簡(jiǎn)介：點(diǎn)擊查看更多ULK1激活JNK信號(hào)通路的分子機(jī)制及生物學(xué)功能.pdf精彩內(nèi)容。

簡(jiǎn)介：目的對(duì)來(lái)源于廣西眼鏡蛇毒的神經(jīng)生長(zhǎng)因子NGF蛋白的基因進(jìn)行體外擴(kuò)增、克隆及序列分析，并表達(dá)。研究廣西眼鏡蛇毒神經(jīng)生長(zhǎng)因子誘導(dǎo)人類小涎腺腺樣囊性癌細(xì)胞NACC凋亡的影響。方法采用TRIZOL法從廣西眼鏡蛇毒腺中提取總RNA，經(jīng)RTPCR擴(kuò)增出廣西眼鏡蛇毒中的NGF的CDNA，測(cè)序后與其它來(lái)源的NGF比較同源性；將來(lái)源于廣西眼鏡蛇毒的NGF蛋白的基因克隆至融合表達(dá)載體PET40B中，轉(zhuǎn)化至大腸桿菌BL21DE3中，經(jīng)IPTG誘導(dǎo)表達(dá)出NGF。利用蛋白印跡分析其是否有NGF抗原活性及用PCI2細(xì)胞進(jìn)行生物活力測(cè)定并通過(guò)細(xì)胞計(jì)數(shù)法與天然蛇毒NGF的活性比較。應(yīng)用HE染色觀察細(xì)胞形態(tài)學(xué)改變，流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞凋亡率的變化。結(jié)果廣西眼鏡蛇毒中的NGF可在大腸桿菌中克隆和表達(dá)。DNA軟件分析其有110AMINOACIDS，MOLECULARWEIGHT為1234693DALTONS，等電點(diǎn)為7643。經(jīng)蛋白印跡分析可知其具有NGF抗原活性，PCI2細(xì)胞生物活力測(cè)定結(jié)果顯示經(jīng)純化的融合蛋白具有NGF生物活力，為進(jìn)一步研究NGF的結(jié)構(gòu)和功能關(guān)系提供更多的信息。形態(tài)學(xué)觀察到用藥后的NACC細(xì)胞質(zhì)空泡、核固縮、核染色質(zhì)聚集等形態(tài)學(xué)變化現(xiàn)象。流式細(xì)胞儀檢測(cè)到試驗(yàn)組細(xì)胞凋亡率高于對(duì)照組，說(shuō)明廣西眼鏡蛇毒神經(jīng)生長(zhǎng)因子能誘導(dǎo)NACC細(xì)胞凋亡。

簡(jiǎn)介：南京醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文淋巴增殖性疾病分子生物學(xué)與分子遺傳學(xué)研究姓名張亞平申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別碩士專業(yè)內(nèi)科學(xué)（血液病學(xué)）指導(dǎo)教師李建勇陳麗娟20080612南京醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文論文獨(dú)創(chuàng)性聲明本論文逋巴籃迸酏OD魚(yú)姐叫噬漣』』土遂籃動(dòng)卜是我個(gè)人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作及取得的研究成果。論文中除了特別加以標(biāo)注和致謝的地方外，不包含其他人或機(jī)構(gòu)已經(jīng)發(fā)表或撰寫(xiě)過(guò)的研究成果。其他同志對(duì)本研究的啟發(fā)和所做的貢獻(xiàn)均在論文中作了明確的聲明并表示了謝意。專業(yè)』墜齜作者簽名立牛日期J竺叢虹論文使用授權(quán)聲明本人完全了解南京醫(yī)科大學(xué)有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定，即學(xué)校有權(quán)保留送交論文的復(fù)印件，允許論文被查閱和借閱；學(xué)?？梢怨颊撐牡娜炕虿糠謨?nèi)容，可以采用影印、縮印或其它復(fù)制手段保存論文。保密的論文在解密后遵守此規(guī)定。作者簽名J趨璽產(chǎn)一導(dǎo)師簽名日期型∥，弓

簡(jiǎn)介：外傷后細(xì)菌性致死性肉芽腫FATALBACTERIAGRANULOMAAFTERTRUMAFBGT是一種病程短、致死率高的新疾病21世紀(jì)前還未被皮膚病學(xué)界所認(rèn)識(shí)直至1996年才由西京醫(yī)院皮膚科發(fā)現(xiàn)并命名多個(gè)病人的皮損行透射電鏡檢查發(fā)現(xiàn)炎細(xì)胞內(nèi)外存在類似短桿菌將患者皮損組織行多次嚴(yán)格的細(xì)菌培養(yǎng)發(fā)現(xiàn)致病菌為一種革蘭陽(yáng)性厭氧短桿菌細(xì)菌生化鑒定支持該致病菌為痤瘡丙酸桿菌PROPIONIBACTERIAACNESPACNES或放線菌而API系統(tǒng)鑒定為PACNES并且根據(jù)該致病菌藥敏試驗(yàn)結(jié)果挽救了一例患者1外傷后細(xì)菌性致死性肉芽腫致病菌分子生物學(xué)鑒定2外傷后細(xì)菌性致死性肉芽腫動(dòng)物模型初步構(gòu)建該實(shí)驗(yàn)結(jié)果確認(rèn)FBGT的致病菌是PACNES加深了對(duì)FBGT的認(rèn)識(shí)并利用家兔構(gòu)建成功FBGT的動(dòng)物模型為進(jìn)一步深入研究該病的發(fā)病機(jī)理打下了一定的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)基礎(chǔ)對(duì)構(gòu)建更加完備的動(dòng)物模型有一定啟示

簡(jiǎn)介：腫瘤目前仍是臨床難以治療的疾病之一，對(duì)人類的健康有很大危害，現(xiàn)在臨床治療腫瘤的主要方法是手術(shù)、化療、放療，一方面給病人帶來(lái)生存的希望，同時(shí)也給病人帶來(lái)較大創(chuàng)傷?；?、放療副作用較大，使病人恢復(fù)的較慢，多年來(lái)眾多學(xué)者一直在尋找尋找有效治療惡性腫瘤的藥物，尤其是篩選高效、低毒、低成本的天然藥物，倍受生物學(xué)和醫(yī)學(xué)界的關(guān)注。姬松茸AGRICUSBLAZEIMURILL又名小松菇、柏氏蘑菇、巴西蘑菇，屬擔(dān)子菌亞門(mén)，層菌綱，傘菌目，蘑菇黑傘科，蘑菇黑傘屬。1965年，日裔巴西人古本隆壽將在巴西圣保羅皮埃達(dá)德郊外農(nóng)場(chǎng)草地上采到的一種不知名的美味食用菌送到了日本。日本三重大學(xué)農(nóng)學(xué)部的巖出亥之助教授對(duì)這種無(wú)名菌種進(jìn)行了菌種分離和培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)，并取名為姬松茸，中文為小松口蘑之意。1967年，由比利時(shí)的海涅曼博士鑒定為新種，并命名為，與雙孢蘑菇ABISPUS同屬。此后，開(kāi)始了姬松茸的基礎(chǔ)研究。1975年，日本的室內(nèi)高壟栽培法首次獲得成功，經(jīng)努力改良才確立了現(xiàn)在的大規(guī)模人工栽培方法。1995年中國(guó)科學(xué)院植物所梁凈教授用來(lái)自巴西原始森林的野生菌種在福建栽培成功，命名為國(guó)產(chǎn)姬松茸。多年來(lái)，很多學(xué)者對(duì)姬松茸的有效成分及其藥用價(jià)值進(jìn)行了深入的研究，發(fā)現(xiàn)姬松茸多糖具有抗腫瘤、提高機(jī)體免疫力及抗突變、殺菌作用，還可改善肝臟功能并促進(jìn)造血。因此該物質(zhì)已受到人們的廣泛重視。但是，姬松茸多糖對(duì)哪些腫瘤有抑制作用，尤其是作用的分子機(jī)理是什什么都有待深入研究。關(guān)于姬松茸多糖的抗癌性，國(guó)內(nèi)外學(xué)者主要是用姬松茸粗提物和荷瘤小鼠進(jìn)行研究，而無(wú)人將姬松茸分離純化后的有效成分處理白血病細(xì)胞和胃癌細(xì)胞進(jìn)行抗腫瘤研究。因此，本研究采用噻唑藍(lán)MTT還原法、流式細(xì)胞分析技術(shù)、DNA瓊脂糖凝膠電泳技術(shù)、端粒酶活性測(cè)定、CASPASE3蛋白表達(dá)分析、BCL2蛋白表達(dá)分析及光鏡和透射電鏡觀察等技術(shù)和方法對(duì)AGARICUSBLAZEIMURRILL水溶性多糖提取物FA2BΒ和AZT的誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡，F(xiàn)A2BΒ對(duì)化療藥的增敏作用及其相應(yīng)機(jī)理等進(jìn)行了深入研究。結(jié)果表明1FA2BΒ可明顯抑制體外培養(yǎng)人胃癌MKN45細(xì)胞和人急性早幼粒細(xì)胞性白血病HL60細(xì)胞的增殖。FA2BΒ作用72H對(duì)人胃癌MKN45細(xì)胞的抑制率可達(dá)4944％以上，而對(duì)人急性早幼粒細(xì)胞性白血病HL60細(xì)作用96H抑制率高達(dá)82％AZT可明顯抑制體外培養(yǎng)人胃癌MKN45細(xì)胞的增殖，作用72H后抑制率高達(dá)5637％證明FA2BΒ、AZT具有良好抗癌效果。2實(shí)驗(yàn)首次證明，AZT、FA2BΒ可明顯誘導(dǎo)體外培養(yǎng)人胃癌MKN45細(xì)胞和人急性早幼粒細(xì)胞性白血病HL60細(xì)胞的凋亡。并能改變上述細(xì)胞的細(xì)胞周期時(shí)相分布，使細(xì)胞在G期發(fā)生嚴(yán)重阻滯，這是誘導(dǎo)人胃癌MKN45細(xì)胞和急性早幼粒細(xì)胞性白血病細(xì)胞HL60凋亡的重要分子機(jī)理之一。3本實(shí)驗(yàn)同時(shí)證明，AZT、FA2BΒ可使體外培養(yǎng)人胃癌MKN45細(xì)胞和人急性早幼粒細(xì)胞性白血病HL60細(xì)胞的端粒酶活性明顯降低，這是提取物抑制體外培養(yǎng)人胃癌細(xì)胞和人急性早幼粒細(xì)胞白血病細(xì)胞增殖的又一重要分子機(jī)理。4本研究首次發(fā)現(xiàn)，AZT、FA2BΒ可上調(diào)體外培養(yǎng)人胃癌MKN45細(xì)胞和人急性早幼粒細(xì)胞性白血病HL60細(xì)胞的CASASE3基因表達(dá)水平。這是提取物誘導(dǎo)該細(xì)胞凋亡、細(xì)胞周期改變和細(xì)胞增殖在G1期發(fā)生阻滯的重要分子基礎(chǔ)。5同時(shí)發(fā)現(xiàn)ATT可使體外培養(yǎng)人胃癌MKN45細(xì)胞細(xì)胞的BCL2基因的表達(dá)水平降低，是該細(xì)胞凋亡、細(xì)胞周期改變和細(xì)胞增殖在G1期發(fā)生阻滯的又一重要分子機(jī)制，并與CASPASE3基因表達(dá)的改變相互協(xié)調(diào)、相互促進(jìn)來(lái)誘導(dǎo)體外培養(yǎng)人胃癌MKN45細(xì)胞的凋亡。6本實(shí)驗(yàn)還首次證實(shí)，F(xiàn)A2BΒ聯(lián)合AZT明顯高于單獨(dú)用藥組，F(xiàn)A2BΒ對(duì)AZT具有增效作用。綜上所述，AZT、FA2BΒ對(duì)人胃癌MKN45細(xì)胞和人急性早幼粒細(xì)胞性白血病HL60細(xì)胞的增殖均有明顯抑制作用，可明顯誘導(dǎo)上述惡性腫瘤細(xì)胞的凋亡，使細(xì)胞增殖發(fā)生明顯阻滯；對(duì)惡性腫瘤細(xì)胞凋亡的誘導(dǎo)又與抑制其端粒酶活性、改變CASPASE3和BCL2基因表達(dá)水平有密切關(guān)系。同時(shí)發(fā)現(xiàn)FA2BΒ聯(lián)合AZT明顯高于單獨(dú)用藥組，F(xiàn)A2BΒ對(duì)AZT具有增效作用。研究表明，從國(guó)產(chǎn)姬松茸多糖中分離的RNA蛋白復(fù)合物FA2BΒ本身具有一定的抑制癌細(xì)胞效果，又能減輕化療藥物AZT的毒副作用，對(duì)化療藥物AZT有增效作用，如與化療藥物AZT結(jié)合使用，可能會(huì)在不降低療效的前提下，減少化療藥物AZT的用量，降低其毒副作用。因此FA2BΒ作為化療輔助藥物進(jìn)行開(kāi)發(fā)應(yīng)具有很好的臨床應(yīng)用前景。

簡(jiǎn)介：目前對(duì)胰腺移植手術(shù)后缺乏早期診斷急性排斥反應(yīng)敏感、特異性指標(biāo)監(jiān)測(cè)胰腺的內(nèi)外分泌功能變化不能及時(shí)反映是否發(fā)生急性排斥反應(yīng)及早期病理學(xué)改變TH1TH2型細(xì)胞因子INFΓIL4平衡的變化與胰腺移植后急性排斥反應(yīng)或免疫耐受有關(guān)在發(fā)生急性排斥反應(yīng)時(shí)INFΓ表達(dá)上調(diào)IL4表達(dá)下調(diào)結(jié)合病理學(xué)檢查可以對(duì)急性排斥反應(yīng)做出診斷穿孔素和顆粒酶B是細(xì)胞毒性T細(xì)胞分泌的毒性蛋白作為細(xì)胞毒性T細(xì)胞活化的特異性分子標(biāo)志與排斥反應(yīng)的病理過(guò)程有關(guān)檢測(cè)靜脈血穿孔素和顆粒酶B的基因表達(dá)與胰腺局部的蛋白表達(dá)可以對(duì)胰腺移植后急性排斥反應(yīng)做出早期診斷和鑒別診斷

簡(jiǎn)介：南華大學(xué)碩士學(xué)位論文CD40、BCL2分子在膀胱癌組織中的表達(dá)及其生物學(xué)意義研究姓名陽(yáng)寧申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別碩士專業(yè)泌尿外科指導(dǎo)教師羅志剛20070501頁(yè)碼3CD40、BCL2分子在膀胱癌組織中的表達(dá)及其生物學(xué)意義研究CD40、BCL2分子在膀胱癌組織中的表達(dá)及其生物學(xué)意義研究中文摘要目的研究CD40、BCL2分子在膀胱移行細(xì)胞癌的表達(dá)，并分別探討其與腫瘤分期、病理分級(jí)等臨床病理參數(shù)之間的相關(guān)性及其相互關(guān)系，檢測(cè)膀胱移行細(xì)胞癌細(xì)胞凋亡情況，分析其與CD40﹑BCL2分子表達(dá)的關(guān)系。方法采用免疫組化技術(shù)檢測(cè)78例膀胱移行細(xì)胞癌組織中CD40、BCL2分子的表達(dá)狀況；利用HOECHST法檢測(cè)膀胱移行細(xì)胞癌凋亡情況，確定凋亡率。同時(shí)以20例供者所取的無(wú)瘤膀胱組織做參照。結(jié)果1．CD40在膀胱移行上皮中的表達(dá)率1/205，在膀胱移行細(xì)胞癌中的表達(dá)率55/78705，CD40在膀胱移行細(xì)胞癌中高表達(dá)，明顯高于無(wú)瘤膀胱組織，且差異有顯著性（P＜001）,CD40的表達(dá)與膀胱移行細(xì)胞癌的臨床分期P＜001）、病理分級(jí)P＜005）、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移P＜001）呈負(fù)相關(guān)。2．BCL2在膀胱移行上皮中的表達(dá)率1/205），在膀胱移行細(xì)胞癌中的表達(dá)率36/78467），BCL2在膀胱移行細(xì)胞癌組織中高表達(dá)，明顯高于無(wú)瘤膀胱組織，且差異有顯著性（P＜001）,BCL2的表達(dá)與膀胱移行細(xì)胞癌的臨床分期（P＜001）、病理分級(jí)（P＜005）、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移（P＜005）呈正相關(guān),臨床資料中與患者的年齡相關(guān)。3．膀胱移行上皮細(xì)胞癌中的細(xì)胞凋亡率為656士109；CD40陽(yáng)性組細(xì)胞凋亡率為1260士038，陰性組細(xì)胞凋亡率為677士053，兩組相比差異有顯著性P＜001，膀胱移行細(xì)胞癌中CD40表達(dá)與凋亡率呈正相關(guān)；BCL2陽(yáng)性組凋亡率701±113,BCL2陰性組凋

簡(jiǎn)介：學(xué)校代碼學(xué)號(hào)10023200501041胰腺癌5一氟尿嘧啶5一FU耐藥相關(guān)蛋白篩查及胰腺癌候選免疫原性膜抗原SLP一2和PROHIBITIN分子生物學(xué)功能研究專業(yè)年級(jí)姓名導(dǎo)師寸YLLJ副導(dǎo)師完成日期北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院臨床醫(yī)學(xué)2005級(jí)楊宇趙玉沛教授王維斌博士北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院臨床學(xué)院北京協(xié)和醫(yī)院基本外科教研室2013年6月212RNA反轉(zhuǎn)錄和體外轉(zhuǎn)錄2821_3樣品標(biāo)記和雜交3122蛋白質(zhì)組學(xué)篩查34221蛋白樣品提取34222蛋白樣品制備34223ITRAO標(biāo)記34224離線反相液相色譜OFFLINERPLC34225LCMS／MS液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜分析35226蛋白質(zhì)鑒定和定量35227IPA網(wǎng)絡(luò)分析3523生物信息學(xué)分析軟件353實(shí)驗(yàn)結(jié)果354討論395本部分研究小結(jié)426參考文獻(xiàn)43第二部分胰腺癌候選免疫原性膜抗原SLP2和PROHIBITIN分子生物學(xué)功能研究47一、SLP一2在胰腺癌細(xì)胞中生物學(xué)功能研究481實(shí)驗(yàn)材料4811人胰腺癌細(xì)胞系及相應(yīng)培養(yǎng)基4812RNA抽提試劑及耗材4813RNA抽提相關(guān)試劑的配置4914逆轉(zhuǎn)錄RTPCR及QRTPCR主要試劑及儀器4915蛋白提取及檢測(cè)試劑5016WESTERNBLOTTING主要試劑及配置方法5017SIRNA相關(guān)試劑5218過(guò)表達(dá)質(zhì)粒構(gòu)建53181人SLP一2基因CDNA序列53182PLRES2EGFP質(zhì)粒信息5319質(zhì)粒擴(kuò)增LB液體培養(yǎng)基的制備542實(shí)驗(yàn)方法5421TRIZOL法提取細(xì)胞總RNA5422RNA純度與濃度檢測(cè)5523逆轉(zhuǎn)錄RTPCR反應(yīng)體系及條件5524REALTIMEPCR反應(yīng)體系及條件5625細(xì)胞總蛋白提取56

簡(jiǎn)介：點(diǎn)擊查看更多新型抗菌增敏劑的分子設(shè)計(jì)、合成及生物學(xué)活性研究.pdf精彩內(nèi)容。

簡(jiǎn)介：研究背景小腸結(jié)腸炎耶爾森菌（YERSINIAENTEROCOLITICA）是一種革蘭氏陰性無(wú)芽孢桿菌，屬于耶爾森菌屬，是該菌屬的三大致病菌之一。小腸結(jié)腸炎耶爾森菌廣泛存在于自然環(huán)境中，主要通過(guò)污染食物進(jìn)入人體。人感染小腸結(jié)腸炎耶爾森菌后，主要表現(xiàn)為胃腸道癥狀，如嘔吐、腹痛、腹瀉等，多具有自限性。但是，部分患者可出現(xiàn)一系列嚴(yán)重的并發(fā)癥，如心內(nèi)膜炎、反應(yīng)性關(guān)節(jié)炎、組織膿腫等，甚至引起敗血癥導(dǎo)致死亡。在歐洲，由該菌和假結(jié)核耶爾森菌引起的耶氏菌病在常見(jiàn)的人畜共患病中占第四位在美國(guó)，由該菌引起的疾病每年發(fā)病約117萬(wàn)例在我國(guó)，文獻(xiàn)可查的小腸結(jié)腸炎耶爾森菌暴發(fā)有兩次。該菌可分為6個(gè)生物型1A，1B和2～5和60個(gè)血清型，主要通過(guò)檢測(cè)AIL、YSTA、YSTB、YADA和VIRF5個(gè)毒力基因來(lái)判斷其致病性。小腸結(jié)腸炎耶爾森菌對(duì)青霉素和一代頭孢天然耐藥，對(duì)其他種類的抗菌藥物具有不同程度的耐藥率。脈沖場(chǎng)凝膠電泳PULSEDFIELDGELELECTROPHESIS，PFGE分型是現(xiàn)階段小腸結(jié)腸炎耶爾森菌分子分型最常用的方法，主要用于菌株的溯源。山東省自2006年開(kāi)始，設(shè)立高密市和五蓮縣兩個(gè)監(jiān)測(cè)點(diǎn)對(duì)小腸結(jié)腸炎耶爾森菌開(kāi)展監(jiān)測(cè)，至2011年共從雞、牛、羊、豬等動(dòng)物糞便和生熟肉、蒼蠅中分離到小腸結(jié)腸炎耶爾森菌237株。這些菌株的動(dòng)力、生物型、血清型、毒力基因和抗菌藥物敏感性等生物學(xué)特性尚缺乏系統(tǒng)性的研究分析，分子分型也尚未開(kāi)展。研究目的1、系統(tǒng)分析分離到的小腸結(jié)腸炎耶爾森菌的動(dòng)力、生物型、血清型、毒力基因和抗菌藥物敏感性等生物學(xué)特性及其時(shí)間、地區(qū)和宿主分布特點(diǎn)。2、對(duì)分離到的小腸結(jié)腸炎耶爾森菌進(jìn)行PFGE分型，了解菌株的親緣關(guān)系，探討表型分型和PFGE分型的相互關(guān)系。3、初步建立山東省小腸結(jié)腸炎耶爾森菌的基礎(chǔ)數(shù)據(jù)庫(kù)，為該菌的長(zhǎng)期監(jiān)測(cè)奠定基礎(chǔ)，為耶氏菌病的預(yù)測(cè)、預(yù)警提供技術(shù)支持。研究方法1、動(dòng)力試驗(yàn)采用半固體穿刺法，生物分型根據(jù)生化反應(yīng)進(jìn)行判斷，血清分型采用玻片凝集法，毒力基因檢測(cè)采用PCR法，抗菌藥物敏感性檢測(cè)采用VITEK2COMPACT系統(tǒng)和ASTGN16藥敏卡。2、PFGE分型參照PULSECHINA推薦的標(biāo)準(zhǔn)方法進(jìn)行，電泳圖譜處理及聚類分析采用BIONUMERICS61軟件。3、資料的錄入、整理和簡(jiǎn)單分析采用EXCEL2007軟件，數(shù)據(jù)的統(tǒng)計(jì)學(xué)分析采用SPSS160軟件。研究結(jié)果1、動(dòng)力為“中”的菌株占42％10237，動(dòng)力為“差”的菌株占30％7237，其余菌株動(dòng)力良好。動(dòng)力為“中”或“差”的菌株在各年份、各地區(qū)和多種宿主中均有分布。2、987％234237的菌株為生物1A型其余3株菌為生物4型，均從2006年高密市的豬糞樣本中分離到。3、498％118237的菌株凝出相應(yīng)血清型，以O(shè)∶5219％，52237和O∶8211％，50237型為主。2011年可分血清型最多（5種）高密分離株O∶5型最多239％，39163，五蓮分離株O∶8型最多338％，2574各宿主分離株均以O(shè)∶5和O∶8型為主。4、YSTB基因的陽(yáng)性率最高，為814％193237AIL和YSTA基因僅在3株菌中檢測(cè)到，陽(yáng)性率為13％3237未檢測(cè)到Y(jié)ADA和VIRF基因。YSTB基因陽(yáng)性菌株在不同時(shí)間、地區(qū)和宿主中均為優(yōu)勢(shì)菌株。5、共有235株菌獲得抗菌藥物敏感性試驗(yàn)的結(jié)果。菌株對(duì)頭孢曲松、頭孢吡肟、阿米卡星、慶大霉素和替加環(huán)素的敏感率最高，為100％對(duì)氨芐西林的耐藥率最高，為945％222235。菌株的多重耐藥率為123％29235。2007和2011年分離株對(duì)呋喃妥因的敏感情況有差異P＜005高密市分離株對(duì)復(fù)方新諾明的耐藥率104％，17163高于五蓮縣分離株14％，172P＜005毒力基因A型（AILYSTAYSTBYADAVIRF）菌株對(duì)氨芐西林、阿莫西林克拉維酸、頭孢唑林、頭孢西丁的耐藥率和對(duì)呋喃妥因的中介耐藥率依次為990％，190192896％172192948％182192802％154192948％182192高于毒力基因B型（AILYSTAYSTBYADAVIRF）菌株依次為725％，2940650％，2640675％2740425％1740650％2640P＜005。6、237株菌中的231株被分為144個(gè)PFGE型別，相似性系數(shù)在611％～1000％，無(wú)明顯優(yōu)勢(shì)型別。五蓮分離株的PFGE聚集性高于高密分離株，含7株及以上菌株的PFGE型別均出現(xiàn)在五蓮縣。其余6株菌未獲得PFGE條帶。144個(gè)PFGE型別中有15個(gè)型別在中國(guó)疾控中心數(shù)據(jù)庫(kù)中可找到相同或相近的型別。7、17株動(dòng)力為“中”或“差”的菌株中的14株形成3個(gè)聚類簇52株O∶5血清型菌株中的31株形成4個(gè)聚類簇，50株O∶8血清型菌株中的19株形成1個(gè)聚類簇41株毒力基因B型（AILYSTAYSTBYADAVIR）菌株中的20株形成1個(gè)聚類簇藥敏型別在PFGE聚類中分布分散，無(wú)特異性。8、動(dòng)力、生物分型、血清分型、毒力基因分型、藥敏分型和PFGE分型的SIMPSON指數(shù)分別為01362、00251、06564、03081、07214和09982。結(jié)論1、高密市和五蓮縣的小腸結(jié)腸炎耶爾森菌存在動(dòng)力突變株菌株幾乎全為生物1A型血清型以O(shè)∶5和O∶8型為主，存在地區(qū)差異菌株攜帶的毒力基因主要為YSTB基因，無(wú)傳統(tǒng)致病性菌株耐藥譜廣泛，大部分菌株對(duì)青霉素類和一、二代頭孢耐藥，存在一定的多重耐藥現(xiàn)象，YSTB基因陽(yáng)性的生物1A型菌株與YSTB基因陰性的生物1A型菌株耐藥性不同。2、高密市和五蓮縣的小腸結(jié)腸炎耶爾森菌存在多克隆系，基因多態(tài)性明顯，部分克隆株長(zhǎng)期存在，五蓮地區(qū)可能存在相對(duì)優(yōu)勢(shì)克隆系部分山東分離株可能與其他省份菌株存在聯(lián)系。3、小腸結(jié)腸炎耶爾森菌的PFGE分型可能與其動(dòng)力有一定相關(guān)，與生物型、血清型、毒力基因型和藥敏型別不具有相關(guān)性。4、PFGE具有強(qiáng)大的分型能力，但在菌株溯源時(shí)需與表型分型聯(lián)合使用。

簡(jiǎn)介：目的研究人腦垂體瘤中血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子VEGF和核轉(zhuǎn)錄因子KBP65NFKBP65的表達(dá)及其在腫瘤生物學(xué)行為中的作用。材料與方法應(yīng)用SABC方法進(jìn)行免疫組織化學(xué)染色，觀察6例正常人腦垂體組織、12例人腦垂體瘤組織和6例復(fù)發(fā)垂體瘤中VEGF和NFKBP65的表達(dá)情況，以及這些腫瘤因子表達(dá)與腫瘤生物學(xué)行為之間的關(guān)系。結(jié)果免疫組化染色可見(jiàn)在正常腦垂體細(xì)胞未見(jiàn)VEGF和NFKBP65表達(dá)；而在垂體瘤細(xì)胞中這兩種因子均有不同程度的表達(dá)。在復(fù)發(fā)垂體瘤中，這兩種蛋白的表達(dá)水平較在初發(fā)垂體瘤和正常腦垂體組織中的表達(dá)水平高，且差別顯著P＜001。這兩種蛋白主要在腫瘤細(xì)胞中有表達(dá)，這兩種蛋白的表達(dá)水平與垂體瘤的復(fù)發(fā)相關(guān)。結(jié)論VEGF、NFKBP65的表達(dá)增強(qiáng)與垂體瘤的形成、腫瘤浸潤(rùn)和腫瘤的血管生成關(guān)系密切，在垂體瘤的復(fù)發(fā)中起重要作用。

簡(jiǎn)介：凝血障礙是導(dǎo)致出血性疾病的重要原因凝血過(guò)程的激活在血栓形成中也具有極為重要的作用該研究通過(guò)對(duì)部分凝血因子的基因突變和多態(tài)性研究一方面探討了遺傳出血性疾病血友病A和FⅩⅢ缺乏癥的分子機(jī)制另一方面研究了凝血因子Ⅱ、Ⅴ和ⅩⅢ的多態(tài)FⅡ20210A、FVLEIDEN和FⅩⅢAV34L在加拿大紐芬蘭人群和中國(guó)臺(tái)灣人群中的分布頻率以及與心肌梗死發(fā)病的相關(guān)性結(jié)論1在加拿大紐芬蘭TWILLIGATE地區(qū)中確認(rèn)了一個(gè)導(dǎo)致輕型血友病A的FⅧ因子VAL2016ALA方德突變研究中建立的位點(diǎn)特異PCR方法適合快速、準(zhǔn)確、簡(jiǎn)便診斷當(dāng)?shù)厝巳旱妮p型血友病A已用于臨床服務(wù)同時(shí)發(fā)現(xiàn)拉博道FTEAU地區(qū)的輕型血友病A患者中有一FⅧ因子ALA200THR突變2在紐芬蘭島的FⅩⅢ缺乏癥患者中發(fā)現(xiàn)第6外顯子的剪接受位有一G→A突變3FⅡ20210A可能是MⅠ的一個(gè)風(fēng)險(xiǎn)因子在MⅠ早發(fā)中更為重要FVL可能是MⅠ早發(fā)的易患因子FⅩⅢALEU34可能僅在男性中獨(dú)立導(dǎo)致MⅠ的易患性4FⅡ20210A和FⅩⅢALEU34相互作用產(chǎn)生的協(xié)同效應(yīng)導(dǎo)致MⅠ的強(qiáng)易患性5FⅩⅢALEU34和FVL在紐芬蘭人群中的分布與其他高加索人群一致紐芬蘭人群中FⅡ20210A的分布頻率低于已報(bào)告的其他大多數(shù)高加索人群6中國(guó)臺(tái)灣人群中FVL、FⅡ20210A和FⅩⅢALEU34都有02﹪的極低的分布頻率和01﹪的基因位點(diǎn)頻率

簡(jiǎn)介：分子生物學(xué)研究表明流感病毒的血凝素HA基因與流行規(guī)模最密切只有HA蛋白分子上抗原決定簇區(qū)的氨基酸替換才能引起抗原性變異該研究對(duì)在河北省分離到的甲亞型HN流感病毒HA基因進(jìn)行了核苷酸序列測(cè)定并結(jié)合抗原性分析資料以探索地方毒株的型別變遷和基因變異規(guī)律及時(shí)抓住有意義變異株指導(dǎo)今后流感的監(jiān)測(cè)、診斷及試劑和疫苗研制甲亞型流感病毒株的新變種多首發(fā)于北方故河北省流行毒株在目前流感病毒HN亞型的變異和流行中可能具有重要作用結(jié)論1、199798流感流行期分離到6株甲亞型流感病毒抗原性接近于A京防186與A北京26295有大變異2、基因分析表明1997年中國(guó)出現(xiàn)了甲亞型新變異株在制備診斷試劑和疫苗時(shí)需要用此類毒株3、核苷酸序列測(cè)定結(jié)合抗原性分析可更準(zhǔn)確地闡明病毒變異情況

簡(jiǎn)介：目的研究臨床分離的碳青霉烯類耐藥腸桿菌科細(xì)菌CRE的耐藥譜及耐藥機(jī)制，分析其流行傳播特點(diǎn)，為及時(shí)遏制臨床感染的暴發(fā)流行和抗菌藥物的合理使用提供指導(dǎo)。方法1收集溫州醫(yī)科大學(xué)附屬第二醫(yī)院2012年1月2013年11月間臨床連續(xù)分離的對(duì)碳青霉烯類藥物耐藥（耐藥中介）的腸桿菌科細(xì)菌，分析其臨床分布特點(diǎn)及耐藥譜，了解該院耐藥菌株的耐藥形勢(shì)。2采用改良HODGE試驗(yàn)對(duì)碳青霉烯類耐藥菌株進(jìn)行碳青霉烯酶表型確證試驗(yàn)，初步篩查產(chǎn)碳青霉烯酶菌株采用PCR技術(shù)擴(kuò)增主要Β內(nèi)酰胺酶基因，包括碳青霉烯酶、超廣譜Β內(nèi)酰胺酶ESBLS和頭孢菌素酶（AMPC酶），并對(duì)陽(yáng)性擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行測(cè)序和BLAST比對(duì)，檢測(cè)菌株耐藥基因的攜帶情況，研究菌株的耐藥機(jī)制。3利用碳青霉烯酶基因陽(yáng)性菌株與受體菌J53和EC600的接合轉(zhuǎn)移試驗(yàn)研究碳青霉烯酶基因及其質(zhì)粒的水平轉(zhuǎn)移能力，對(duì)陽(yáng)性接合子進(jìn)行PCR驗(yàn)證碳青霉烯酶基因及其它耐藥基因，并檢測(cè)陽(yáng)性接合子的體外藥敏情況。4通過(guò)脈沖場(chǎng)凝膠電泳PFGE與腸桿菌基因組間重復(fù)一致性序列ERICPCR分析我院產(chǎn)碳青霉烯酶菌株間的同源性，研究耐藥菌株的流行特征通過(guò)多位點(diǎn)序列分型MLST，分析本研究中產(chǎn)碳青霉烯酶肺炎克雷伯菌與全球流行株的相關(guān)性。5提取產(chǎn)碳青霉烯酶菌株的質(zhì)粒，利用普通PCR技術(shù)檢測(cè)碳青霉烯酶基因是否定位于質(zhì)粒上并分析其基因所在質(zhì)粒的大小。結(jié)果1本研究共收集到溫州醫(yī)科大學(xué)附屬第二醫(yī)院2012年1月2013年11月臨床連續(xù)分離的非重復(fù)碳青霉烯類耐藥腸桿菌科細(xì)菌57株，其中肺炎克雷伯菌25株，陰溝腸桿菌16株，產(chǎn)氣腸桿菌10株，產(chǎn)酸克雷伯菌2株，粘質(zhì)沙雷菌2株，摩根摩根菌1株，弗氏檸檬酸桿菌1株。菌株標(biāo)本來(lái)源以痰液為主，占632％，其次是血液105％、創(chuàng)口膿液105％、尿液88％和其它7O％。菌株的科室來(lái)源較廣泛，但仍存在一定的聚集性，18株316％來(lái)源于ICU病房，14株246％來(lái)源于神經(jīng)外科病區(qū)。臨床抗菌藥物體外敏感性試驗(yàn)顯示，57株腸桿菌科細(xì)菌對(duì)碳青霉烯類有不同程度的耐藥，對(duì)亞胺培南和厄他培南的敏感率分別為211％和35％，同時(shí)對(duì)頭孢菌素類、單環(huán)內(nèi)酰胺類、Β內(nèi)酰胺酶抑制劑復(fù)合物和呋喃妥因等抗菌藥物均表現(xiàn)出較高的耐藥性，敏感率基本都在20％以下，甚至全耐藥，但對(duì)氨基糖苷類（丁胺卡那、慶大霉素和妥布霉素）和氟喹諾酮類（左氧氟沙星）藥物的敏感性較好，尤其是丁胺卡那，敏感率高達(dá)965％。257株碳青霉烯類耐藥菌株中，改良HODGE試驗(yàn)陽(yáng)性的有37株陽(yáng)性率649％，陰性20株P(guān)CR檢測(cè)碳青霉烯酶基因陽(yáng)性的37株（陽(yáng)性率649％），陰性20株。以PCR擴(kuò)增結(jié)果為參照標(biāo)準(zhǔn)，改良HODGE試驗(yàn)的靈敏度為973％，特異度為95％。57株腸桿菌科細(xì)菌耐藥基因測(cè)序結(jié)果顯示，27株攜帶KPC2，6株攜帶NDM1，3株攜帶IMP4，1株攜帶IMP842株攜帶ESBLS基因，陽(yáng)性率737％16株攜帶AMPC酶基因，陽(yáng)性率281％大多菌株都同時(shí)攜帶多種耐藥基因，同時(shí)攜帶碳青霉烯酶基因及其它耐藥基因的占509％。3接合轉(zhuǎn)移試驗(yàn)27株產(chǎn)KPC2菌株中，有24株獲得陽(yáng)性接合子，3株未接合成功4株產(chǎn)IMP菌株中有2株IMP4和1株IMP8接合成功，1株IMP4未接合成功6株產(chǎn)NDM1的菌株全部接合成功。陽(yáng)性接合子對(duì)Β內(nèi)酰胺類藥物的耐藥性很高，但對(duì)氨基糖苷類、氟喹諾酮類、復(fù)方新諾明和呋喃妥因幾乎全部敏感。4脈沖場(chǎng)凝膠電泳發(fā)現(xiàn)，10株產(chǎn)碳青霉烯酶的陰溝腸桿菌具有較高的同源性，存在五個(gè)不同的克隆型，其中主要克隆型A型有5株，均攜帶KPC2，B型2株，均攜帶NDM1，C、D、E型各1株，分別攜帶KPC2、IMP8和NDM1。ERICPCR結(jié)果顯示，7株產(chǎn)氣腸桿菌具有很高的同源性，存在兩個(gè)不同克隆型，其中A型4株，B型3株，這7株菌均攜帶KPC2碳青霉烯酶基因。同一克隆型菌株攜帶的耐藥基因相同（EA10除外），耐藥譜也基本相同，且來(lái)自同一病區(qū)。多位點(diǎn)序列分型顯示，17株碳青霉烯酶陽(yáng)性的肺炎克雷伯菌中主要存在9個(gè)ST型，其中以ST11型為主，有6株，其次為ST13型4株，ST15、ST231、ST147、ST1、ST185和ST45各一株，另外，還發(fā)現(xiàn)一株新的ST型，提交肺炎克雷伯菌MLST數(shù)據(jù)庫(kù)，命名為ST1726。5經(jīng)質(zhì)粒PCR擴(kuò)增結(jié)果顯示，所有碳青霉烯酶基因均存在于質(zhì)粒上，其中KPC2均位于54KB左右的質(zhì)粒，IMP4、IMP8和NDM1位于更大的約100KB左右的質(zhì)粒上。結(jié)論1碳青霉烯類耐藥腸桿菌科細(xì)菌CRE耐藥形勢(shì)非常嚴(yán)峻，多表現(xiàn)為多重耐藥，甚至對(duì)替加環(huán)素的敏感性也很差，但對(duì)氨基糖苷類和氟喹諾酮類藥物的敏感性較好，可替代Β內(nèi)酰胺類作為臨床感染的首選治療藥物。另外CRE菌株的科室來(lái)源具有一定的聚集性，提示臨床需加強(qiáng)這些病區(qū)的院感監(jiān)測(cè)和防控。2我院CRE菌株的耐藥機(jī)制主要是產(chǎn)碳青霉烯酶，除了國(guó)內(nèi)外廣泛流行的KPC2、IMP外，還檢測(cè)到了國(guó)內(nèi)少有報(bào)道的NDM1金屬酶，且此種酶在多種腸桿菌科細(xì)菌中均有檢出耐藥菌株大多同時(shí)攜帶多種耐藥基因，是導(dǎo)致菌株多重耐藥一個(gè)重要原因。本研究還證實(shí)了改良HODGE試驗(yàn)對(duì)于快速篩查產(chǎn)碳青霉烯酶腸桿菌科細(xì)菌具有很高的靈敏度和特異度。3大部分菌株可通過(guò)接合轉(zhuǎn)移試驗(yàn)將碳青霉烯酶基因傳遞給受體菌大腸埃希菌，說(shuō)明耐藥基因存在于可移動(dòng)質(zhì)粒上，可通過(guò)水平傳播的方式引起耐藥菌株的流行播散。4本研究中的CRE菌株具有很高的同源性，并且同一克隆型的菌株幾乎都來(lái)自同一病區(qū)，提示耐藥菌株存在克隆傳播，應(yīng)加強(qiáng)病區(qū)醫(yī)護(hù)人員衛(wèi)生、消毒管理。我院產(chǎn)碳青霉烯酶的肺炎克雷伯菌以ST11型為主，這也是國(guó)內(nèi)的主要流行株，與國(guó)外的主要流行株ST258僅存在一個(gè)等位基因的差異。

簡(jiǎn)介：碩士學(xué)位論文論文題目?jī)和疊系急性淋巴細(xì)胞性白血病CD1332的生物學(xué)特性及其分子機(jī)制初步研究研究生姓名龐麗指導(dǎo)教師姓名趙文理專業(yè)名稱兒科學(xué)研究方向小兒血液與腫瘤論文提交日期2014年3月