簡介：點擊查看更多卵母細胞的體外成熟及其分子生物學機制的初步研究.pdf精彩內容。

簡介：實驗目的用DNA免疫和細胞加強方法制備抗人CD55分子單克隆抗體MAB，并對其生物學特性進行初步研究，確定該方法制備抗體的可行性。實驗方法RTPCR方法克隆CD55分子編碼區(qū)全長基因，將擴增基因定向導入真核表達載體PCDNA31和原核表達載體PET28A中。誘導PET28A55載體在大腸桿菌ROSSETA中表達CD55，表達產物以包涵體形式存在。通過鹽酸胍變性溶解包涵體，并經鎳柱純化得到重組CD55蛋白。重組質粒PCDNA3155采用多次肌肉注射方法免疫小鼠，并在每次DNA免疫前對小鼠股四頭肌做預處理①DNA免疫前1周注射蛇毒心肌毒素；②DNA免疫前15分鐘注射25％的高滲蔗糖溶液。與細胞融合前3天，用高表達CD55分子HPBALL細胞加強免疫一次，之后采用傳統(tǒng)的淋巴細胞雜交瘤技術制備抗CD55分子單克隆抗體。通過流式細胞術檢測每次免疫后小鼠血清中抗體分泌情況。應用夾心ELISA方法檢測抗體的類型，并利用抗體競爭實驗初步驗證制備抗體的表位。通過流式細胞儀FACS、熒光顯微鏡驗證抗體與天然細胞膜蛋白的結合活性和特異性；WESTERNBLOT印證抗體與變性線性蛋白結合活性。實驗結果1擴增CD55全長基因1174BP，構建成PCDNA3155重組質粒。2采用FACS檢測血清滴度，3次DNA免疫后其最高為1∶200，細胞加強后滴度最高為1∶800。3通過細胞融合、篩選和克隆化培養(yǎng)最后得到兩株單克隆抗體分別為2B6E和2B6B。4兩株抗體IGG亞類均為IGG2A，輕鏈均為為Κ型。5抗體免疫競爭實驗表明2B6B、2B6E、IA10BD和67SEROTEC之間識別不同的抗原表位。6FACS、免疫熒光顯微鏡和WESTERNBLOT實驗表明抗體與天然細胞膜蛋白和變性膜蛋白及重組蛋白都有良好的結合活性和特異性。實驗結論PCDNA3155肌肉內免疫后能激發(fā)小鼠產生針對CD55分子的抗體，聯(lián)合應用細胞加強免疫可顯著提高抗體的滴度，而不影響其特異性。而且此方法制備的單克隆抗體具有良好的結合活性和特異性，這為以后探討制備單克隆抗體的方法提供新思路，也為日后改造CD55單克隆抗體，進行靶向治療的研究打下基礎。

簡介：背景與目的侵襲和轉移是惡性腫瘤最主要的生物學特性，也是腫瘤致死的重要因素。研究腫瘤轉移機制對腫瘤轉移的早期診斷和治療具有重要意義。腫瘤轉移的方式主要有淋巴道轉移、血道轉移和種植轉移。腫瘤發(fā)生淋巴道轉移的機制尚有待研究。研究表明，腫瘤轉移不僅與機體微環(huán)境有關，還與腫瘤細胞自身特性密切相關，其中細胞表面糖蛋白的糖基化調節(jié)起重要作用。CD147分子，又名EMMPRIN，屬于免疫球蛋白超家族IMMUNOGLOBULINSUPERFAMILYIGSF的跨膜糖蛋白，是細胞膜的監(jiān)視分子。CD147由2個胞外IG結構域、1個跨膜結構域和1個胞內結構域組成。從CD147的N端起，第1個胞外IG結構域與MMPS誘導活性及CD147自身寡聚有關；第2個胞外IG結構域與窖蛋白CAVEOLIN1CAV1存在相互作用。由于N糖基化不同，CD147同時表現(xiàn)為高糖型CD147HGCD147，分子量4066KD和低糖型CD147LGCD147，分子量33KD，但CD147糖基化與腫瘤轉移的關系尚不明確。CD147主要通過誘導基質金屬蛋白酶活性參與組織重構，在機體發(fā)育、生殖等多種生理過程，以及腫瘤、類風濕關節(jié)炎、潰瘍等多種病理過程中發(fā)揮作用。另一方面，CD147已被證實在多種腫瘤尤其是惡性腫瘤組織中表達增加，目前CDL47已在肺癌、肝癌、腦膠質瘤、食道癌、喉癌、卵巢癌、乳腺癌等癌細胞中檢測出來。作為存在于腫瘤細胞表面的一種粘附分子，CD147介導腫瘤和基質之間的相互作用，誘導成纖維細胞和腫瘤細胞自身MMPS生成，加速腫瘤血管的生成，從而促進腫瘤轉移。目前影響CD147水平表達活性的調節(jié)劑有糖基化、生長因子、激素和膜脫落等。其中，糖基化對CD147的誘導活性起關鍵性作用。本文通過克隆小鼠CD147的CDNA、構建其表達載體并將其穩(wěn)定過表達于小鼠肝癌細胞HEPA16中，觀察CD147糖型和HEPA16細胞生物學的變化，旨在闡明CD147的糖基化及其調節(jié)在腫瘤轉移中的重要作用，為抗腫瘤轉移的藥物設計提供有價值的實驗依據和線索。方法1從小鼠肝癌細胞HCAF中提取總RNA，利用CD147特異性引物經RTPCR擴增CD147CDNA11830BP片段，克隆至PMD18TSIMPLEVECT，然后亞克隆到真核表達載體質粒PCDNA31上，經轉化、抗生素初步篩選、限制性核酸內切酶酶切和DNA測序獲得重組質粒PCDNA31CD147。2利用脂質體將重組質粒PCDNA31CD147轉染至小鼠肝癌細胞HEPA16上，空載體做對照，經G418篩選及RTPCR和WESTERNBLOT分析，獲得穩(wěn)定表達株。3WESTERNBLOT分析穩(wěn)定過表達CD147的糖型變化，并利用體外侵襲實驗觀察小鼠肝癌細胞HEPA16細胞生物學性狀的變化。結果1利用RTPCR從小鼠肝癌細胞HCAF總RNA中成功克隆出850BP的CD147CDNA的11830BP片斷，重組陽性克隆經酶切和測序鑒定證實目的基因已正確插入PCDNA31表達載體中，且與載體上的CMYC基因處于同一開放閱讀框，記為PCDNA31CD147。2利用脂質體轉染技術，經G418篩選，RTPCR、WESTERNBLOT分析，獲得了2個穩(wěn)定過表達外源CD147的HEPA16細胞株，記為HEPA16CD147。3CD147過表達的小鼠肝癌細胞HEPA16中，高糖型和低糖型CD147的表達均有增加，細胞的侵襲能力顯著增強。結論CD147的過表達沒有影響小鼠肝癌細胞HEPA16中CD147的糖基化，但是顯著增強細胞的侵襲能力。

簡介：點擊查看更多重組人肝再生增強因子基因轉染肝細胞系的生物學活性研究.pdf精彩內容。

簡介：復旦大學博士學位論文環(huán)境內分泌干擾物對神經母細脆瘤細脆生物學特性影響反神經母細脆瘤全基因組拷貝數(shù)變異初步分析EFFECTSOYENVIRONMENTALENDOCRINEDISRUPTORSONTHECHARACTERISTICSOFNEUROBLASTOMACELLSANDWHOLEGENOMICCOP,NUMBERVARIANTPROFILINGOYNEUROBLASTOMA博士研究生朱海濤學科反專土J兒科學F外科J導師育現(xiàn)民教授導師組威置吳柏林教授T巋籃捌I任醫(yī)師忱亦平蘸投陳蓮材麓援肆繼卓I話醫(yī)師2010年4月5日塑E太學博±學＆論I常用縮略詞匯英漢對照表目錄中文摘要?????????????????????????????????????I羲文摘監(jiān)?????????????????????????????????????_、引言第一部分BPA及DEHP對神經母紐J胞瘤SKN，SH細胞增殖凋亡特性的影響前言????????????．．???”??．“”“?”???????????????．．4材料與方法結果討論小結“5142第二部分BPA及DEHP對神經母細胞瘤SK．N。SH細胞多藥耐藥性的影響前言材料與方法結聚???????????????????????．．．???．???”．．??””??34I寸淪?????????????????????????????????????．45_、結????????????????．．??．”．??．”．”“．”．???．??．．．．．．?N”．?．47第三部分BN技DEHP對神經母細胞瘤SK．N．SH細胞侵襲轉移特性的影響前言?????????????????”???????????．““??．??48材料與方法?????????????????????????????????”49}自H?????????????????????????????????????．52討論?????????????????????????????????????．59_、結?????????．．??．．”????????????????????????6L第舊部分EED對神經母細胞瘤SKNSH細胞生物學特性影響的分了機制F{UII??????????????????????????????“”??????61利料與方法?????????????????????????????????．．64結G；??????????????????????．?．．???．．．?．．．．”．”??．．?．“．6710鹼?????????”?一????”??”””“??“?????．??????．850、結??????????????????????????????????”??“89第五部分中阿漢族人種經母細胞確全基因紐拷貝數(shù)變異糾步分析前占?????????????????????????????????????90材料與方法?????????????????????????????????．．91}自?????????????????????????????????????．95討論小結03{義總結．?．“．??”??．．．??．．．．?????????????????????”L16參考文獻博J二期間發(fā)表論文致謝07244146

簡介：臍血是造血干祖細胞的一個重要來源，可用于臨床移植來恢復患者的髓系造血功能。臍血采集后至進入臨床應用前，需要優(yōu)良的冷凍技術來保持造血干細胞的活性與特征。目前，除了傳統(tǒng)的慢速凍存法外，玻璃化法逐漸成為一種頗具應用前景的低溫保存技術，而良好的干細胞低溫保存方案不僅要保證一定的細胞活率，同時要維持干細胞的增殖及分化能力。本實驗室在前期的研究中篩選出聯(lián)合玻璃化保護劑配方，并對臍血來源的造血干祖細胞進行了低溫保存。為了評價該玻璃化冷凍方案的效果，本文首先用臺盼藍拒染法檢測凍后細胞活率，并用流式細胞術測定CD34細胞的百分含量，再對凍后的細胞進行短期的靜態(tài)培養(yǎng)和長期的集落培養(yǎng)，綜合考查凍后細胞的回收率與生物學特征。其次，由于導入過程是細胞發(fā)生損傷的主要環(huán)節(jié)，繼而又對導入過程平衡時間進行了優(yōu)化設計。實驗方法主要采用顯微攝像系統(tǒng)拍攝細胞照片，對導入過程不同時刻的細胞體積進行統(tǒng)計分析，并結合細胞活率的測定，確定適宜的導入平衡時間。結果表明玻璃化冷凍復蘇后，單個有核細胞平均回收率可達到815±17％，而傳統(tǒng)的慢速凍存法，單個有核細胞回收率僅為747±26％，兩者存在顯著性差異。慢速凍存組CD34細胞的回收率為523％，略高于玻璃化凍存組497％，但兩者無顯著性差異。雖然，CD34細胞的回收率無顯著差異。原代細胞，玻璃化凍后細胞和慢速冷凍后細胞在72小時內的生長狀態(tài)良好，擴增倍數(shù)分別為27，23和19倍。各組細胞進行14天集落培養(yǎng)，均可形成典型的BFUE，CFUGM和CFUGEMM集落，各實驗組無顯著性差異，玻璃化凍存組的集落回收率可達到90％以上。優(yōu)化前導入平衡時間為等時間間隔，即每步導入之間均為90S，總時間為450S。細胞的體積皺縮到初始體積的35％以下，并無法有效恢復。細胞活率為881±30％。優(yōu)化設計的平衡時間為前短后長的非等平衡時間間隔，即180S，180S，90S，90S和60S，總時間為600S。細胞的體積恢復至初始體積的63％，細胞活率為954±04％，具有顯著提高。采用聯(lián)合玻璃化保護劑對臍血造血干祖細胞進行玻璃化冷凍保存，可以得到較高的細胞回收率，且成活細胞的功能性保持完好。對導入平衡時間進行優(yōu)化設計，提出前長后短的非等時間間隔，有效地減少了導入過程細胞損失的情況。

簡介：點擊查看更多跨膜型SCF與分泌型SCF對肥大細胞生物學功能影響的研究.pdf精彩內容。

簡介：該文分四部分第一部分轉染人TGFΒ1和反義TGFΒ1基因大鼠MSC系的建立目的通過對大鼠MSC轉染正義和反義TGFΒ1基因獲得穩(wěn)定過表達和低表達TGFΒ1的MSC克隆結論穩(wěn)定過表達和低表達TGFΒ1的MSC系的建立為進一步研究TGFΒ1對MSC生物學特性改變的影響提供物質保證第二部分轉染TGFΒ1和反義TGFΒ1對MSC增殖及其基質降解酶系統(tǒng)表達的影響目的研究過表達和低表達TGFΒ1對MSC細胞增殖、纖溶酶原激活物及其抑制劑和基質金屬蛋白酶表達的影響結論TGFΒ1可通過對大鼠系膜細胞增殖、PAI1TPA和MMP237表達的影響而在腎小球硬化的發(fā)生發(fā)展過程起著重要作用第三部分TGFΒ1對腎小球MSC醛糖還原酶表達的影響目的對轉染人TGFΒ1基因的MSC進行相關反應性基因的篩選并觀察TGFΒ1對其中之一的醛糖還原酶表達的影響結論醛糖還原酶是一個與TGFΒ1基因表達密切相關的多元醇代謝通路的關鍵酶可能參與TGFΒ1介導的腎小球硬化的發(fā)生機制第四部分瞬時轉染SMAD4基因對大鼠MSC增殖和MMP2表達的影響目的探討SMAD4信號傳遞分子參與TGFΒ1介導的MSC生長及其MMP2表達中的作用結論SMAD4分子參與TGFΒ1對MSC生長抑制和MMP2表達增強的調節(jié)機制顯示其在介導腎小球硬化過程中也可能起重要作用

簡介：中南大學碩士學位論文谷胱甘肽S轉移酶Μ3對乳腺癌細胞株MDAMB231生物學特性的影響姓名黃秋梅申請學位級別碩士專業(yè)藥理學（臨床藥理學）指導教師袁洪20090501無明顯影響，主要改變細胞對阿霉素的藥物敏感性，并影響細胞的遷移運動能力，從而改變乳腺癌細胞轉移的傾向。關鍵詞谷胱甘肽S轉移酶P3；乳腺癌；RNA干擾；遷移；生長抑制Ⅱ

簡介：東南大學碩士學位論文PASAL1基因在胃癌細胞株中的表達及生物學意義姓名楊曉薇申請學位級別碩士專業(yè)臨床醫(yī)學；內科學指導教師陳洪20110602英文摘要EXPRESSIONANDBIOLOGICALSIGNIFICANCEOFRASPROTEINACTIVATORLIKE1GENEINGASTRICCANCERCELLLINEABSTRACTOBJECTIVETOINVESTIGATETHEEXPRESSIONANDBIOLOGICALSIGNIFICANCEOFRASPROTEINACTIVATORLIKE1RASALLINNORMALHUMANGASTRICEPITHELIALCELLLINEANDDIFFERENTLYDIFFERENTIATEDGASTRICCANCERCELLLINES．METHODSTHENORMALHUMANGASTRICEPITHELIALCELLLINEANDDIFFERENTLYDIFFERENTIATEDGASTRICCANCERCELLLINESWERECULTUREDINVITROANDDIVIDEDINTOCONTROLGROUPANDEXPERIMENTALGROUPS．THEEXPRESSIONSOFRASALLMRNAANDPROTEINWERERESPECTIVELYDETECTEDBYPTPCRANDWESTERNBLOTINTHREEKINDSOFGASTRICCANCERCELLLINES，INCLUDINGWELLDIFFERENTIATEDMKN一28，MODERATELYDIFFERENTIATEDSGC一7901，POORLYDIFFERENTIATEDBGC一823，ANDNORMALGASTRICEPITHELIALCELLLINEGES1．THEMUTATIONOFKRASGENECODON12AND13WASDETECTEDBYPCRANDGENESEQUENCING．RESULTS1THERESULTSOFPTOPCRSHOWEDTHEEXPRESSIONOFRASALLMRNADECREASED47．53％，85．80％，95．86％RESPECTIVELYINWELLDIFFERENTIATEDGASTRICCANCERCELLLINEMKN28，MODERATELYDIFFERENTIATEDGASTRICCANCERCELLLINESGC7901ANDPOORLYDIFFERENTIATEDGASTRICCANCERCELLLINEBGC823ASCOMPAREDWITHTHENORMALGASTRICEPITHELIALCELLLINEGES1P0．01，ANDTHEEXPRESSIONWASCORRELATEDWITHTHEDEGREEOFDIFFERENTIATIONTHEPOORESTDIFFERENTIATION，THELOWESTEXPRESSIONF8098．175，P0．01．2THERESULTSOFWESTERNBLOTSHOWEDTHEEXPRESSIONOFRASALLPROTEINSDECREASED40．12％，54．94％，63．33％RESPECTIVELYINWELLDIFFERENTIATEDGASTRICCANCERCELLLINEMKN28，MODERATELYDIFFERENTIATEDGASTRICCANCERCELLLINESGC7901ANDPOORLYDIFFERENTIATEDGASTRICCANCERCELLLINEBGC823ASCOMPAREDWITHTHENORMALGASTRICEPITHELIALCELLLINEGES1PO．01，ANDTHEEXPRESSIONWASALSOCORRELATEDWITHTHEDEGREEOFDIFFERENTIATIONTHEPOORESTDIFFERENTIATION，THELOWESTEXPRESSIONF3059．420，PO．01．THERESULTSOFWESTERNBLOTWERECONSISTENTWITHTHERESULTSOFRTPCR．3THEMUTATIONOFKRASGENECODON12AND13WASNOTFOUNDINNONEOFTHETHREEGASTRICCANCERCELLLINES．

簡介：南方醫(yī)科大學2007級博士學位論文IDL對卵巢癌內皮祖細胞生物學行為的影響及機制研究THEEFFECTSANDMECHANISMSOFIDLONBIOLOGICALBEHAVIOUROFOVARIANCANCERENDOTHELIALPROGENITORCELLS專業(yè)名稱學位申請人指導教師答辯委員會主席答辯委員會成員臨床檢驗診斷學蘇亞娟王前教授、主任醫(yī)師高天明教授吳曉蔓教授李林教授蔡應木教授裘宇容教授楊紅玲教授鄭磊副教授論文評閱人崔巍教授李艷教授曹燕教授2010年05月L5日廣州博士學位論文LIIIIIIIIIIILLLIIIIIIL＼1770389IDL對卵巢癌內皮祖細胞生物學行為的影響及機制研究博士研究生蘇亞娟指導教師王前教授、主任醫(yī)師研究背景和目的摘要卵巢癌是婦科常見惡性腫瘤之一，其發(fā)病率居婦科腫瘤第三位。然而卵巢癌的死亡率高居婦科腫瘤首位，5年生存率仍然徘徊在30％左右。近年來，基因治療、靶向治療作為腫瘤治療的新生代模式日益受到重視。通過基因芯片和蛋白質組技術在卵巢痛研究中的應用發(fā)現(xiàn)了很多潛在價值的標志物。但目前還沒有找到特有效的特異性標志物，對于生長轉移的分子機理也缺乏一定的了解。轉移是影響卵巢癌患者治療效果和死亡的主要原因，探討與卵巢癌生長轉移相關的因素，尋找預防和治療的有效途徑，是當代腫瘤學研究的一項迫切任務。腫瘤血管化是腫瘤從體積小、局限性的非浸潤性腫瘤發(fā)展成為體積大、具有浸潤性和轉移能力的腫瘤的關鍵步驟?？寡苌墒遣煌诔Ｒ?guī)抗腫瘤治療的新策略，并以成為腫瘤研究的熱點之一。最近研究闡明了微量的骨髓來源的內皮祖細胞ENDOTHELIALPROGENITORCELLS，EPCS參與腫瘤的血管發(fā)生，促進腫瘤生長，是腫瘤轉移的開關。分化抑制因了1INHIBITORSOFDIFFERENTIATIONL，IDL又稱DNA結合抑制因子INHIBITORSOFDNABINDING，屬于螺旋環(huán)一螺旋HELIXLOOPHELIX，HLH轉錄因子家族，它顯性負調控堿性螺旋．環(huán)一螺旋BHLH轉錄因了活性，從而抑制細胞分化，促進細胞增殖。研究表明，IDL在人體腫瘤標本及體外培養(yǎng)的腫瘤細胞中均呈過表達。SCHINDL等檢測了卵巢癌巾IDL的表達，結果表明，卵巢痛的惡性程度與IDL

簡介：目的擬從人足月胎盤分離純化出間充質干細胞MECENCHYMALSTEMCELLSMSCS，進行體外擴增，研究其生物學性狀，并向成脂細胞分化，尋找新的間充質干細胞來源。方法1、采取4種不同的消化分離方法從人足月胎盤中分離純化MSCS，胎盤組織剪碎后平均分為4組A、胰蛋白酶淋巴細胞分離液組；B、胰蛋白酶膠原酶Ⅳ11羥乙基淀粉沉淀組；C、膠原酶Ⅳ淋巴細胞分層液分離組；D、膠原酶Ⅳ羥乙基淀粉沉淀組，五份標本組。2、第3代細胞經CD44抗體、CD34抗體、CD29抗體、CD106抗體免疫熒光方法鑒定；通過細胞生長曲線及電鏡觀察其生物學性狀。3、第三代細胞采用含異丁基甲基黃嘌呤、地塞米松、胰島素的高糖DMEM誘導液向脂肪細胞誘導，油紅O染色，觀察MSCS的形態(tài)變化，未誘導組作為平行對照。結果1、在其他條件相同的情況下，膠原酶Ⅳ羥乙基淀粉沉淀組培養(yǎng)成功率為100％，其余3組分別為20％，60％，80％，膠原酶IV羥乙基淀粉沉淀組細胞出現(xiàn)伸展時間及原代培養(yǎng)時間均短于其他三組。2、人胎盤間充質干細胞為貼壁生長的長梭形成纖維樣細胞，增殖能力較強；強表達透明質酸受體CD44和整合素家族受體CD29，不表達造血干細胞標志CD34和內皮細胞標志CD1063、胎盤MSCS具有向脂肪細胞分化的潛能，油紅O染色結果陽性。結論使用膠原酶Ⅳ消化胎盤組織，結合羥乙基淀粉沉淀法能較好地分離人胎盤間充質干細胞；從人足月胎盤中成功分離出間充質干細胞，與其他來源的間充質干細胞生物學性狀相似，可組為組織工程新的干細胞來源。

簡介：第三軍醫(yī)大學研究生學位論文獨創(chuàng)性聲明秉承學校嚴謹?shù)男ｏL和科研作風，本人申明所呈交的論文是我本人在導師指導下進行的研究工作及取得的研究成果。據我所知，除了文中特別加以標注和致謝的地方外，論文中不包含其他人已經發(fā)表或撰寫過的研究成果，也不包含為獲得我?；蚱渌逃龣C構的學位或證書而使用過的材料，與我同工作的同志對本研究所做的任何貢獻均已在論文中作了明確的說明并表示謝意。申請學位論文與資料若有不實之處，本人承擔一切相關責任。論文作者簽名第三軍醫(yī)大學研究生學位論文版權使用授權書本人完全了解第三軍醫(yī)大學有關保護知識產權的規(guī)定，即研究生在攻讀學位期間論文工作的知識產權單位屬第三軍醫(yī)大學。本人保證畢業(yè)離校后，發(fā)表論文或使用論文工作成果時署名單位為第三軍醫(yī)大學。學校有權保留并向國家有關部門或機構送交論文的復印件和磁盤，允許論文被查閱和借閱。學?？梢怨紝W位論文的全部或部分內容保密內容除外，可以采用影印、縮印或其他手段保存論文。論文作者簽名指導教師簽名日期釜一目錄眥Y帆1惴8㈣0M1帆9㈣670英文縮寫一覽表???????????????????????????????L英文摘要?????????????????????????????????．．3中文摘要?????????????????????????????????．．6論文正文泛素連接酶E3GP78的RNA干擾對MHCC97一H細胞生物學行為及KAII表達的影響?????????????????????8前言????????????????????????????????．．8日U舌????????????????????????????????．．子第一部分泛素連接酶E3GP78RNAI真核表達載體的構建及鑒定??．10實驗材料???????????????????????????????．10結果??????????????????????????????．．27討論???????????????????????????????．36第二部分GP78RNAI對MHCC97H細胞生物學行為的影響???????．．39實驗材料???????????????????????????????．39實驗方法???????????????????????????????．40結果???????????????????????????????．43討論???????????????????????????????．47第三部分MHCC97．H細胞株中GP78的RNA干擾對KALL表達的影響????．．49實驗材料???????????????????????????????．49實驗方法???????????????????????????????．49結果???????????????????????????????．50討論???????????????????????????????．54全文結論????????????????????????????????．56致謝????????????????????????????????．57參考文獻????????????????????????????????．58文獻綜述泛素連接酶E3GP78在惡性腫瘤中的研究進展????????．6L參考文獻????????????????????????????????．67在讀期間發(fā)表的文章???????????????????????????70

簡介：學校代碼10571學號2010010074MIR32對大腸癌細胞生物學行為影響及對PTEN調控機制的研究THEEFFECTOFMIR32ONBIOLOGICALBEHAVIORANDREGULATIONMECHANISMOFPTENBYMIR一32INCOLORECTALCANCERCELLS學科門類學科、專業(yè)研究方向年醫(yī)學內科學消化內科消化系疾病的基礎與臨床研究級二零一零級研究生姓名導師姓名楊靜芳周宇教授起止日期2010094201305廣東醫(yī)學院消化內科二。一三年五月目錄中文摘要1ABSTRACT31前言。611研究背景612研究目的一1013研究內容一112材料與方法1121材料1122方法173結果324討論435小結47參考文獻。48綜述。53綜述參考文獻58致謝。61附錄一縮寫詞中英文對照62附錄二在讀碩士期間科研情況63

簡介：山東大學博士學位論文脂氧合酶抑制劑NDGA對乳腺癌細胞MCF7生物學特性的影響及其機制探討姓名劉煥濤申請學位級別博士專業(yè)外科學（普外科）指導教師孫靖中20040412脂氧合酶抑制劑NDGA對乳腺癌細胞MCF一7生物學特性的影響及其機制探討專業(yè)外科學普外科博士研究生劉煥濤導師孫靖中教授摘要目的乳腺癌是威脅女性健康的主要疾病。目前公認的乳腺癌治療模式是以手術為主的全身性綜合治療，其中化療在整個綜合性治療中占有重要的地位?；熌軌蚵?lián)合其他治療方法有效地抑制腫瘤的侵襲和轉移，延長乳腺癌患者的生存時間，提高生活質量。但是，乳腺癌的侵襲擴散性和對化療的耐藥性是目前治療失敗的主要原因，往往在腫瘤被發(fā)現(xiàn)時即有轉移性病灶存在的可能，而且部分腫瘤細胞還獲得一定的耐藥性，這給乳腺癌的治療帶來困難。NDGA能夠抑制花生四烯酸通過脂氧合酶途徑進行代謝，是脂氧合酶的強烈抑制劑。最近研究發(fā)現(xiàn)NDGA能在體內外阻止乳腺癌、肝癌、肺癌、大腸癌及膠質瘤等多種腫瘤的發(fā)生，并抑制腫瘤細胞增殖，降低腫瘤對化療藥的耐藥性，但其分子機理尚不清楚。本研究采用體外細胞培養(yǎng)為研究工具，對乳腺癌MCF一7細胞系增殖和凋亡、5LOX、BCL一2、端粒酶、VEGF、CD44V6等各項指標進行檢測，研究探討NDGA對乳腺癌細胞系MCF一7生物學特性的影響，以便于我們進一步揭示脂氧合酶抑制劑的抗癌機制，為其臨床應用提供科學依據。材料和方法體外培養(yǎng)乳腺癌細胞系MCF．7，NDGA濃度設為L、LO、1001TMOL／L，采用對數(shù)生長期的細胞進行實驗。1觀察1～1000肛MOI／LNDGA對乳腺癌細胞系MCF7增殖動力學的影響MTT法繪制細胞生長藍線及檢測細胞存活率；2倒置相差顯微鏡、掃描電鏡觀察細胞的形態(tài)學變化；3流式細胞儀檢測細胞周期、細胞凋亡率、BEL．2及CD44V6的表達情況；4RTPCR