簡介：骨髓間充質(zhì)干細胞BMSCS對于促進前交叉韌帶重建術后的腱骨愈合具有積極的作用，最近的研究發(fā)現(xiàn)，前交叉韌帶中可以分離得到間充質(zhì)干細胞ACLMSCS，并且該細胞可以體外增殖及向骨、脂肪、軟骨等多向誘導分化。由于不同來源干細胞的增殖及分化潛能差異對臨床的選擇應用具有指導意義，而骨髓來源與前交叉韌帶來源的間充質(zhì)干細胞的體外生物學特性比較目前尚無明確報道。目的比較大鼠骨髓與前交叉韌帶來源的間充質(zhì)干細胞體外增殖及成骨、成軟骨及成脂分化潛能的差異。方法取SPF級6周齡雄性BN大鼠10只，體質(zhì)量200220G，在無菌的條件下分別取BN大鼠前交叉韌帶及骨髓，貼壁法培養(yǎng)獲取BMSCS與ACLMSCS并進行傳代，注意觀察細胞形態(tài)變化，取生長良好的P3代細胞用于以下實驗體外克隆形成實驗及CCK8法檢測增殖能力流式細胞儀檢測細胞免疫表型體外誘導多向分化實時定量PCR技術檢測成骨ALP、BGLAP、RUNX2、BMP2、SPP1、成軟骨COL2Α1、ACAN、SOX9及成脂（PPARΓ2及CEBPΑ）相關基因MRNA表達水平。結果P3代ACLMSCS和BMSCS形態(tài)學相似，均表現(xiàn)為貼壁生長的長梭形細胞。流式細胞儀檢測細胞表型顯示，兩種細胞均表達CD29、CD90，基本不表達CD45及CD34細胞增殖能力試驗和細胞克隆形成分析顯示ACLMSCS比BMSCS具有更強的體外增殖能力P0023＜005兩種干細胞均可體外誘導成骨、成脂、成軟骨分化分化相關基因檢測顯示ACLMSCS成軟骨分化相關基因COL2Α1、ACAN和SOX9P00003，P00020，P00064表達水平高于BMSCS。結論本研究表明ACLMSCS比BMSCS具有更強的體外增殖能力，在相同體外條件下更易向軟骨分化，是一種有潛力的促進腱骨愈合的種子細胞。

簡介：廈門大學學位論文原創(chuàng)性聲明本人呈交的學位論文是本人在導師指導下，獨立完成的研究成果。本人在論文寫作中參考其他個人或集體已經(jīng)發(fā)表的研究成果，均在文中以適當方式明確標明，并符合法律規(guī)范和廈門大學研究生學術活動規(guī)范試行。另外，該學位論文為厲涉舞課題組的研究成果’獲得C司晦課題組經(jīng)費或?qū)嶒炇业馁Y助，征壓門飆T扎酗嗆實驗室完成。請在以上括號內(nèi)填寫課題或課題組負責人或?qū)嶒炇颐Q，未有此項聲明內(nèi)容的，可以不作特別聲明。聲明人簽名■J鉗目錄目錄摘要IABSTRACT。。。。。。。。。。。。。。。。。Ⅳ前言1月Ⅱ吾111胃腸道間質(zhì)瘤概述112H3K與MAPK信號通路概述313FOX0L概述5參考文獻8第一章胃腸道間質(zhì)瘤細胞GISTT1細胞學鑒定及其腫瘤相關因子表達。1311材料與方法13111主要試劑及耗材13112主要儀器和設備1412細胞的培養(yǎng)1513免疫細胞化學染色法對GISTT1細胞腫瘤表面標志物CKIT進行檢測1514WESTERNBIOT檢測F0X01，BCL2，BAX蛋白在胃間質(zhì)瘤細胞系GISTT1中的表J達。1515結果。16151免疫細胞化學染色檢測胃間質(zhì)瘤細胞的標志物16152FOX01、BCL2、BAX蛋白在胃間質(zhì)瘤細胞系GISTT1中的表達1716寸論。18參考文獻。18

簡介：南方醫(yī)科大學2012級碩士學位論文氯通道CIC7對牙囊細胞生物學特性影響的體外研究／NVITROSTUDYOFCIC7’SEFFECTONTHEBIOLOGICALFUNCTIONOFDENTALFOLLICLECELLS課題來源國家自然科學基金81271116學位申請人導師姓名專業(yè)培養(yǎng)培養(yǎng)所在名稱類型岳祆學院答辯委員會主席答辯委員會委員王賀吳補領教授段小紅教授口腔臨床醫(yī)學專業(yè)型碩士研究生第一臨床醫(yī)學院凌均綮教授黃世光教授林正梅教授韋曦教授趙望泓教授2015年05月20日廣州摘要是牙萌出的必需條件之一，其在組織、細胞和分子多個水平上調(diào)控牙齒的萌出?；谘滥壹毎谘腊l(fā)育和萌出中的重要地位，為了驗證CIC一7在牙萌出中發(fā)揮重要功能的假說，本實驗采用小鼠牙囊細胞DENTALFOLLICLECELLS，DFCS為體外實驗模型；首先探索小鼠牙囊細胞體外分離培養(yǎng)的合適方法，其次檢測C1C7在DFCS的表達情況，并通過構建慢病毒SHRNA載體干擾DFCS中C1C7的表達，建立C1C一7缺陷的小鼠牙囊細胞模型，觀察C1C7表達降低后相關基因的變化在體外模擬成骨細胞和破骨前體細胞的相互作用，建立DFCS／MNCS骨髓單核細胞直接共培養(yǎng)體系，檢測DFCS中C1C一7表達降低后對形成破骨細胞分化和功能的影響通過采用人工成熟配方的礦化誘導液和模擬天然環(huán)境的牙本質(zhì)浸提液，分別對DFCS進行誘導，檢測兩種誘導液對DFCS成骨／成牙本質(zhì)／成牙骨質(zhì)分化中相關基因表達的影響，檢測DFCS中CIC7表達降低后對成骨／成牙本質(zhì)／成牙骨質(zhì)分化中相關基因表達和對礦化結節(jié)形成能力的影響。方法實驗一采用出生后3～5天的仔鼠，二次酶消化法分離牙囊細胞進行原代培養(yǎng)，觀察各代牙囊細胞生長狀態(tài)和特點，通過免疫細胞化學染色法檢測波形蛋白和角蛋白在所分離細胞的表達情況，鑒定細胞來源。實驗二構建慢病毒CLCN7SHRNA載體并體外轉(zhuǎn)染DFCS，QRTPCR檢測其對C1C7表達水平的干擾效果，并且檢測C1C7沉默后對DFCS破骨和成骨等相關功能分子表達水平變化的影響，免疫細胞化學染色法檢測CLC7在DFCS的表達情況。實驗建立DFCS／MNCS共培養(yǎng)體系，通過TRAP染色和牙片吸收實驗，即分別計數(shù)形成多核破骨樣細胞的數(shù)目、牙片上形成吸收陷窩的數(shù)目和面積，檢測降低DFCS的CIC7表達水平后對共培養(yǎng)體系中破骨細胞分化和功能的影響。實驗四采用礦化誘導液和牙本質(zhì)浸提液對DFCS進行誘導，QRTPCR檢測兩種誘導液對DFCS成骨／成牙本質(zhì)／成牙骨質(zhì)分化相關基因表達的影響，檢測II

簡介：學校代碼10459學號或申請?zhí)?01111440171密級公開博士學位論文人胚眼來源CKITSSEA4視網(wǎng)膜祖細胞生物學特性的實驗研究本課題受國家重點基礎研究發(fā)展計劃（項目批準號2013CB967001），國家自然科學基金（項目批準號31271400）資助作者姓名周朋義導師姓名彭廣華教授學科門類醫(yī)學專業(yè)名稱眼科學培養(yǎng)院系第一臨床學院完成時間2015年5月原創(chuàng)性聲明原創(chuàng)性聲明本人鄭重聲明所呈交的學位論文，是本人在導師的指導下，獨立進行研究所取得的成果。除文中已經(jīng)注明引用的內(nèi)容外，本論文不包含任何其他個人或集體已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的科研成果。對本文的研究作出重要貢獻的個人和集體，均已在文中以明確方式標明。本聲明的法律責任由本人承擔。學位論文作者日期年月日學位論文使用授權聲明學位論文使用授權聲明本人在導師指導下完成的論文及相關的職務作品，知識產(chǎn)權歸屬鄭州大學。根據(jù)鄭州大學有關保留、使用學位論文的規(guī)定，同意學校保留或向國家有關部門或機構送交論文的復印件和電子版，允許論文被查閱和借閱；本人授權鄭州大學可以將本學位論文的全部或部分編入有關數(shù)據(jù)庫進行檢索，可以采用影印、縮印或者其他復制手段保存論文和匯編本學位論文。本人離校后發(fā)表、使用學位論文或與該學位論文直接相關的學術論文或成果時，第一署名單位仍然為鄭州大學。保密論文在解密后應遵守此規(guī)定。學位論文作者日期年月日

簡介：溫州醫(yī)科大學碩士學位論文論文題目魚叢QE么I鰱E垡雙重縫籃L鰱壘坌￡細胞膛麥面的前至4腿瘟治痖性疫苴的制備獨生物堂效應的班究答期委員會主席鮭型壬差國掛立太堂匡堂蟲墜答辯委員會成員拯瞳蝰差國印箍塞納州童太堂工查明塹加縫監(jiān)廢醫(yī)堂班究壓昌越漁劃匡型太堂金型壅迢劃匡型態(tài)堂論文答辯EL期2Q至墨生墨且至墨目溫州醫(yī)科大學碩士學位論文25SAHGM_CSF／SAHTNF0【蛋白錨定LNCAP腫瘤細胞的疫苗對HPBMCNOD／SCID小鼠腫瘤模型治療效果3126免疫組織化學染色分析小鼠腫瘤中CD4、CD8T淋巴細胞的浸27免疫組織化學染色分析小鼠淋巴結組織中的人類白細胞抗原HLA3428免疫組織化學染色分析小鼠淋巴結組織中的CD4、CD8Z淋巴細胞的浸潤3629免疫組織化學染色分析HPBMCNOD／SCID小鼠肝臟組織中人CD4、CD8Z淋巴細胞的浸潤程度38210免疫組織化學染色分析HPBMCNOD／SCID小鼠脾臟組織中人CD4、CD8Z淋巴細胞的浸潤程度40211腫瘤小鼠模型與空白對照小鼠其生理狀況的差異42212HPBMCNOD／SCID小鼠肝臟中谷丙轉(zhuǎn)氨酶ALT的濃度432I3LNCAP腫瘤特異性細胞毒性分析CTL44214人源IFNY的檢測45215靜脈注射NK細胞拮抗劑后小鼠外周血中NK細胞的檢測46第三部分分析和討論47附錄52參考文獻53

簡介：脂肪間充質(zhì)干細胞ADIPOSEDERIVEDSTEMCELLS，ADSCS是從脂肪組織中提取的一種具有高度自我更新和多向分化潛能的多能干細胞，可以參與多種組織器官的再生修復，因其來源充足，取材方便等優(yōu)勢，具有良好的臨床應用前景。目前，自體ADSCS已在臨床用于軟組織缺損修復，其在治療心肌缺血和神經(jīng)退行性病變的應用也進入了臨床試驗階段。ADSCS的生物學特性是影響干細胞治療成敗的關鍵因素之一。隨年齡增加，細胞發(fā)生自然老化，而且已有研究證實年齡因素會影響機體多種干細胞的生物學功能。那么，ADSCS是否隨供者年齡增加而發(fā)生老化，從而導致其增殖、分化、遷移等生物學特性改變而最終影響修復功能還缺乏深入研究。研究目的明確不同年齡段人脂肪組織中間充質(zhì)干細胞含量和老化程度的差異，及其表現(xiàn)在增殖、分化、遷移等生物學特性上的改變，為深入了解年齡因素對干細胞特性的影響及機制提供更豐富的信息，為不同年齡人群自體ADSCS的臨床應用提供有效參考。研究內(nèi)容及方法從臨床獲取24例人右肋緣皮下切取脂肪組織，按供者年齡分布情況，分為三組A兒童組，年齡跨度612歲B青年組，年齡跨度2227歲C老年組，年齡跨度6073歲。通過酶消化法獲得HADSCS，擴增至第三代P3用于實驗檢測。采用ONEWAYANOVA及TUKEY檢驗對實驗結果進行多組定量資料的兩兩比較分析。具體研究內(nèi)容包括1單位體積脂肪SVF含量及HADSCS純度檢測膠原酶消化法獲得脂肪組織中有核細胞作為基質(zhì)血管成分STROMALVULARFRACTION，SVF，比較三組單位體積脂肪中的SVF含量差別SVF貼壁培養(yǎng)獲得HADSCS，流式分析P3代HADSCS干細胞表面標志物表達情況，比較三組符合干細胞表面標志表達要求的HADSCS比例。2細胞老化程度及相關機制檢測通過SAΒGAL染色對各年齡組P5代HADSCS老化程度進行評價利用MITOSOXTM熒光染色檢測活細胞線粒體超氧化物含量采用流式分析法檢測HADSCS過氧亞硝酸含量利用REALTIMEPCR檢測HADSCS端粒酶逆轉(zhuǎn)錄酶HTERT、組蛋白去乙?；窼IRT1表達水平，探索不同年齡組HADSCS出現(xiàn)老化程度差異的機制。3細胞增殖及凋亡檢測MTS法檢測各年齡組HADSCS增殖能力，并通過細胞周期分析及周期調(diào)控基因檢測探索其機制利用MUSE細胞狀態(tài)分析儀對細胞凋亡狀態(tài)進行檢測。4細胞成脂成骨分化能力檢測P3代HADSCS分別成脂成骨誘導培養(yǎng)，在不同時間點通過組化染色及REALTIMEPCR檢測成脂成骨分化關鍵表型標志基因表達，明確不同年齡組HADSCS的多向分化能力的差異。5細胞遷移能力及其機制檢測利用劃線法檢測無外源因子作用時HADSCS遷移能力利用TRANSWELL法檢測趨化因子作用下HADSCS的遷移能力。比較各年齡組HADSCS遷移能力的差異，并通過檢測各年齡組HADSCS趨化因子受體CXCR4和CXCR7的表達水平探討其機制。研究結果1各年齡組單位體積脂肪SVF含量分別為A組728105±552104個ML、B組632105±451104個ML、C組553105±988104個ML，細胞存活率均在80％左右，三組間無顯著差異。P3代HADSCS均高表達間充質(zhì)干細胞陽性表面標志物CD44、CD73、CD90、CD105，混合陰性標志物CD34、CD11B、CD19、CD45及HLADR的表達均低于5％，各年齡組符合間充質(zhì)干細胞表面標志物表達要求的HADSCS比例沒有顯著性差異。提示單純年齡因素不影響單位體積脂肪組織中SVF含量和擴增中HADSCS的純度。2SAΒGAL染色計數(shù)結果顯示老年組P5代HADSCS染色陽性細胞比例大于兒童組。進一步用MITOSOXTM熒光染色檢測活細胞線粒體超氧化物表達，結果顯示兒童組和青年組樣本染色陰性，而老年組樣本均呈陽性。流式細胞儀檢測HADSCS過氧亞硝酸含量，結果顯示隨年齡增長過氧亞硝酸含量有升高趨勢，老年組與兒童組有統(tǒng)計學差異。而且，老年組HADSCS的HTERT，SIRT1的表達水平較兒童組和青年組有下降趨勢。以上結果提示老年組HADSCS老化程度更高。3細胞增殖實驗結果顯示隨供者年齡增長，HADSCS增殖速率有減慢趨勢，但各組間無顯著差異。從細胞周期角度分析發(fā)現(xiàn)，老年組HADSCS處于S期的細胞比例較其他兩組顯著降低，原癌基因CJUN、CFOS表達也有降低趨勢，且周期素依賴激酶抑制基因P21表達顯著增高，提示老年組HADSCS可能發(fā)生了細胞周期阻滯，由G1期進入S期速率減慢。各年齡組HADSCS細胞凋亡分布狀態(tài)及凋亡調(diào)控基因BCL2、NFΚB、CASPASE8的表達水平無顯著差異。上述結果提示隨年齡增長，HADSCS的細胞周期發(fā)生改變，從而影響其增殖潛能。4HADSCS成脂誘導早期D4，兒童組成脂相關基因CEBPΑ、PPARΓ、ADIPONECTIN、LPL、FABP4的表達顯著高于青年組和老年組，但誘導中晚期D8，D12差異消失。油紅O染色及半定量分析顯示三組在誘導不同時間點甘油三酯生成量無顯著差異。而且成脂酶相關基因及能量代謝基因的表達在各組間無顯著性差異。提示年齡因素對HADSCS的成脂分化潛能無顯著影響。HADSCS成骨誘導早期D7，老年組成骨相關基因RUNX2、OCN、OPN、BMP2的表達水平既顯著低于兒童組。至誘導晚期D21，茜素紅染色半定量檢測顯示老年組成骨誘導礦化水平顯著低于兒童組，且礦化基因OPN的表達顯著低于兒童組。提示老年供者HADSCS的成骨分化能力較兒童組顯著降低。5細胞遷移實驗結果顯示老年組HADSCS細胞遷移能力顯著低于兒童組，進一步研究顯示老年組HADSCS趨化因子受體CXCR4和CXCR7的表達水平較兒童組有降低趨勢，提示趨化因子受體表達降低可能是其遷移能力下降的原因之一。研究結論1年齡因素對胸部皮下單位體積脂肪SVF含量及擴增的HADSCS純度無顯著影響。2年齡因素影響HADSCS的老化程度老年個體HADSCS老化程度更高，細胞內(nèi)ROS含量升高導致氧化應激加強可能是其發(fā)生機制之一。3年齡因素影響HADSCS的增殖能力老年個體HADSCS出現(xiàn)增殖減緩的趨勢，可能與老年組HADSCS發(fā)生周期阻滯有關。4年齡因素影響HADSCS的分化潛能老年個體HADSCS的體外成脂分化潛能無顯著變化，但成骨分化潛能降低，提示老年患者自體HADSCS用于成骨相關治療的可行性降低。5年齡因素影響HADSCS的遷移能力老年組HADSCS遷移能力降低，其表面趨化因子受體CXCR4和CXCR7表達水平下降可能是其原因之一。綜上，年齡因素對胸部切取單位體積脂肪SVF含量沒有顯著影響但隨年齡增長，HADSCS老化程度更高，表現(xiàn)出增殖、分化及遷移能力的相應降低。本研究不僅檢測了干細胞生物學表現(xiàn)的變化，而且對相應機制進行了初步探討，為深入了解年齡因素對干細胞特性的影響及機制提供更豐富的信息，為不同年齡人群HADSCS的臨床應用提供有效參考。

簡介：分類號R7351UDC密級重慶醫(yī)科大學碩士學位論文論文題目干擾干擾YAP1對食管癌對食管癌ECA109細胞生物學功能的影響細胞生物學功能的影響作者姓名宋杰申請學位級別碩士學科、專業(yè)名稱外科學（胸心外科學）外科學（胸心外科學）論文答辯年月2015年5月2015年5月指導教師姓名（職稱、單位名稱）吳慶琛吳慶琛教授教授重慶醫(yī)科大學臨床學院重慶醫(yī)科大學臨床學院重慶醫(yī)科大學碩士研究生學位論文重慶醫(yī)科大學碩士研究生學位論文英漢縮略語名詞對照英漢縮略語名詞對照英文縮寫英文縮寫英文全稱英文全稱中文全稱中文全稱YAP1YESASSOCIATEDPROTEIN1YES相關蛋白1QRCPREALTIMEQUANTITATIVEPCR實時熒光定量PCRMRNAMESSENGERRNA信使RNACCK8CELLCOUNTINGKIT8細胞計數(shù)試劑盒8RNAIRNAINTERFERENCERNA干擾SDSPAGESODIUMDODECYLSULFATEPOLYACRYLAEGELELECTROPHESIS十二烷基硫酸鈉聚丙烯酰胺電泳ECLELECTROCHEMILUMINESCENCE電化學發(fā)光SHRNASHTHAIRPINRNA短發(fā)夾RNADDAY天HHOUR小時SSECOND秒MINMINUTE分BPBASEPAIR堿基對MOIMULTIPLEOFINFECTION感染復數(shù)CDNACOMPLEMENTARYDNA環(huán)腺苷酸BCABICINCHONINICACID二喹啉酸PVDFPOLYVINYLIDENEFLUIDE聚偏二氟乙烯PBSPHOSPHATEBUFFERSALINE磷酸緩沖液DOPTICALDENSITY光密度值EAEARLYAPOPTOTISIS早期凋亡TEADTEADOMAINTEA結構域FCMFLOWCYTOMETRY流式細胞術

簡介：骨關節(jié)炎OSTEOARTHRITIS，OA是一種嚴重危害中老年人身心健康的退行性關節(jié)疾病，主要病理變化為關節(jié)軟骨的磨損及退變，臨床上常出現(xiàn)關節(jié)疼痛反復發(fā)作、關節(jié)活動障礙而且不斷加重等癥狀。關節(jié)軟骨主要包括軟骨細胞CHONDROCYTE和細胞外基質(zhì)EXTRACELLULARMATRIX，ECM兩種組分。目前，OA的發(fā)病機理仍不清楚，針對軟骨細胞的損傷進行研究對于闡明OA的發(fā)病機制有重要意義，為OA的預防及干預治療提供理論依據(jù)。MICRNASMIRNAS是一種普遍存在于真核生物中的單鏈RNA分子，一般長度約為17～25NT。MIRNA可能存在于基因組的各個區(qū)域，例如基因的間隔區(qū)、編碼基因的內(nèi)含子區(qū)。MIRNA參與調(diào)控許多生命活動，例如細胞增殖、細胞分化、細胞凋亡和器官發(fā)育等。目前研究表明，MIRNA在OA的發(fā)生與發(fā)展進程中有非常重要的意義。目的本研究旨在探討MIR5025P在正常和OA軟骨組織中的表達水平差異，進而研究MIR5025P對IL1Β誘導的軟骨細胞損傷的生物學作用及其作用機制，為OA疾病探尋新的治療靶點并提供新的理論依據(jù)。方法MIR5025P在OA軟骨組織中的表達及其生物學作用的研究。首先，用RTPCR方法檢測了四個預測的MIRNASMIR5025P、MIR138、MIR205、MIR146A在20組正常和OA軟骨組織中的表達水平差異。用胰蛋白酶及Ⅱ型膠原酶聯(lián)合消化法分離培養(yǎng)正常的軟骨細胞，然后作不同處理，分為四組對照組，正常培養(yǎng)的軟骨細胞IL1Β組，用IL1Β處理的軟骨細胞MIR5025PMIMIC組，轉(zhuǎn)染MIR5025PMIMIC后再用IL1Β誘導軟骨細胞陰性對照組，轉(zhuǎn)染MIR5025PNEGATIVECONTROL后再用IL1Β誘導軟骨細胞。RTPCR方法檢測不同處理組MIR5025P的表達水平差異。MTT方法檢測不同處理組的細胞增殖水平。流式細胞儀檢測不同處理組的細胞凋亡水平。WESTERNBLOT方法檢測不同處理組凋亡相關蛋白BCL2、BAX和CASPASE3的蛋白表達水平。RTPCR和WESTERNBLOT方法檢測不同處理組促炎因子IL6、TNFΑ和IL8的表達水平。RTPCR和WESTERNBLOT方法檢測不同處理組ECM結構蛋白蛋白聚糖和Ⅱ型膠原、金屬蛋白酶MMP3、MMP9和MMP13的表達水平。關于WNTΒCATENIN信號通路與MIR5025PP53調(diào)控回路關系的研究。RTPCR和WESTERNBLOT方法檢測了P53在20組正常和OA軟骨組織中的表達水平差異。分離培養(yǎng)正常的軟骨細胞，首先探究P53對MIR5025P的調(diào)控作用，對軟骨細胞作不同處理后分為四組對照組，正常培養(yǎng)的軟骨細胞IL1Β組，用IL1Β處理軟骨細胞SIP53IL1Β組，轉(zhuǎn)染P53SIRNA，再用IL1Β誘導軟骨細胞陰性對照組，轉(zhuǎn)染P53NEGATIVECONTROL，再用IL1Β誘導軟骨細胞。關于MIR5025P的靶標基因及相關通路的研究。RTPCR和WESTERNBLOT方法檢測了TRAF2在20組正常和OA軟骨組織中的表達水平差異。胰蛋白酶及Ⅱ型膠原酶聯(lián)合消化法分離培養(yǎng)正常的軟骨細胞。構建TRAF23UTR的熒光素酶報告載體，熒光素酶報告實驗研究MIR5025P對TRAF2的調(diào)控作用。結果MIR5025P在OA軟骨組織中的表達下調(diào)，且發(fā)揮重要的生物學作用。與正常對照組相比，OA軟骨組織中MIR5025P的表達顯著下調(diào)。IL1Β處理軟骨細胞使MIR5025P的表達顯著下調(diào)。MIR5025PMIMIC的轉(zhuǎn)染使MIR5025P表達明顯提升。與對照組相比，IL1Β組的細胞增殖率下降細胞凋亡率顯著增加抗凋亡蛋白BCL2表達顯著下調(diào)，凋亡蛋白BAX和CASPASE3的表達顯著上調(diào)IL6、IL8和TFΑ的MRNA和蛋白表達水平顯著上升Ⅱ型膠原和蛋白聚糖的MRNA和蛋白表達顯著下調(diào)，而MMP3、MMP9和MMP13等金屬蛋白酶的MRNA和蛋白表達顯著上調(diào)。與IL1Β組相比，MIR5025PMIMIC組的細胞增殖率有顯著上調(diào)凋亡率顯著降低抗凋亡蛋白BCL2表達顯著上調(diào)，而凋亡蛋白BAX和CASPASE3的表達顯著下調(diào)IL6、IL8和TNFΑ的MRNA和蛋白表達水平顯著下降Ⅱ型膠原和蛋白聚糖的MRNA和蛋白表達都有顯著升高，而MMP3、MMP9和MMP13的MRNA和蛋白表達顯著下降。表明WNTΒCATENIN信號通路通過調(diào)控P53，進而調(diào)控MIR5025P的表達。與正常對照組相比，OA軟骨組織中P53的MRNA和蛋白表達水平顯著上調(diào)，而且P53與MIRNA5025P的表達呈負相關關系。與對照組相比，IL1Β組P53的蛋白表達水平顯著上調(diào)MIR5025P的表達水平顯著下降MIR5025P啟動子活性顯著降低。與IL1Β組相比，SIP53組P53的蛋白表達顯著降低MIR5025P的表達水平顯著升高MIR5025P的啟動子活性顯著上升。與對照組相比，IL1Β組P53的MRNA和蛋白水平顯著升高PGL3P533UTR的熒光素酶活性無顯著變化與IL1Β組相比，MIR5025PMIMIC組P53的蛋白水平顯著降低，而MRNA水平無顯著差異PGL3P533UTR的熒光素酶活性無顯著變化。與正常對照組相比，OA軟骨組織中WNT蛋白WNT1和WNT3A的表達顯著上調(diào)，ΒCATENIN的表達水平也顯著上調(diào)。與對照組相比，IL1Β組WNT3A、ΒCATENIN和P53的表達水平上調(diào)MIR5025P的表達水平顯著下降。與IL1Β組相比，WNT3A抑制劑組WNT3A、ΒCATENIN和P53的表達水平均顯著下調(diào)MIR5025P的表達水平顯著升高。MIR5025P的靶基因TRAF2及TRAF2介導的NFΚB信號通路研究。與正常對照組相比，OA軟骨組織中TRAF2的MRNA和蛋白表達水平顯著上調(diào)，而且TRAF2與MIRNA5025P的表達呈負相關關系。通過軟件預測出MIR5025P與TRAF23UTR存在靶標關系。與MIR5025P陰性對照轉(zhuǎn)染組相比，MIR5025PMIMIC轉(zhuǎn)染組的PGL3TRAF23UTR載體熒光素酶活性顯著降低，同時PGL3TRAF23UTRMUT載體的熒光素酶活性無顯著變化。與對照組相比，IL1Β組TRAF2的MRNA和蛋白表達水平都顯著升高與IL1Β組相比，MIR5025PMIMIC組TRAF2的MRNA和蛋白表達水平顯著下調(diào)。與對照組相比，IL1Β組誘導NFΚB通路的激活，使NFΚB蛋白表達水平顯著上調(diào)，而IΚBΑ蛋白表達水平顯著下調(diào)細胞增殖率下降細胞凋亡率顯著增加IL6、IL8和TNFΑ的蛋白表達水平顯著增加Ⅱ型膠原和蛋白聚糖的蛋白表達水平顯著減少，而MMP3、MMP9和MMP13等金屬蛋白酶的表達顯著上升。與IL1Β組相比，PDTC組、MIR5025PMIMIC組和SITRAF2組抑制NFΚB信號通路的激活，使NFΚB表達水平顯著下降，而IΚBΑ表達顯著升高細胞增殖率顯著升高細胞凋亡率顯著下降IL6、IL8和TNFΑ的蛋白表達水平顯著降低Ⅱ型膠原和蛋白聚糖的蛋白水平顯著升高，而MMP3、MMP9和MMP13等蛋白酶的表達顯著降低。結論綜上所述，本研究結果表明MIR5025P在OA軟骨組織和IL1Β誘導的軟骨細胞中表達顯著下調(diào)，對IL1Β誘導的軟骨細胞損傷有保護作用，包括促進軟骨增殖，減少細胞凋亡，降低炎癥因子的生成以及促進ECM代謝平衡。P53可以調(diào)控MIR5025P的轉(zhuǎn)錄進而影響其表達，而MIR5025P能夠反向抑制P53的表達，表明MIR5025P與P53形成一個負反饋調(diào)控回路。WNTΒCATENIN通過正向調(diào)控P53的表達影響MIR5025PP53負反饋調(diào)節(jié)回路。進一步機制分析表明，MIR5025P靶向調(diào)節(jié)TRAF23UTR，降低其表達，進而抑制TRAF2介導的NFΚB信號通路，以此降低IL1Β誘導的軟骨細胞損傷，發(fā)揮抗凋亡、抗炎和抗基質(zhì)降解等生物學功能。我們的研究表明MIR5025P有望成為OA防治的新靶點，為OA的預防和治療提供新的研究方向。

簡介：分類號L一坩【密級Ⅲ刪_|I_|_】||I|I|I|川Ⅷ㈣Y3245025單位代碼學號1031220141849南京醫(yī)針犬掌碩士學位論文題目塹型噬Z控劍劑璉題厘擅緝胞壘塹堂盈艟數(shù)受蛔研究生指導教師學科專業(yè)學院名稱完成時間籃至態(tài)__工蕉述2處盟芏L益絲鹽整2直塞匡筮盤堂瞪屜絲塞筮二。匡瞳三Q二生亙復南京醫(yī)科大學學位論文原創(chuàng)性聲明本人夭|5重聲明所呈躉的論文是本人征導帥的指導卜，獨立進行研冗工作所取得的成果。除了文中特別加以標注引用的內(nèi)容外，本論文不包含任何其他個人或集體己經(jīng)發(fā)表或撰寫的成果作品。對本文的研究做出重要貢獻的個人和集體，均己在文中以明確方式標明。本人完全意識到本聲明的法律后果由本人承擔。作者簽名繕上起日期加F7年6月歹日導師簽名7。2／釗擴日期沙，7年石月歹日學位論文版權使用授權書本學位論文作者完全了解學校有關保留、使用學位論文的規(guī)定，同意學校保留并向國家有關部門或機構送交論文的復印件和電子版，允許論文被查閱和借閱。本人授權南京醫(yī)科大學可以將本學位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關數(shù)據(jù)庫進行檢索，可以采用影印、縮印或掃描等復制手段保存和匯編本學位論文。本學位論文屬于請在以下相應方框內(nèi)打“√”1、保密口，在一年解密后適用本授權書。2、不保密作者簽名銘冬衛(wèi)匙日期Z口／7年／月歹日翮躲7馴眺秒年多月廠日

簡介：廣西醫(yī)科大學GUANGXIMEDICALUNIVERSITY【IIIIIIIHIIIIIIIIHLIIIIIIIIIIY3246283學號2L320831碩士學位論文人舌癌阿霉素耐藥細胞系的克隆形態(tài)觀察及克隆生物學特性的研究導師姓名姚金光龐子燕申請學位類型專業(yè)型學位答辯委員會主席王代友答辯委員會委員鄺曉聰廖明華龍喜帶陳秉樸專業(yè)名稱口腔醫(yī)學基本情況姓名龐子燕民族漢族籍貫廣西欽州市學習工作經(jīng)歷起止時間20089201362013920166個人簡歷性別女出生年月1989年11月政治面貌中共黨員所在院?；騿挝粚W歷學位湖北醫(yī)藥學院口腔醫(yī)學院學士廣西醫(yī)科大學碩士研究生期間臨床工作經(jīng)歷起止時間單位2014022420140831右江民族醫(yī)學院附屬醫(yī)院牙體牙髓科2014090120140930右江民族醫(yī)學院附屬醫(yī)院口腔黏膜科2014100120150331右江民族醫(yī)學院附屬醫(yī)院牙周科2015。040120150630右江民族醫(yī)學院附屬醫(yī)院兒童口腔科201507012015103L右江民族醫(yī)學院附屬醫(yī)院口腔頜面外科2015110120160430右江民族醫(yī)學院附屬醫(yī)院口腔修復科2016050120160630右江民族醫(yī)學院附屬醫(yī)院口腔頜面外科賺無無無無無無無

簡介：ATHESISDISSERTATIONSUBMITTEDTOZHENGZHOUUNIVERSITYFORTHEDEGREEOFDOCTORPROTEOMICAPPROACHESFORTHEBIOLOGICALCOLLABORATIVENETWORKSOFHEPATOBLASTOMABYMINGYUESUPERVISORJIAXIANGWANGPEDIATRICSURGERYTHEFIRSTAFFILIATEDHOSPITALOFZHENGZHOUUNIVERSITYMAY2016摘要蛋白質(zhì)組學對肝母細胞瘤生物學協(xié)同網(wǎng)絡構建的研究摘要1研究背景與研究目的肝母細胞瘤是一種常見的多能干細胞分化的肝臟腫瘤，研究顯示肝母細胞瘤患者的生存率都隨著其分期的升高而下降。目前常用的診斷、判斷預后的血清標志物是甲胎蛋白，但在多種疾病及正常新生兒、小嬰兒中均升高，特異性較低。由此可見，利用現(xiàn)有的實驗技術尋找一種高特異性、高敏感性的肝母細胞瘤早期檢測方法迫在眉睫。蛋白質(zhì)組學在腫瘤中的研究可以用于疾病早期診斷、療效監(jiān)測和預后判斷等方面。目前，已有成功檢測出腎母細胞瘤、卵巢癌、乳腺癌等癌癥的生物學標記物。本研究組前期應用蛋白質(zhì)組學對腎母細胞瘤血清、瘤體組織進行了深入的研究，研究得出的生物學標記物目前已進入動物實驗階段，試驗結果初步表明蛋白質(zhì)組學可篩選、鑒定出可靠的高特異性、高敏感性標記物；本實驗室前期蛋白質(zhì)組學已初篩出肝母細胞瘤的血清生物標記物，本研究進一步細化分組，深入研究，驗證前期試驗結果，并對該標記物在不同分期、不同手術方式、不同診療階段患者的血清學生物表達，迸一步研究該標記物與肝母細胞瘤的關系及對腫瘤的影響。2材料與方法21實驗材料本課題選取肝母細胞瘤患者血清樣本294例份，健康對照組血清80例份。分為術前組根據(jù)PRETEXT分期I期10例，II期17，III期38例、IV期15例、術后組、化療組、治愈組、復發(fā)組。取材條件晨起、空腹、外周靜脈血5ML，4。C下靜置LH，3000R／MIN離心15MIN，取上清液。所有病理結果均經(jīng)過兩次病理學檢驗無誤。

簡介：近年來心血管類疾病發(fā)病率逐年升高，成為威脅人類健康的三大疾病之一，心血管疾病領域的研究備受關注。心肌梗死、心力衰竭等心血管類疾病，其病程發(fā)展到一定階段后，都出現(xiàn)了不同程度的心肌纖維化這樣的共同病理改變，導致心臟剛度增加，進而影響心肌成纖維細胞的增殖，促進心肌纖維化的發(fā)生，最終導致心力衰竭。本研究在體外模擬基底不同力學環(huán)境，并探討其對心臟成纖維細胞增殖分化的影響，以期為認識心肌纖維化等疾病發(fā)生發(fā)展的病因及可能的治療新策略提供實驗依據(jù)。探討了在基底不同剛度下心肌成纖維細胞的黏附形態(tài)及增殖分化。制作不同配比的聚丙烯酰胺水凝膠（PAHG），通過改變交聯(lián)劑甲叉雙丙烯酰胺濃度，分別制作01％、03、05、06不同剛度的PAHG基底，研究心肌成纖維細胞在不同剛度的PAHG基底和玻璃基底（STIFF）上，細胞形態(tài)、增殖、分化等生物學響應。結果顯示，大鼠乳鼠心肌成纖維細胞在01，03基底（小于心臟楊氏模量，模量約為310KPA）上培養(yǎng)，并不利于其黏附和增殖，心肌成纖維細胞基本沒有分化；在05，06（接近心臟楊氏模，模量為1220KPA）基底上培養(yǎng)，剛度更大的STIFF基底（遠大于心臟楊氏模量，模量約為GPA級）上培養(yǎng)，細胞能迅速適應基底剛度，并快速黏附和增殖，隨著基底模量的增加心肌成纖維細胞向肌成纖維細胞分化明顯，在STIFF基底上，心肌成纖維細胞幾乎全部分化為肌成纖維細胞。實驗數(shù)據(jù)分析顯示01和03基底間增殖率差異顯著，P005；01，03分別與05，06基底間增殖率差異極顯著，P在心肌成纖維細胞對基底剛度響應的研究基礎上，探討與細胞增殖分化相關的信號通路，以期通過阻斷相關信號分子表達起到干預心肌成纖維細胞增殖的目的。進一步工作將開展三維力學環(huán)境對心肌成纖維細胞增殖分化的研究，三維環(huán)境更接近于機體內(nèi)真實環(huán)境，能反映機體內(nèi)由于力學因素改變對細胞增殖分化的影響，以及參與此過程的相關信號途徑，對更好的了解心梗類、心肌纖維化等病程發(fā)展，進而發(fā)展對心肌纖維化等疾病治療的新策略。本文主要內(nèi)容分為六章第一章緒論，主要綜述了近年來國內(nèi)外關于力學環(huán)境下（如拉伸力，基底剛度）對細胞的形態(tài)，增殖，遷移等的生物學影響。第二章，心肌成纖維細胞的分離純化，主要介紹大鼠乳鼠心肌成纖維細胞的分離及純化。第三章，心肌成纖維細胞鑒定，主要對本文用到的實驗材料心肌成纖維細胞進行VIMENTIN、DDR2免疫組織化學染色。第四章，不同PAHG基底制備及細胞培養(yǎng)，以丙烯酰胺為原料，通過改變交聯(lián)劑甲叉雙丙烯酰胺濃度，制作出不同剛度PAHG基底，并進行細胞培養(yǎng)。第五章，不同基底剛度下心肌成纖維細胞的增殖及分化，對不同剛度基底上培養(yǎng)的心肌成纖維細胞進行EDU增殖檢測、ΑSMA免疫組織化學染色，分析心肌成纖維細胞的增殖情況，以及向肌成纖維細胞分化情況。第六章，總結與展望，總結實驗所得主要結論，對后續(xù)工作進行展望。

簡介：甲狀旁腺激素對去勢大鼠骨髓間充質(zhì)干細胞甲狀旁腺激素對去勢大鼠骨髓間充質(zhì)干細胞生物學特性影響的研究生物學特性影響的研究軒詩杰培養(yǎng)類別全日制學位類型學術學位一級學科專業(yè)類口腔醫(yī)學二級學科專業(yè)口腔臨床醫(yī)學研究方向牙槽骨改建與修復再生指導教師丁寅教授（主任醫(yī)師）培養(yǎng)單位口腔醫(yī)院正畸科二O一七年五月分類號R7835UDC61631密級公開第四軍醫(yī)大學碩士學位論文目錄縮略語表1中文摘要3英文摘要6前言10文獻回顧12正文26第一部分去勢大鼠骨質(zhì)疏松模型的構建及PTH134給藥261材料2611實驗動物2612藥物、試劑及器材262方法2621實驗動物及分組2622絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松大鼠模型的構建273結果2931一般情況2932大鼠骨質(zhì)疏松模型的構建以及PTH134對相關骨形態(tài)參數(shù)的影響2933骨組織學觀察324討論3341骨質(zhì)疏松模型的構建3342骨質(zhì)疏松動物模型的評價方法3443動物實驗層面上PTH對骨代謝的影響34第二部分BMMSCS的分離、培養(yǎng)和鑒定351材料3511實驗儀器35

簡介：科大學CAIUNIVERSITY學號201420S48碩士學位論文CASK過表達慢病毒載體的構建及其對H1299細胞生物學功能特性的影響覃覓導師姓名周華富專業(yè)名稱外科學申請學位類型學術型學位答辯委員會主席林輝答辯委員會委員曾建業(yè)鄭寶石郭建極馮旭二O一七年五月基本情況姓名覃覓民族土家族籍貫湖北宜昌學習工作經(jīng)歷起止時間20089201362014920176個人簡歷所在院?；騿挝蝗龒{大學廣西醫(yī)科大學研究生期間科研經(jīng)歷／臨床工作經(jīng)歷項目起止時間性別男出生年月19901政治面貌共青團員學歷學位學士學位碩士學位職稱無無項目名稱項目來源熏皇荔差覃翥萎蒜舅黯肺癌桂科攻標志物及早期診斷方案的研究～“臨床工作時間工作單位廣西醫(yī)科大學第一附屬醫(yī)院職稱實習醫(yī)師

簡介：分類號R733密級公開UDC616006編號10299Z1313038JIANGSUUNIVERSITY專業(yè)專業(yè)學位碩士學位論文學位碩士學位論文THESISFORPROFESSIONALMASTERDEGREE碩士類別碩士類別專業(yè)型專業(yè)型論文題目論文題目ZIC1基因轉(zhuǎn)染聯(lián)合姜黃素對基因轉(zhuǎn)染聯(lián)合姜黃素對人乳腺癌人乳腺癌MDAMB231MDAMB231細胞生物學行為的影響胞生物學行為的影響學科專業(yè)學科專業(yè)外科學外科學作者姓名作者姓名史春桃史春桃指導教師指導教師丁厚中丁厚中答辯日期答辯日期20160611獨創(chuàng)性聲明本人鄭重聲明所呈交的學位論文，是本人在導師的指導下，獨立進行研究工作所取得的成果。除文中已注明引用的內(nèi)容以外，本論文不包含任何其他個人或集體已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的作品成果，也不包含為獲得江蘇大學或其他教育機構的學位或證書而使用過的材料。對本文的研究做出重要貢獻的個人和集體，均已在文中以明確方式標明。本人完全意識到本聲明的法律結果由本人承擔。學位論文作者簽名年月日