗原性強4能引起內(nèi)毒素休克的細(xì)菌成分是AH抗原BO抗原

簡介：臨床執(zhí)業(yè)醫(yī)師微生物學(xué)習(xí)題及答案臨床執(zhí)業(yè)醫(yī)師微生物學(xué)習(xí)題及答案A型題1流行性感冒的病原體是A流感病毒B流感桿菌C鼻病毒D呼吸道合胞病毒E腦膜炎病毒2引起急性呼吸道感染的主要病原體是A細(xì)菌B真菌C病毒D衣原體E螺旋體3呼吸道病毒是指A以呼吸道為傳播途徑的病毒B引起呼吸道局部病變C主要以呼吸道為入侵門戶，進(jìn)入血流引起全身癥狀的病毒D主要以呼吸道為入侵門戶，引起呼吸道局部病變而不引起全身癥狀的病毒E主要以呼吸道為入侵門戶，引起呼吸道局部病變或伴有全身癥狀的病毒D脂質(zhì)雙層ELPS8流感病毒在細(xì)胞內(nèi)增殖的檢測指標(biāo)通常是ACPEB紅細(xì)胞凝集或吸附試驗C蝕斑測定D干擾現(xiàn)象E包涵體9下列哪組病毒主要經(jīng)呼吸道傳播A流感病毒、呼吸道合胞病毒、柯薩基病毒B流感病毒、麻疹病毒、脊髓灰質(zhì)炎病毒C風(fēng)疹病毒、鼻病毒、腺病毒D呼吸道合胞病毒、流感病毒、甲型肝炎病毒E腮腺炎病毒、乙型肝炎病毒、流感病毒10普通感冒的主要病原體是A流感病毒B副流感病毒C腺病毒D鼻病毒E呼吸道病毒參考答案1A2C3E4B5C6C

簡介：臨床助理醫(yī)師微生物學(xué)練習(xí)試題臨床助理醫(yī)師微生物學(xué)練習(xí)試題11、滑動疝最易發(fā)生的部位是A臍血管穿過的臍環(huán)B外傷處C愈合不良的手術(shù)切口D小網(wǎng)膜孔E髂窩區(qū)后腹膜與后腹壁結(jié)合處12、無癥狀性菌尿B人腰淋巴結(jié)C人腹股溝淋巴結(jié)D主要人閉孔淋巴結(jié)E人髂總淋巴結(jié)14、食糜進(jìn)人小腸引起胃液分泌的特點是A以胃蛋白酶含量增高為主B胃液的酸度和胃蛋白酶含量均高C以胃液的酸度增高為主

簡介：臨床執(zhí)業(yè)醫(yī)師微生物學(xué)試題臨床執(zhí)業(yè)醫(yī)師微生物學(xué)試題1氣性壞疽易發(fā)生于A合并大腸桿菌感染時B體表、四肢C深在的開放性損傷D腸管、膽囊E子宮、肺2化生不可能發(fā)生于B成纖維細(xì)胞C肌成纖維細(xì)胞D巨噬細(xì)胞E血管內(nèi)皮細(xì)胞4下列哪項不是一期愈合的特點A組織缺損少B創(chuàng)緣整齊C炎癥反應(yīng)輕

簡介：臨床執(zhí)業(yè)醫(yī)師微生物學(xué)模擬題及答案臨床執(zhí)業(yè)醫(yī)師微生物學(xué)模擬題及答案A型題1HSV1主要潛伏部位是A口唇皮膚B唾液腺C脊髓后根神經(jīng)節(jié)D骶神經(jīng)節(jié)E三叉神經(jīng)節(jié)A骶神經(jīng)節(jié)B三叉神經(jīng)節(jié)C頸上神經(jīng)節(jié)D局部淋巴結(jié)E腎4下列疾病的病因，與皰疹病毒無關(guān)的是A粘膜的局部皰疹B先天性感染

簡介：臨床助理醫(yī)師微生物學(xué)模擬試題臨床助理醫(yī)師微生物學(xué)模擬試題21、患者已確診為骨巨細(xì)胞瘤，局部皮膚表淺靜脈怒張，腫脹與壓痛均顯著，觸診有乒乓球樣感覺。X線片骨密質(zhì)已破壞，斷裂。病理報告骨巨細(xì)胞瘤Ⅲ級。治療應(yīng)選擇A刮除骨水泥充填術(shù)B截肢術(shù)C刮除滅活骨水泥充填術(shù)D刮除植骨術(shù)E刮除滅活植骨術(shù)B大腿內(nèi)側(cè)及小腿外側(cè)靜脈曲張C下肢內(nèi)側(cè)和小腿后側(cè)靜脈曲張D大腿內(nèi)、外側(cè)靜脈曲張并向腹壁延伸E全下肢內(nèi)后側(cè)靜脈曲張24、在我國引起慢性腎功能衰竭最常見的原因是A慢性腎盂腎炎BE糖尿病腎病

簡介：臨床執(zhí)業(yè)醫(yī)師微生物學(xué)習(xí)題臨床執(zhí)業(yè)醫(yī)師微生物學(xué)習(xí)題A型題1脊髓灰質(zhì)炎病毒主要侵犯A三叉神經(jīng)節(jié)B腦神經(jīng)節(jié)C脊髓前角運動神經(jīng)細(xì)胞D神經(jīng)肌肉接頭E海馬回錐體細(xì)胞A脊髓灰質(zhì)炎病毒、輪狀病毒、?？刹《?、柯薩奇病毒B腺病毒、流感病毒、脊髓灰質(zhì)炎病毒、埃可病毒C柯薩奇病毒、甲型肝炎病毒、麻疹病毒、EB病毒D冠狀病毒、腮腺炎病毒、?？刹《尽⒖滤_奇病毒EB病毒、埃可病毒、脊髓灰質(zhì)炎病毒、柯薩奇病毒4脊髓灰質(zhì)炎多見于A兒童B青壯年