簡(jiǎn)介：食品微生物學(xué),,2024年4月1日,第十二章、微生物與食品安全性,微生物污染食品而危害健康最易發(fā)生，而且較為多見。微生物污染主要有細(xì)菌與細(xì)菌毒素、霉菌與霉菌毒素。,第二節(jié)細(xì)菌性食物中毒,一食物中毒概述㈠食物中毒的概念食品衛(wèi)生國家標(biāo)準(zhǔn)GBL493894食物中毒診斷標(biāo)準(zhǔn)及技術(shù)處理總則對(duì)食物中毒給予了界定。食物中毒，指攝入了含有生物性、化學(xué)性有毒有害物質(zhì)的食品或者把有毒有害物質(zhì)當(dāng)作食品攝入后出現(xiàn)的非傳染性不屬于傳染病的急性、亞急性疾病。,第二節(jié)細(xì)菌性食物中毒,㈡食物中毒的特點(diǎn)食物中毒常呈集體性暴發(fā)，其種類很多，病因也很復(fù)雜，一般具有下列共同特點(diǎn)①潛伏期較短，來勢(shì)急劇，在短時(shí)間內(nèi)可能有很多人同時(shí)發(fā)病。②病人都有大致相同的臨床表現(xiàn)。③發(fā)病和吃某種有毒食品有關(guān)。凡進(jìn)食這種有毒食品的人大都發(fā)病，未進(jìn)食該種有毒食品的人不發(fā)病。發(fā)病和食物有明顯關(guān)系，一旦停止食用這種有毒食品，發(fā)病立即停止。④發(fā)病率高，人與人之間不直接傳染。,第二節(jié)細(xì)菌性食物中毒,㈢食物中毒的分類食物中毒多種多樣，其分類有按食品中所含病因的種類而分類者；有按食物中毒發(fā)病機(jī)理而分類者；也有按癥狀的異同而分類者。最常見的分類方法是按病原物質(zhì)分類，將食物中毒分為五類。,第二節(jié)細(xì)菌性食物中毒,⑴細(xì)菌性食物中毒。指因攝入細(xì)菌性有毒食品引起的急性或亞急性疾病。細(xì)菌性食物中毒是食物中毒中最常見的一類，通常有明顯的季節(jié)性，多發(fā)生于氣候炎熱的季節(jié)，一般以5～10月份最多。發(fā)病率較高，但病死率一般較低。⑵真菌性食物中毒。,指食入被真菌及其毒素污染食物而引起的食物中毒。有一定的地區(qū)性，如霉變甘蔗中毒發(fā)生在北方。季節(jié)性因真菌繁殖、產(chǎn)毒的最適溫度不同而異。發(fā)病率較高，病死率因真菌的種類不同而異。⑶動(dòng)物性食物中毒。指攝入動(dòng)物性有毒食品引起的食物中毒。發(fā)病率和病死率因動(dòng)物性中毒食品種類不同而異，有一定的地區(qū)性。如河豚魚中毒常見于海河交界地區(qū)，病死率高。,第二節(jié)細(xì)菌性食物中毒,⑷植物性食物中毒。攝入植物性中毒食品引起的食物中毒。如毒蕈、發(fā)芽馬鈴薯、木薯等引起的中毒。季節(jié)性、地區(qū)性比較明顯，多散在發(fā)生，發(fā)病率、病死率因引起中毒的食品種類不同而異。⑸化學(xué)性食物中毒。攝入化學(xué)性有毒食品引起的食物中毒。季節(jié)性、地區(qū)性均不明顯。發(fā)病率、病死率一般都比較高。如農(nóng)藥、亞硝酸鹽中毒等。,㈣葡萄球菌食物中毒葡萄球菌食物中毒系毒素型食物中毒。葡萄球菌食物中毒是由于進(jìn)食含有一種或多種含葡萄球菌腸毒素的食物所引起。雖然目前已經(jīng)知道許多既不產(chǎn)生凝固酶也不產(chǎn)生耐熱核酸酶的葡萄球菌也能產(chǎn)生腸毒素，但一般認(rèn)為引起食物中毒的腸毒素的產(chǎn)生與產(chǎn)生凝固酶和核酸酶耐熱核酸酶的金黃色葡萄球菌有關(guān)。,第二節(jié)細(xì)菌性食物中毒,1病原菌。革蘭氏陽性需氧或兼性厭氧菌，觸酶陽性，氧化酶陰性，無運(yùn)動(dòng)力。2分類。葡萄球菌屬于微球菌科的葡萄球菌屬STAPHYLOCOCCUS。1996年，已經(jīng)歸類于葡萄球菌屬的菌種有31種，其中與食品有關(guān)的菌種列出的18個(gè)種和亞種中，僅有6種為凝固酶陽性。凝固酶陽性葡萄球菌是與食品有關(guān)的重要菌種。,3腸毒素。金黃色葡萄球菌可產(chǎn)生多種毒素和酶，故致病性強(qiáng)。近年的報(bào)告表明，50％以上的金黃色葡萄球菌菌株在實(shí)驗(yàn)室條件下能夠產(chǎn)生腸毒素，并且一個(gè)菌株能夠產(chǎn)生兩種或兩種以上的腸毒素，能產(chǎn)生腸毒素的菌株凝固酶試驗(yàn)常呈陽性。腸毒素是結(jié)構(gòu)相似的一組可溶性蛋白質(zhì)，分子量26000～34000U，耐熱，抗酸，能經(jīng)受L00℃30MIN或胃蛋白酶的水解。,第二節(jié)細(xì)菌性食物中毒,4食物中毒癥狀及發(fā)生原因⑴食物中毒癥狀。主要癥狀為急性胃腸炎癥狀。⑵中毒發(fā)生的原因。葡萄球菌食物中毒是因?yàn)楫a(chǎn)生腸毒素的葡萄球菌污染了食品，在較高的溫度下大量繁殖，適宜的PH和適合的食品條件下產(chǎn)生了腸毒素，吃了這樣的食品就可以發(fā)生中毒。,5引起中毒的食品及污染途徑引起葡萄球菌腸毒素中毒的食品種類很多，主要為肉、奶、魚、蛋類及其制品等動(dòng)物性食品，含淀粉較多的糕、涼拌切粉、剩大米飯和米酒等也曾引起過中毒。國內(nèi)報(bào)道以奶和奶制品以及用奶制作的冷飲冰激凌、冰棍和奶油糕點(diǎn)等最為常見。近年，由熟雞、鴨制品污染引起的中毒增多。,第二節(jié)細(xì)菌性食物中毒,6預(yù)防措施葡萄球菌腸毒素食物中毒的預(yù)防包括防止葡萄球菌污染和防止其腸毒素形成兩方面。①防止葡萄球菌污染食物。②防止葡萄球菌對(duì)奶的污染。在低溫、通風(fēng)良好條件下貯藏食物不僅防止葡萄球菌生長(zhǎng)繁殖，亦是防止毒素形成的重要條件。因此，食物應(yīng)冷藏或置陰涼通風(fēng)的地方，其放置時(shí)間亦不應(yīng)超過6H，尤其是氣溫較高的夏、秋季節(jié)。食前還應(yīng)徹底加熱。,第二節(jié)細(xì)菌性食物中毒,㈤沙門氏菌食物中毒1病原沙門氏菌屬SALMONELLA是一大群在血清學(xué)上相關(guān)的革蘭氏陰性桿菌，無芽孢、無莢膜，周身鞭毛，能運(yùn)動(dòng)的需氧或兼性厭氧的短桿菌。,2食物中毒癥狀及發(fā)生原因⑴食物中毒癥狀。沙門氏菌食物中毒有多種多樣的中毒表現(xiàn)。一般可分為五種類型胃腸炎型、類傷寒型、類霍亂型、類感冒型、敗血癥型。其中以胃腸炎型最為多見，類傷寒型、類感冒型偶可見到，但多數(shù)病人還是以不典型的形式出現(xiàn)的。,第二節(jié)細(xì)菌性食物中毒,⑵中毒發(fā)生的原因。大多數(shù)沙門氏菌屬食物中毒，是活菌對(duì)沙門氏菌腸黏膜的侵襲導(dǎo)致的感染型中毒。目前，至少可以肯定某些如鼠傷寒沙門氏菌、腸炎沙門氏菌除引起感染型中毒外，所產(chǎn)生的腸毒素在導(dǎo)致食物中毒發(fā)生中亦起重要作用。因此，沙門氏菌食物中毒可能具有細(xì)菌侵入和腸毒素兩者混合型中毒特性。③引起中毒的食品及污染途徑。,⑶預(yù)防措施沙門氏菌的預(yù)防措施亦即細(xì)菌性食物中毒的預(yù)防措施，主要抓住三個(gè)環(huán)節(jié)。①防止食品被沙門氏菌污染。加強(qiáng)對(duì)食品生產(chǎn)企業(yè)的衛(wèi)生監(jiān)督及家畜、家禽宰前和宰后獸醫(yī)衛(wèi)生檢驗(yàn)，并按有關(guān)規(guī)定進(jìn)行處理。屠宰時(shí)，要特別注意防止肉尸受到胃腸內(nèi)容物、皮毛、容器等污染?？刂剖称分猩抽T氏菌的繁殖。沙門氏菌繁殖的最適溫度是37℃，但在20℃以上就能大量繁殖。因此，低溫貯存食品是預(yù)防食物中毒的一項(xiàng)重要措施。在食品工業(yè)、食品銷售網(wǎng)店、集體食堂均應(yīng)有冷藏設(shè)備，并按照食品低溫保藏的衛(wèi)生要求貯藏食品。,第二節(jié)細(xì)菌性食物中毒,②適當(dāng)濃度的食鹽也可控制沙門氏菌的繁殖。肉、魚等可加食鹽保存，以控制沙門氏菌的繁殖。③徹底殺死沙門氏菌。對(duì)沙門氏菌污染的食品進(jìn)行徹底加熱滅菌，是預(yù)防沙門氏菌食物中毒的關(guān)鍵措施。加熱滅菌的效果取決于許多因素，如加熱方法、食品被污染的程度、食品體積的大小。,第二節(jié)細(xì)菌性食物中毒,㈥大腸埃希氏菌食物中毒1病原埃希氏菌屬ESCHERICHIA俗稱大腸桿菌屬。本屬細(xì)菌均為革蘭氏陰性、兩端鈍圓的短桿菌，絕大多數(shù)菌株有周身鞭毛，能運(yùn)動(dòng)，周身還有菌毛，無芽孢，某些菌株有莢膜，為需氧或兼性厭氧菌。2食物中毒癥狀及發(fā)生原因,第二節(jié)細(xì)菌性食物中毒,⑴食物中毒癥狀。水樣腹瀉、腹痛，脫水，發(fā)燒，電解質(zhì)失衡；引起急性胃腸炎；引起菌；腹部痙攣性疼痛和短時(shí)間的自限性發(fā)熱、嘔吐，嚴(yán)重腹痛和便血等。⑵中毒發(fā)生的原因。同沙門氏菌。3引起中毒的食品及污染途徑引起中毒的食品基本與沙門氏菌相同。,第二節(jié)細(xì)菌性食物中毒,4預(yù)防措施預(yù)防措施與沙門氏菌食物中毒基本相同。㈦副溶血性弧菌食物中毒1病原副溶血性弧菌VIBRIOPARAHAEMOLYTICUS是一種嗜鹽菌，革蘭氏陰性、無芽孢的兼性厭氧性桿菌，屢呈多形性。菌體偏端有鞭毛一根，活潑。在有鹽的情況下生長(zhǎng)，在無鹽的情況下不能生長(zhǎng)。,第二節(jié)細(xì)菌性食物中毒,2食物中毒癥狀及發(fā)生原因⑴食物中毒癥狀。潛伏期一般11～18H，短者為4～6H，長(zhǎng)者32H。潛伏期短者病情較重。副溶血性弧菌引起的食物中毒，其前驅(qū)癥狀為上腹部疼痛，亦有少數(shù)患者是以發(fā)熱、腹瀉、嘔吐開始的，繼之出現(xiàn)其他癥狀。,第二節(jié)細(xì)菌性食物中毒,⑵發(fā)生原因。副溶血性弧菌食物中毒可由大量活菌侵入造成、毒素引起以及兩者混合作用所致。副溶血性弧菌繁殖速度很快，受副溶血性弧菌污染的食物，在較高溫度下存放，食前不加熱生吃，或加熱不徹底如海蜇、海蟹、黃泥螺、毛蚶等，或熟制品受到帶菌者、帶菌生食品，帶菌容器及工具等的污染。,第二節(jié)細(xì)菌性食物中毒,3引起中毒的食品及污染途徑引起中毒的食物主要是海產(chǎn)品，其中以墨魚、帶魚、黃花魚、螃蟹、蝦、貝、海蜇等為多；其次如咸菜、熟肉類、禽肉及禽蛋、蔬菜等。在肉、禽類食品中，腌制品約占半數(shù)。4預(yù)防措施副溶血性弧菌食物中毒的預(yù)防和沙門氏菌食物中毒基本相同，,第二節(jié)細(xì)菌性食物中毒,尤其要注意抓好控制繁殖和殺滅病原菌。對(duì)水產(chǎn)品烹調(diào)要格外注意，應(yīng)煮熟煮透，切勿生吃。由于副溶血性弧菌對(duì)酸的抵抗力較弱，可用食醋拌漬。㈧肉毒梭菌食物中毒1病原肉毒梭菌CBOTULINUM屬于厭氧性梭狀芽孢桿菌屬CLOSTRIDIUM，為革蘭氏陽性粗大桿菌，兩端鈍圓，無莢膜，周身有4～8根鞭毛，能運(yùn)動(dòng)。,第二節(jié)細(xì)菌性食物中毒,2食物中毒癥狀及發(fā)生原因⑴食物中毒癥狀。潛伏期比其他細(xì)菌食物中毒潛伏期長(zhǎng)。一般12～48H，短者5～6H，長(zhǎng)者8～10D或更長(zhǎng)。潛伏期越短，病死率越高；潛伏期長(zhǎng)，病情進(jìn)展緩慢。我國肉毒梭菌食物中毒的中毒表現(xiàn)出現(xiàn)的順序具有一定的規(guī)律性。最初為頭暈、無力，隨即出現(xiàn)眼肌麻痹癥狀；,第二節(jié)細(xì)菌性食物中毒,繼之張口、伸舌困難；進(jìn)而發(fā)展為吞咽困難；最后出現(xiàn)呼吸肌麻痹等。⑵中毒發(fā)生的原因。食物中肉毒梭菌主要來源于帶菌土壤、塵埃及糞便。3引起中毒的食品及污染途徑中毒食品的種類往往同飲食習(xí)慣、膳食組成和制作工藝有關(guān)。,第二節(jié)細(xì)菌性食物中毒,但絕大多數(shù)為家庭自制的低鹽濃度并經(jīng)厭氧條件的加工食品或發(fā)酵食品，以及厭氧條件下保存的肉類制品。4預(yù)防措施⑴在食品加工過程中，應(yīng)當(dāng)使用新鮮的原料，避免泥土的污染；加工前仔細(xì)地洗去泥土；加工時(shí)應(yīng)燒熟煮透。⑵生產(chǎn)罐頭食品等真空食品時(shí)，必須嚴(yán)格執(zhí)行罐頭廠衛(wèi)生規(guī)范GB895088，裝罐后要徹底滅菌。在貯藏過程中有產(chǎn)氣膨脹的罐頭時(shí)，不能食用。,第二節(jié)細(xì)菌性食物中毒,⑶加工后的食品應(yīng)避免再污染和在較高溫度下或缺氧條件下存放，應(yīng)放在通風(fēng)和涼快的地方保存。⑷肉毒梭菌不耐熱，對(duì)可疑的食品應(yīng)作加熱處理，加熱溫度一般為100℃，10～20MIN可使各型毒素破壞。㈨其他細(xì)菌性食物中毒其他細(xì)菌性食物中毒的病因物質(zhì)、特征、中毒食品、污染源、預(yù)防措施。,第三節(jié)真菌性食物中毒,真菌性食物中毒主要是指真菌毒素的食物中毒。一霉菌產(chǎn)毒的特點(diǎn)霉菌產(chǎn)毒僅限于少數(shù)的產(chǎn)毒霉菌，而產(chǎn)毒菌種中也只有一部分菌株產(chǎn)毒。產(chǎn)毒菌株的產(chǎn)毒能力還表現(xiàn)出可變性和易變性。產(chǎn)毒菌株經(jīng)過累代培養(yǎng)可以完全失去產(chǎn)毒能力，而非產(chǎn)毒菌株在一定條件下，也會(huì)出現(xiàn)產(chǎn)毒能力。,第三節(jié)真菌性食物中毒,在實(shí)際工作中，應(yīng)隨時(shí)考慮這種相對(duì)的概念。二主要產(chǎn)毒霉菌一種霉菌并非所有的菌株都能產(chǎn)生毒素，所以確切地說產(chǎn)毒霉菌是指已經(jīng)發(fā)現(xiàn)的具有產(chǎn)毒菌株的一些霉菌。已知的產(chǎn)毒菌現(xiàn)有以下一些屬種㈠曲霉屬ASPERGIUUS曲霉在自然界分布極為廣泛，對(duì)有機(jī)質(zhì)分解能力很強(qiáng)。,第三節(jié)真菌性食物中毒,㈡青霉屬PENICILLIUM青霉分布廣泛，種類很多，經(jīng)常存在于土壤和糧食及果、蔬上。有些種具有很高的經(jīng)濟(jì)價(jià)值，能產(chǎn)生多種酶及有機(jī)酸。另一方面，青霉可引起水果、蔬菜、谷物及食品的腐敗變質(zhì)，有種及菌株同時(shí)還可產(chǎn)生毒素。,第三節(jié)真菌性食物中毒,㈢鐮刀菌屬FUSARIUM鐮刀菌屬包括的種很多，其中大部分是植物的病原菌，并能產(chǎn)生毒素。如禾谷鐮刀菌FGRAMINEARUM、三線鐮刀菌FTRINCINTUM、玉米赤霉、梨孢鐮刀菌FPO㈣交鏈孢霉屬ALTERNARIA菌絲有橫隔，匍匐生長(zhǎng)，分生孢子梗較短，單生或成叢，大多不分枝。,第三節(jié)真菌性食物中毒,分生孢子梗頂端生長(zhǎng)分生孢子，其形狀大小不定，形態(tài)為桑葚狀，也有橢圓形和卵圓形，其上有縱橫隔膜、頂端延長(zhǎng)成喙?fàn)睿嗉?xì)胞。孢子褐色，常數(shù)個(gè)連接成鏈。尚未發(fā)現(xiàn)有性世代。交鏈孢霉廣泛分布于土壤和空氣中，有些是植物病原菌，可引起果、蔬的腐敗變質(zhì)，產(chǎn)生毒素。㈤其他菌屬粉紅單端孢霉、木霉屬、漆斑菌屬、黑色葡萄穗霉等。,第三節(jié)真菌性食物中毒,三主要霉菌毒素㈠黃曲霉毒素黃曲霉毒素是一種強(qiáng)烈的肝臟毒，對(duì)肝臟有特殊親和性，并有致癌作用。中毒癥狀分為三種類型⑴急性和亞急性中毒。短時(shí)間攝入黃曲霉毒素量較大，迅速造成肝細(xì)胞變性、壞死、出血以及膽管增生，在幾天或幾十天死亡。,第三節(jié)真菌性食物中毒,⑵慢性中毒。持續(xù)攝入一定量的黃曲霉毒素，使肝臟出現(xiàn)慢性損傷，生長(zhǎng)緩慢、體重減輕，肝功能降低，出現(xiàn)肝硬化。在幾周或幾十周后死亡。⑶致癌性。實(shí)驗(yàn)證明許多動(dòng)物小劑量反復(fù)攝入或大劑量一次攝入皆能引起癌癥，主要是肝癌。㈡黃變米毒素,第三節(jié)真菌性食物中毒,黃變米是20世紀(jì)40年代日本在大米中發(fā)現(xiàn)的。這種米由于被真菌污染而呈黃色，故稱黃變米。可以導(dǎo)致大米黃變的真菌主要是青霉屬中的一些種。這些菌株侵染大米后產(chǎn)生毒性代謝產(chǎn)物，統(tǒng)稱黃變米毒素。黃變米毒素可分為三大類⑴黃綠青霉毒素。,第三節(jié)真菌性食物中毒,該毒素不溶于水，加熱至270℃失去毒性；為神經(jīng)毒，毒性強(qiáng)，中毒特征為中樞神經(jīng)麻痹，進(jìn)而心臟及全身麻痹，最后呼吸停止而死亡。⑵橘青霉毒素。毒素難溶于水，為一種腎臟毒，可導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)動(dòng)物腎臟腫大，腎小管擴(kuò)張和上皮細(xì)胞變性壞死。,第三節(jié)真菌性食物中毒,⑶島青霉毒素。島青霉污染大米后形成島青霉黃變米，米粒呈黃褐色潰瘍性病斑。同時(shí)，含有島青霉產(chǎn)生的毒素，包括黃天精、環(huán)氯肽、島青霉素、紅天精。前兩種毒素都是肝臟毒，急性中毒可造成動(dòng)物發(fā)生肝萎縮現(xiàn)象；慢性中毒發(fā)生肝纖維化、肝硬化或肝腫瘤，可導(dǎo)致大白鼠肝癌。,第三節(jié)真菌性食物中毒,三常見的真菌毒素中毒癥黃曲霉毒素中毒黃曲霉毒素的毒性非常強(qiáng)，屬于劇毒毒物，毒性比氰化鉀大10倍，為砒霜的68倍。其中以B1的毒性最大。它的急性損傷主要在肝臟。肝細(xì)胞變性、壞死、出血及膽管增生。如果持續(xù)攝入，會(huì)造成慢性中毒。它的癥狀是使動(dòng)物生長(zhǎng)出現(xiàn)障礙，肝臟出現(xiàn)亞急性或慢性損傷，促使肝功能發(fā)生變化，肝臟組織學(xué)發(fā)生變化，,第三節(jié)真菌性食物中毒,食物利用率下降，發(fā)育緩慢，不孕或產(chǎn)仔少等。不同的動(dòng)物對(duì)黃曲霉毒素的敏感性有一定的差異。㈣黃變米中毒黃變米中毒是指人們因食用“黃變米”而引起的食物中毒。稻谷由于霉菌污染，而使米粒變黃，這類變質(zhì)的米稱為“黃變米”。米粒變黃是霉菌的代謝產(chǎn)物所致。這些代謝產(chǎn)物經(jīng)過實(shí)驗(yàn)證實(shí)，,第三節(jié)真菌性食物中毒,不僅對(duì)生物具有毒性，而且還能引起實(shí)驗(yàn)動(dòng)物發(fā)生肝癌，因此，日益引起人們的重視。四真菌性食物中毒的預(yù)防與控制真菌性食物中毒的預(yù)防與控制主要是指預(yù)防和控制霉菌造成的危害。要從清除污染源防止霉菌生長(zhǎng)與產(chǎn)毒和除去霉菌毒素兩個(gè)方面做工作。㈠防霉,第三節(jié)真菌性食物中毒,霉菌產(chǎn)毒需要五個(gè)條件產(chǎn)毒菌株、合適基質(zhì)、水分、溫度和通風(fēng)情況。在自然條件下，要想完全杜絕霉菌污染是不可能的，關(guān)鍵是要防止和減少霉菌的污染。最重要的防霉措施有1降低食品原料中的水分控制合適的AW和控制空氣相對(duì)濕度?？刂扑趾蜐穸?，保持食品和貯藏場(chǎng)所干燥，做好食品貯藏地的防濕、防潮，,第三節(jié)真菌性食物中毒,要求相對(duì)濕度不超過65％～70％，控制溫差，防止結(jié)露，糧食及食品可在陽光下晾曬、風(fēng)干、烘干或加吸濕劑、密封。2減少食品表面環(huán)境的氧濃度，即氣調(diào)防霉?？刂茪怏w成分以防止霉菌生長(zhǎng)和毒素產(chǎn)生。通常采取除氧或加入二氧化碳、氮等氣體，運(yùn)用密封技術(shù)控制和調(diào)節(jié)儲(chǔ)藏環(huán)境中的氣體成分，,第三節(jié)真菌性食物中毒,在食品儲(chǔ)藏工作中已廣泛應(yīng)用。3降低食品貯存溫度，即低溫防霉。把食品儲(chǔ)藏溫度控制在霉菌生長(zhǎng)的適宜溫度以下從而抑菌防霉，冷藏食品的溫度界限應(yīng)在4℃以下方為安全。4采用防霉劑，即化學(xué)防霉。使用防霉化學(xué)藥劑，有熏蒸劑如溴甲烷、二氯乙烷、環(huán)氧乙烷，有拌合劑如有機(jī)酸、漂白粉、多氧霉素。,第三節(jié)真菌性食物中毒,環(huán)氯乙烷熏蒸用于糧食防霉效果很好。食品中加入01％的山梨酸防霉效果很好。㈡去毒一類包括用物理篩選法、溶劑提取法、吸附法和生物法除去毒素，稱之為除去法；另一類用物理或化學(xué)藥物的方法使毒素的活性破壞，稱之為滅活法。用此法時(shí)，應(yīng)注意所用的化學(xué)藥物等不能在原食品中有殘留，或破壞原有食品的營養(yǎng)素等。,第三節(jié)食品衛(wèi)生的微生物學(xué)指標(biāo),食品衛(wèi)生是指為確保食品安全性和適用性，在食物鏈的所有階段必須采取的一切條件和措施。即食品在原料生產(chǎn)、加工或制造直至最后消費(fèi)的各個(gè)階段都必須是安全的、符合衛(wèi)生的和有益健康的。食品不能含有營養(yǎng)成分以外的、人為添加的、污染的或天然固有的有毒、有害物質(zhì)或雜質(zhì)。,食品中有害因素和污染源主要包括各種性質(zhì)的食品污染物，不適當(dāng)?shù)氖称诽砑觿?、?dòng)植物中的天然毒素和食品加工、貯藏中可能產(chǎn)生的有毒、有害物質(zhì)。其中微生物污染是食品污染中最廣泛、最普遍的現(xiàn)象，是最為關(guān)注的衛(wèi)生問題。,一、主要檢測(cè)指標(biāo),目前，食品衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)中的微生物指標(biāo)一般分為細(xì)菌總數(shù)、大腸菌群和致病菌等。,一細(xì)菌總數(shù),細(xì)菌總數(shù)是指在牛肉膏蛋白胨瓊脂培養(yǎng)基上長(zhǎng)出的菌落數(shù)，平皿菌落計(jì)數(shù)法測(cè)定食品中的活菌數(shù)，一般以1G或LML食品所含的細(xì)菌數(shù)來表示。,細(xì)菌總數(shù)的食品衛(wèi)生意義,一方面作為食品被污染，即清潔狀態(tài)的標(biāo)志；另一方面可以用來預(yù)測(cè)食品可能存放的期限。食品中細(xì)菌數(shù)較多，將加速食品的腐敗變質(zhì)，甚至可引起食用者的不良反應(yīng),二大腸菌群,大腸菌群系指一群在37℃，經(jīng)24H能發(fā)酵乳糖，并產(chǎn)酸產(chǎn)氣，需氧或兼性厭氧生長(zhǎng)的革蘭氏陰性的無芽孢桿菌。其中包括有大腸桿菌，產(chǎn)氣桿菌和一些中間類型的細(xì)菌。這群細(xì)苗能在含有膽鹽的培養(yǎng)基上生長(zhǎng)。,由于大腸菌群都是直接或間接來自人與溫血?jiǎng)游锏募S便，來自糞便以外的極為罕見。所以，大腸菌群作為食品衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)的意義在于，它是較為理想的糞便污染的指示菌群，另外，腸道致病菌如沙門氏菌屬和志賀氏菌屬等，對(duì)食品安全性威脅很大．經(jīng)常檢驗(yàn)致病菌有一定困難。而食品中的大腸菌群容易檢出來，腸道致病菌與大腸菌群的來源相同，而且在一般條件下大腸菌群在外環(huán)境中生存時(shí)間也與主要腸道致病菌一致．所以大腸菌群的另一重要食品衛(wèi)生意義是作為腸道致病菌污染食品的指示菌．,三致病菌,致病菌系指腸道致病菌、致病性球菌、沙門氏菌等。食品中不允許有致病菌存在，這是食品衛(wèi)生質(zhì)量指標(biāo)中必不可少的標(biāo)準(zhǔn)之一。此外，有些致病菌能產(chǎn)生毒素，毒素的檢查也是一項(xiàng)不容忽視的指標(biāo)，因?yàn)橛袝r(shí)當(dāng)菌體死亡后，毒素還繼續(xù)存在。毒素的檢查一般以動(dòng)物實(shí)驗(yàn)法，確定其最小致死量、半數(shù)致死量等指標(biāo)?？傊≡⑸锛捌浯x產(chǎn)物的檢查都屬致病菌檢驗(yàn)內(nèi)容。,二、常見食品的微生物標(biāo)準(zhǔn),請(qǐng)參見國家標(biāo)準(zhǔn),祝同學(xué)們身心健康，享受人生,大學(xué)生活碩果累累,快樂生活每一天,謝謝,

簡(jiǎn)介：當(dāng)你走在放學(xué)回家的路上，突然間狂風(fēng)大作，電閃雷鳴，這時(shí)你會(huì)急忙尋找避雨地點(diǎn)，并迅速跑過去。請(qǐng)問你是靠什么器官和系統(tǒng)感知天氣突然變化的,,你怎么判斷出要下雨呢,,,,,烏云,狂風(fēng),閃電,雷鳴,,,,,視覺,感覺,視覺,聽覺,人體的感覺的類型,,視覺（眼從外界獲得的信息最多）,聽覺（耳從外界獲得的信息量居第二位）,觸覺（皮膚感受冷、熱、痛、壓等刺激）,味覺（舌辨別酸、甜、苦、咸）,嗅覺（鼻對(duì)氣味敏感）,,靈敏地感知環(huán)境的變化并對(duì)自身的生命活動(dòng)進(jìn)行調(diào)節(jié)，維持自身的生存。,,外界環(huán)境的感知,眼和視覺,一、眼球的結(jié)構(gòu)和功能,虹膜,瞳孔,角膜,晶狀體,鞏膜,脈絡(luò)膜,視網(wǎng)膜,玻璃體,2眼睛的結(jié)構(gòu)各有什么功能呢,有色素，中央有小孔。,光線的通道,無色，透明可以透過光線。,透明，有彈性，像雙凸透鏡能折射光線。,白色，堅(jiān)固保護(hù)眼球的內(nèi)部結(jié)構(gòu)。,含有許多對(duì)光線敏感的細(xì)胞能感受光的刺激。,透明膠狀物,1眼睛有哪些結(jié)構(gòu)呢,視神經(jīng),鞏膜,虹膜,瞳孔,,眼球,眼球,,,內(nèi)容物,外膜,中膜,視網(wǎng)膜（感受光刺激并成像）,,,晶狀體（折光）、玻璃體、房水等,角膜（通光）,鞏膜（保護(hù)）,虹膜（調(diào)節(jié)通光量）,睫狀?。ㄕ{(diào)節(jié)晶狀體）,脈絡(luò)膜（營養(yǎng)，暗室）,眼球壁,內(nèi)膜,物體,1角膜,2瞳孔,3晶狀體,4玻璃體,5視網(wǎng)膜,6視覺神經(jīng),大腦皮層上的視覺中樞7,,,,,,,,,612視覺的形成過程,有一小孩，眼球的結(jié)構(gòu)完整無損，但是她看不見周圍的物體，想一想，這種眼睛可能是哪部分發(fā)生了病變,視覺形成的三個(gè)條件,眼球的完好視神經(jīng)沒斷大腦正常,,可能是視神經(jīng)或大腦皮層的視覺中樞發(fā)生了病變。,如果你看電影遲到了，剛進(jìn)電影院時(shí)伸手不見五指，過一會(huì)兒，你才能看見周圍的人和座位。當(dāng)你剛走出電影院時(shí)，你會(huì)感到外面太亮了，不由地瞇起雙眼。,圖中畫的是貓?jiān)诿髁梁秃诎淡h(huán)境中瞳孔的變化，貓能通過調(diào)節(jié)瞳孔的大小使自己在明處和暗處都能看清物體。人的瞳孔也能這樣調(diào)節(jié)的。,明處,暗處,你有過這樣的經(jīng)歷嗎,你知道這是為什么,比較兩張圖片，是否一樣,說一說你什么時(shí)候近視的怎么近視的近視給你的生活帶來哪些不便,1,2,如果不注意用眼衛(wèi)生，常常會(huì)造成近視。我們班的同學(xué)近視情況如何呢請(qǐng)同學(xué)們調(diào)查一下。,我們?yōu)槭裁磿?huì)近視呢,正常眼的調(diào)節(jié),⊙正常眼睛看遠(yuǎn)處物體時(shí)⊙正常眼睛看近處物體時(shí),,,,,,眼球前后徑,近視眼為何看不清物體,⊙近視眼看遠(yuǎn)處物體時(shí)晶狀體過度變凸⊙近視眼看遠(yuǎn)處物體時(shí)眼球的前后徑過長(zhǎng),,,,,真性近視,假性近視,,,眼球前后徑,,,,近視,矯正,,凹透鏡,,,,,正常眼,遠(yuǎn)視眼,,,,遠(yuǎn)視,矯正,,,凸透鏡,三、近視的形成,,晶狀體調(diào)節(jié)負(fù)擔(dān)過重，過度變凸①形成原因眼球前后徑過長(zhǎng),②矯正戴凹透鏡,近視眼的預(yù)防,“三要”,讀寫姿勢(shì)要正確，眼與書的距離要在33厘米左右。,看書、看電視或使用電腦1小時(shí)后要休息一下，要遠(yuǎn)眺幾分鐘。,要定期檢查視力，認(rèn)真做眼保健操。,“四不看”,不在直射的光線下看書。,不在光線暗的地方看書。,不躺臥看書。,不走路看書。,11、人們常說照相機(jī)的成像跟人的眼球成像的原理相同，根據(jù)你對(duì)眼球的認(rèn)識(shí)，想一想，眼球的晶狀體、瞳孔和視網(wǎng)膜分別相當(dāng)于照相機(jī)的什么結(jié)構(gòu)晶狀體瞳孔視網(wǎng)膜,鏡頭,光圈,膠卷,光圈,,,練一練,1、在眼球的結(jié)構(gòu)中，能改變曲度使人可看清遠(yuǎn)近不同的物體的是（）A、角膜B、瞳孔C、晶狀體D、玻璃體2、眼球內(nèi)具有感光細(xì)胞的結(jié)構(gòu)是（）A、角膜B、鞏膜C、脈絡(luò)膜D、視網(wǎng)膜3、矯正近視眼佩戴的鏡片是（）A、平面鏡B、凹透鏡C、凸透鏡D、凹面鏡,D,C,B,4、外界物體發(fā)射過來的光線，依次經(jīng)過（）到達(dá)視網(wǎng)膜。A、瞳孔、角膜、晶狀體、玻璃體B、瞳孔、角膜、玻璃體、晶狀體C、角膜、瞳孔、晶狀體、玻璃體D、角膜、瞳孔、玻璃體、晶狀體5、眼球中具有折光作用的結(jié)構(gòu)是（）A、角膜B、晶狀體C、鞏膜D、虹膜,C,B,6、視覺是在視網(wǎng)膜上形成的。（）7、為了節(jié)約時(shí)間，應(yīng)邊走路邊看書學(xué)習(xí)。（）8、讀寫姿勢(shì)要正確，眼與書的距離要在10厘米左右。（）9、躺臥看書很舒服，應(yīng)當(dāng)提倡。（）10、當(dāng)人觀看一個(gè)由遠(yuǎn)處移近的物體時(shí)，晶狀體會(huì)逐漸變厚。（）,,,,,√,1、同學(xué)們?cè)谏险n時(shí)，一會(huì)兒看桌上的書，一會(huì)兒抬頭看前面的黑板，物像都能落在視網(wǎng)膜上?？吹煤芮宄@主要是因?yàn)锳瞳孔可以縮小或放大B晶狀體的曲度可以調(diào)節(jié)C視網(wǎng)膜可以前后移動(dòng)調(diào)節(jié)D眼球的前后徑能隨意調(diào)節(jié)【解析】是問題情境。視覺形成過程中，調(diào)節(jié)功能最明顯的是晶狀體。瞳孔只能調(diào)節(jié)進(jìn)入光線的強(qiáng)度，視網(wǎng)膜和眼球前后徑是不能隨意調(diào)節(jié)的。,中考全真題,B,識(shí)圖綜合分析題,下圖為人眼結(jié)構(gòu)和照相機(jī)結(jié)構(gòu)示意圖，請(qǐng)回答下列問題,⑴如果把眼睛比喻成心靈的窗戶，那么圖中1就是窗戶上那明亮的玻璃。請(qǐng)寫出1的名稱_________。⑵如果人的眼球比喻成一架照相機(jī)，那么，結(jié)構(gòu)示意圖中的3相當(dāng)于照相機(jī)結(jié)構(gòu)示意圖中的標(biāo)號(hào)_________。⑶結(jié)構(gòu)（視神經(jīng)是屬于傳入神經(jīng)還是傳出神經(jīng)_________。⑷人眼球結(jié)構(gòu)示意圖2的名稱叫瞳孔，人能通調(diào)節(jié)瞳孔的大小使自己在明處和暗處都能看清物體，請(qǐng)問瞳孔相當(dāng)于顯微鏡的哪一構(gòu)造,答案⑴角膜⑵6⑶傳入神經(jīng)⑷C,1假如人失去聽覺，這四個(gè)場(chǎng)面各會(huì)出現(xiàn)什么情況,2你還能舉出幾個(gè)說明耳和聽覺重要性的實(shí)例嗎,人若失去聽覺，就不能及時(shí)獲取電視中的重要信息；聽不到汽車鳴笛，無法迅速避讓，易發(fā)生危險(xiǎn)；聽不到電話鈴聲，無法接聽電話；聽不到同學(xué)的討論，很難積極參與交流。,耳為什么能聽到聲音耳由哪些結(jié)構(gòu)組成,五、耳的結(jié)構(gòu)和功能,耳郭,外耳道,鼓膜,鼓室,聽小骨,半規(guī)管,前庭,耳蝸,咽鼓管,收集聲波,,內(nèi)耳,平衡鼓室內(nèi)外的氣壓,耳的基本結(jié)構(gòu)和功能,五、聽覺的產(chǎn)生,外界聲波,耳朵的衛(wèi)生和保健,1、噪聲對(duì)聽覺有什么影響2、怎樣保護(hù)外耳道3、怎樣預(yù)防中耳炎4、怎樣保護(hù)鼓膜,外耳道皮膚的耵聹腺所分泌的一種蠟狀物，叫做耵聹，對(duì)外耳道有保護(hù)作用。耵聹干燥后成為固體，就是常說的“耳屎”。,＊耳道內(nèi)耵聹（耳垢）較多時(shí),,不要使用尖銳的器具挖耳朵，以免戳傷外耳道和鼓膜。,＊鼻咽部有炎癥時(shí),,鼻咽部的病菌可能通過咽鼓管進(jìn)入中耳，因此，要及時(shí)就診，以免引起中耳炎。,,保護(hù)耳和聽力,1、減少和消除噪聲2、不用尖銳的東西挖耳朵3、遇到巨大的聲音，迅速張開口，或者堵耳、閉嘴。保持鼓膜大氣壓力平衡。4、鼻咽部有炎癥，及時(shí)治療，避免中耳炎5、不讓污水進(jìn)入外耳道，避免其感染。,人體的其他感覺器官,鼻嗅覺,鼻、舌和皮膚,舌味覺（酸、甜、苦、咸）,皮膚觸覺（冷、熱、痛、觸、壓等）,知識(shí)延伸,鼻腔內(nèi),有嗅覺細(xì)胞,舌的表面,有味覺細(xì)胞,味蕾,皮膚感受壓力,皮膚感受冷與熱,盲文公交車站（觸覺）,感受疼痛,人體的感覺都正確嗎,知識(shí)延伸,想一想你吃飯的情景，當(dāng)時(shí)你都感覺到什么,聞到了飯菜的氣味看到了飯菜的形狀和顏色嘗到了飯菜的味道手指感覺到飯菜的溫?zé)崧牭郊胰说恼勗?嗅覺視覺味覺觸覺聽覺,△,1、能夠感受頭部位置變動(dòng)的情況的是（）A聽小骨B半規(guī)管C前庭D耳蝸2、有對(duì)聲波敏感的感覺細(xì)胞的是（）A聽小骨B半規(guī)管C前庭D耳蝸,BC,D,3、聽覺形成的過程，下列正確的是（）A聲音→外耳道→鼓膜→耳蝸→聽小骨→聽神經(jīng)B聲音→外耳道→耳蝸→鼓膜→聽小骨→聽神經(jīng)C聲音→外耳道→鼓膜→聽小骨→耳蝸→聽神經(jīng),C,遇到巨大聲響時(shí)，要迅速（）①堵耳②張口③閉嘴④喊叫A①②B①④C②或①③D②④其目的是為了（）E聽起來聲音會(huì)變小F使鼓膜內(nèi)外氣壓保持平衡G防止聽小骨斷裂H防止產(chǎn)生腦震蕩,C,F,2、在飛機(jī)起飛或降落時(shí)，乘務(wù)員通常發(fā)給每位乘客一塊口香糖，這樣做的目的是（）,A、保護(hù)耳蝸內(nèi)的聽覺感受器B、保持鼓膜內(nèi)外氣壓平衡，以防鼓膜受損C、防止聽小骨和聽覺神經(jīng)受損D、使咽鼓管張開，保護(hù)聽小骨,B,比一比誰完成的最好,,1、下列各項(xiàng)中，不屬于內(nèi)耳結(jié)構(gòu)的是（）,A、半規(guī)管B、前庭C、鼓膜D、耳蝸,C,2、中耳內(nèi)通過三塊聽小骨傳導(dǎo)的是（）,A、外界聲波B、鼓膜的振動(dòng)C、神經(jīng)沖動(dòng)D、聽覺,B,B,A,比一比,3人坐車時(shí)不靠視覺也能判斷車速的快慢和左右轉(zhuǎn)彎，因?yàn)楦惺艽碳さ母惺芷魑挥冢ǎ炼伜颓巴?nèi)Ｂ前庭和半規(guī)管內(nèi)Ｃ半規(guī)管和鼓膜內(nèi)Ｄ鼓室和耳蝸內(nèi)4在飛機(jī)起飛或降落時(shí)，應(yīng)將口微微張開，其目的是Ａ使鼓膜內(nèi)外的氣壓平衡，避免鼓膜受損傷Ｂ減緩緊張情緒Ｃ避免嘔吐Ｄ進(jìn)行深呼吸，以適應(yīng)氣壓變化5聽覺形成過程中感受刺激產(chǎn)生興奮的結(jié)構(gòu)是（）Ａ．耳蝸Ｂ．鼓膜Ｃ．聽覺中樞Ｄ．半規(guī)管,A,

簡(jiǎn)介：一、DNA復(fù)制,DNA的半保留復(fù)制DNA復(fù)制的主要方式原核生物和真核生物DNA復(fù)制的特點(diǎn)DNA復(fù)制的調(diào)控DNA的修復(fù)1,自學(xué),DNA的轉(zhuǎn)座,“倘若你認(rèn)為自己邁開的步伐是正確的，并且已經(jīng)掌握了專門的知識(shí)，那么，任何人都阻撓不了你，不必去理會(huì)人們的非難和評(píng)頭品足。”BARBARAMCCLINTOCK,“如果你能腳踏實(shí)地從事研究并如實(shí)報(bào)告觀察結(jié)果，同時(shí)保持健康長(zhǎng)壽，那么，你有可能獲諾貝爾獎(jiǎng)?！盉ARBARAMCCLINTOCK,1983年諾貝爾生理醫(yī)學(xué)獎(jiǎng),,DNA的轉(zhuǎn)座DNA的移位TRANSPOSITION,是由可移位因子（TRANSPOSABLEELEMENT）介導(dǎo)的遺傳物質(zhì)重排現(xiàn)象。,,轉(zhuǎn)座子（TRANSPOSON,TN）是存在于染色體DNA上可自主復(fù)制和移位的基本單位。,在轉(zhuǎn)座過程中，有的轉(zhuǎn)座子會(huì)留在原來位置上，在新位點(diǎn)上出現(xiàn)的僅僅是它的拷貝。,在生物體內(nèi)普遍存在,“轉(zhuǎn)座”就是轉(zhuǎn)座子的移位嗎,轉(zhuǎn)座子的分類,插入序列（INSERTIONALSEQUENCE,IS因子）,復(fù)合型轉(zhuǎn)座子（COMPOSITETRANSPOSON）,最簡(jiǎn)單的轉(zhuǎn)座子，不含任何宿主基因，是細(xì)菌染色體或質(zhì)粒DNA的正常組成部分。,帶IS序列,不帶IS序列,帶有某些抗藥性基因（或其它宿主基因）的轉(zhuǎn)座子，兩翼往往是相同或高度同源的IS序列。,,,TNA家族不帶IS序列體積龐大（5KB）的轉(zhuǎn)座子，帶有Β－內(nèi)酰胺酶（AMPR）基因和兩個(gè)轉(zhuǎn)座必需基因。,末端常帶有倒置重復(fù)序列,復(fù)制型轉(zhuǎn)座子,轉(zhuǎn)座子的分類續(xù),非復(fù)制型轉(zhuǎn)座子,在復(fù)制過程中,整個(gè)轉(zhuǎn)座子被復(fù)制,所移動(dòng)的是原轉(zhuǎn)座子的拷貝,轉(zhuǎn)座酶TRANSPOSASE和解離酶RESOLVASE分別作用于原始轉(zhuǎn)座子和復(fù)制轉(zhuǎn)座子,如TNA類轉(zhuǎn)座子。,在復(fù)制過程中，原始轉(zhuǎn)座子作為一個(gè)可移動(dòng)的實(shí)體直接被移位，如IS序列、MU、TN5等。,DNA轉(zhuǎn)座的遺傳學(xué)效應(yīng),1、引起插入突變各種IS、TN轉(zhuǎn)座子都可以引起插入突變。2、產(chǎn)生新基因3、產(chǎn)生染色體畸變4、引起生物進(jìn)化,二、從DNA到RNA,RNA轉(zhuǎn)錄的基本過程,RNA鏈合成特點(diǎn)RNA是按方向合成，在催化下，以DNA鏈中的鏈為模板，以為原料，根據(jù)堿基配對(duì)原則，各核苷酸間通過磷酸二酯鍵相連，（需要/不需要）引物的參與，合成的RNA帶有與DNA編碼鏈（有意義鏈）相同的序列（AU）。,模板識(shí)別,轉(zhuǎn)錄起始,轉(zhuǎn)錄延伸,轉(zhuǎn)錄終止,,,,5’→3’,反義,RNA聚合酶,4種核苷三磷酸,TA、,,AU、,GC,模板識(shí)別（TEMPLATERECOGNITION）指RNA聚合酶與啟動(dòng)子DNA雙鏈相互作用并與之相結(jié)合的過程。,PROMOTER是基因轉(zhuǎn)錄起始所必需的一段DNA序列，是基因表達(dá)調(diào)控的上游順式作用元件之一。,直接識(shí)別并結(jié)合,轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子,RNA聚合酶,,,轉(zhuǎn)錄起始前復(fù)合物（PREINTIATIONTRANSCRIPTIONCOMPLEX,PIC）,,,開放復(fù)合物在RNA轉(zhuǎn)錄的模板識(shí)別階段，隨著DNA結(jié)構(gòu)變化，聚合酶與啟動(dòng)子形成的封閉復(fù)合物轉(zhuǎn)變成開放復(fù)合物，此時(shí)DNA序列中有一小段雙鏈被解開。,封閉復(fù)合物在RNA轉(zhuǎn)錄的模板識(shí)別階段，聚合酶與啟動(dòng)子可逆性結(jié)合形成的復(fù)合物，此時(shí)DNA處于雙鏈狀態(tài)。,三元復(fù)合物在RNA轉(zhuǎn)錄的模板識(shí)別階段，開放復(fù)合物與最初的2個(gè)NTP相結(jié)合并在它們之間形成磷酸二酯鍵后即轉(zhuǎn)變成包括RNA聚合酶、DNA和新生RNA的復(fù)合物。,強(qiáng)啟動(dòng)子快速/不可逆封閉復(fù)合物開放復(fù)合物,,,,,模板識(shí)別,,轉(zhuǎn)錄起始前復(fù)合物,PIC,轉(zhuǎn)錄起始（INITIATION）,不需要引物,,RNA聚合酶合成9個(gè)以上核苷酸并離開啟動(dòng)子區(qū)，轉(zhuǎn)錄進(jìn)入延伸階段。RNA聚合酶通過啟動(dòng)子的時(shí)間代表一個(gè)啟動(dòng)子的強(qiáng)弱。,轉(zhuǎn)錄延伸（ELONGATION）RNA聚合酶釋放Σ因子離開啟動(dòng)子后，核心酶沿模板DNA鏈移動(dòng)并使新生RNA鏈不斷伸長(zhǎng)的過程。,ECOLIRNA聚合酶5090個(gè)核苷酸/秒,轉(zhuǎn)錄終止（TERMINATION）當(dāng)RNA鏈延伸到轉(zhuǎn)錄終止時(shí)，RNA聚合酶不再形成新的磷酸二酯鍵，RNADNA雜合物分離，轉(zhuǎn)錄泡瓦解，DNA恢復(fù)雙鏈狀態(tài)，而RNA聚合酶和RNA鏈都被從模板上釋放出來。,RNA聚合酶,原核生物,ECOLIRNA聚合酶,2個(gè)Α亞基,1個(gè)Β亞基,1個(gè)Β’亞基,1個(gè)Ω亞基,1個(gè)Σ亞基,,,負(fù)責(zé)模板鏈的選擇和轉(zhuǎn)錄起始，使酶專一性識(shí)別模板上的啟動(dòng)子。存在多個(gè)Σ因子，用以識(shí)別不同的啟動(dòng)子。,全酶（HOLOENZYME）,,,催化核心,,核心酶,,,,與模板DNA、新生RNA鏈及核苷酸底物結(jié)合。,可能與核心酶組裝及啟動(dòng)子識(shí)別有關(guān)，并參與RNA聚合酶和部分調(diào)節(jié)因子的相互作用。,,一種RNA聚合酶幾乎合成所有RNA,真核生物,RNA聚合酶I,RNA聚合酶II,RNA聚合酶III,轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物,RRNA,HNRNA,TRNA、5SRRNA、SNRNA,,,,,MRNA,一般由816個(gè)亞基組成,Α鵝膏覃堿,,低濃度動(dòng)植物中，RNA聚合酶II被抑制，RNA聚合酶I沒影響，RNA聚合酶III在各生物中差異大。,高濃度動(dòng)物細(xì)胞中抑制轉(zhuǎn)錄，但昆蟲中無影響。,啟動(dòng)子的結(jié)構(gòu),轉(zhuǎn)錄單元（TRANSCRIPTIONUNIT）是一段從啟動(dòng)子開始至終止子結(jié)束的DNA序列。,你還記得什么是啟動(dòng)子嗎,,,,RNA,,,轉(zhuǎn)錄起始位點(diǎn),在RNA聚合酶與DNA結(jié)合的區(qū)域內(nèi)有一個(gè)由6個(gè)核苷酸組成的序列，是RNA聚合酶的緊密結(jié)合點(diǎn)，該位點(diǎn)的中央約位于起點(diǎn)上游10BP處，又稱10區(qū)。,PRIBNOW區(qū)（PRIBNOWBOX）,,,在PRIBNOWBOX外存在的與RNA聚合酶對(duì)啟動(dòng)子識(shí)別有關(guān)的共同序列TTGACA，它位于起點(diǎn)上游35BP處。,35區(qū),原核生物啟動(dòng)子的特點(diǎn),10區(qū)和35區(qū)是RNA聚合酶與啟動(dòng)子的結(jié)合位點(diǎn)，能與Σ因子相互識(shí)別，具有很高的親和力。,真核生物啟動(dòng)子的特點(diǎn),HOGNESS區(qū)（HOGNESSBOX）,在真核生物中，位于轉(zhuǎn)錄起始點(diǎn)上游3025BP處存在共同序列TATAAA，也稱TATA區(qū)。,CAAT區(qū)（CAATBOX）,在真核生物中，位于轉(zhuǎn)錄起始點(diǎn)上游7870BP處存在一段共同序列CCAAT，它與原核生物中35區(qū)相對(duì)應(yīng)。,GC區(qū)、增強(qiáng)子區(qū),將TATA區(qū)上游的保守序列稱為上游啟動(dòng)子元件（UPE）或上游激活序列（UAS）,,原核與真核生物MRNA的特征比較,原核生物的MRNA,1、半衰期短2、可能以多順反子形式存在3、5’端無帽子結(jié)構(gòu)，3’端沒有或只有較短的POLYA結(jié)構(gòu),單順反子MRNA只編碼一個(gè)蛋白質(zhì)的MRNA。,多順反子MRNA編碼多個(gè)蛋白質(zhì)的MRNA。,,真核生物的MRNA,1、5’端有“帽子”結(jié)構(gòu)2、3’端有POLYA“尾巴”結(jié)構(gòu),帽子結(jié)構(gòu)是GTP和原MRNA5’三磷酸腺苷（或鳥苷）縮合反應(yīng)的產(chǎn)物。,常被甲基化,組蛋白基因,轉(zhuǎn)錄后,真核基因轉(zhuǎn)錄終止位點(diǎn)上游1530BP處的保守序列AAUAAA,RNA聚合酶II至尾巴下游052KB核苷酸處,,“帽子”是什么所有真核MRNA都有“尾巴”嗎“尾巴”是何時(shí)產(chǎn)生的什么是加尾和初級(jí)轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物準(zhǔn)確切割所必需的RNA聚合酶都在“尾巴”終止嗎,真核生物初始轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物的加工,DNA轉(zhuǎn)錄生成的原始轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物即MRNA的前體，經(jīng)過和，再經(jīng)過，編碼蛋白質(zhì)的外顯子部分就連接成為一個(gè)連續(xù)的，通過核孔進(jìn)入細(xì)胞質(zhì)，即可作為蛋白質(zhì)合成的模板了。,核不均一RNA（HNRNA）,5’加帽,3’加多聚腺苷酸,RNA的剪接,開放閱讀框（ORF,核酶RIBOZYME,是一類具有催化功能的RNA分子,通過催化靶位點(diǎn)RNA鏈中磷酸二酯鍵的斷裂,特異性剪切底物RNA分子,從而阻斷基因的表達(dá)。,,RIBONUCLEICACID,ENZYME,酶不僅是蛋白質(zhì)T4RNA、一些植物類病毒和擬病毒也可自我剪接是繼反轉(zhuǎn)錄之后對(duì)中心法則的又一重要修正，說明RNA既是又是。,核酶,遺傳物質(zhì),酶,三、從MRNA到蛋白質(zhì),肽鏈的終止及釋放,翻譯的起始,肽鏈的延伸,,,核糖體與MRNA結(jié)合并與氨基酸TRNA生成起始復(fù)合物,核糖體沿5’端向3’端移動(dòng)，多肽從N端向C端合成,核糖體從MRNA上解離，準(zhǔn)備新一輪的合成,翻譯的基本過程,將MRNA鏈上的核苷酸從一個(gè)特定的起始位點(diǎn)開始，按每3個(gè)核苷酸代表一個(gè)氨基酸的原則，依次合成一條多肽鏈的過程。,三聯(lián)子密碼CODON的性質(zhì)起始密碼子INITIATIONCODON和終止密碼子TERMINATIONCODONTRNA的特點(diǎn)比較原核與真核細(xì)胞核糖體的組成核糖體的活性中心信號(hào)肽葉綠體蛋白質(zhì)的跨膜轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白質(zhì)的翻譯后加工抗生素與蛋白質(zhì)合成,UGA,UAG,UAA,AUG,,,,OCHREAMBEROPAL,,自學(xué),氯霉素可能阻止MRNA與核糖體結(jié)合四環(huán)素類可能阻止AATRNA與核糖體結(jié)合鏈霉素、新霉素、卡那霉素等可能干擾AATRNA與核糖體結(jié)合而產(chǎn)生錯(cuò)讀,,競(jìng)爭(zhēng)性抑制劑,,THEENDOFCHAPTERIII,精品課件,精品課件,DNA通過復(fù)制將遺傳信息由親代傳遞給子代；,DNA是遺傳信息的攜帶者,DNADEPENDENTDNAPOLYMERASEDDDPDNADEPENDENTRNAPOLYMERASEDDRPRNADEPENDENTRNAPOLYMERASERDRPRNADEPENDENTDNAPOLYMERASERDDP,

簡(jiǎn)介：第二部分題型專訓(xùn)篇第1講高中生物學(xué)“模型建構(gòu)”,核心考點(diǎn)歸納整合,教材涉及的7個(gè)模型及其建構(gòu)1必修12個(gè)。①教材P54嘗試制作真核細(xì)胞的三維結(jié)構(gòu)模型物理模型。②教材P69利用廢舊物品制作生物膜模型物理模型。2必修23個(gè)。①教材P23建立減數(shù)分裂中染色體變化的模型，模擬減數(shù)分裂中染色體數(shù)目及主要行為變化，并模擬減數(shù)分裂過程中非同源染色體的自由組合物理模型。,核心考點(diǎn)歸納整合,②教材P50制作DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)模型關(guān)注磷酸、脫氧核糖及堿基間的連接部位，并關(guān)注脫氧核苷酸及兩條鏈間的連接物理模型。③教材P115用數(shù)學(xué)方法討論基因頻率的變化數(shù)學(xué)模型。3必修32個(gè)。①教材P6構(gòu)建人體細(xì)胞與外界環(huán)境的物質(zhì)交換模型物理模型。②教材P65構(gòu)建種群增長(zhǎng)的數(shù)學(xué)模型，如公式型NN＝2N細(xì)菌增長(zhǎng)模型、NT＝N0ΛT“J”型曲線增長(zhǎng)模型；曲線型“J”型、“S”型種群增長(zhǎng)曲線等,核心考點(diǎn)歸納整合,類型一概念模型類。,概念模型是指以命題的形式顯示概念間的意義聯(lián)系，并用具體事例加以說明，來展示概念間層級(jí)結(jié)構(gòu)的示意圖。其主要目的和作用是理清生物學(xué)概念之間的獨(dú)立關(guān)系、從屬關(guān)系等，使分散的生物學(xué)概念系統(tǒng)化，一般采用集合、知識(shí)樹的形式呈現(xiàn)。,核心考點(diǎn)歸納整合,?知能儲(chǔ)備一、集合的類型1．集合形式之一獨(dú)立型理清具有獨(dú)立關(guān)系的生物學(xué)概念1模式圖,核心考點(diǎn)歸納整合,,2實(shí)例運(yùn)用,核心考點(diǎn)歸納整合,,2．集合形式之二包含型理清一系列具有從屬關(guān)系的生物學(xué)概念1模式圖,2實(shí)例運(yùn)用,核心考點(diǎn)歸納整合,,,3．集合形式之三重合型理清完全等同關(guān)系的生物學(xué)概念1模式圖,2實(shí)例運(yùn)用,核心考點(diǎn)歸納整合,4．集合形式之四重疊型理清具有公共關(guān)系的生物學(xué)概念1模式圖,2實(shí)例運(yùn)用,核心考點(diǎn)歸納整合,,5．集合形式之五混合型將分散的生物學(xué)概念知識(shí)理順為系統(tǒng)化1模式圖以上幾種圖示的混合型。,核心考點(diǎn)歸納整合,,2實(shí)例運(yùn)用,核心考點(diǎn)歸納整合,,二、知識(shí)樹的類型,1．模式圖,核心考點(diǎn)歸納整合,2．實(shí)例運(yùn)用1細(xì)胞的生命歷程概念圖,核心考點(diǎn)歸納整合,,2遺傳的分子基礎(chǔ)概念圖,核心考點(diǎn)歸納整合,3物種的形成概念圖,核心考點(diǎn)歸納整合,,,4內(nèi)環(huán)境的組成與穩(wěn)態(tài)概念圖,核心考點(diǎn)歸納整合,,,5種群的數(shù)量特征及變化,核心考點(diǎn)歸納整合,?跟蹤訓(xùn)練1．下圖表示人體通過體液免疫消滅破傷風(fēng)桿菌外毒素的過程，下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是B,A．細(xì)胞2、細(xì)胞3均起源于造血干細(xì)胞B．能特異性識(shí)別抗原的細(xì)胞有細(xì)胞2、細(xì)胞3、細(xì)胞4、細(xì)胞5C．HIV入侵人體后，會(huì)感染人體的細(xì)胞2D．物質(zhì)A主要分布在血清中,核心考點(diǎn)歸納整合,解析首先明確細(xì)胞1為吞噬細(xì)胞，細(xì)胞2是T細(xì)胞，細(xì)胞3是B細(xì)胞，細(xì)胞4為漿細(xì)胞，細(xì)胞5是記憶細(xì)胞，物質(zhì)A為抗體。細(xì)胞2、3分別是T細(xì)胞、B細(xì)胞，它們起源于造血干細(xì)胞；B細(xì)胞、T細(xì)胞、效應(yīng)T細(xì)胞和記憶細(xì)胞具有特異性識(shí)別抗原靶細(xì)胞的功能；吞噬細(xì)胞雖能識(shí)別抗原，但不具有特異性；漿細(xì)胞則不能識(shí)別抗原，但漿細(xì)胞分泌的抗體能特異性識(shí)別抗原，B錯(cuò)；艾滋病病毒HIV攻擊人體免疫系統(tǒng)，特別是能夠侵入人體的T細(xì)胞，使T細(xì)胞大量死亡，導(dǎo)致患者喪失一切免疫功能，各種傳染病則乘虛而入；抗體分布在血清主要、組織液和外分泌液中。,核心考點(diǎn)歸納整合,2．仔細(xì)分析下圖，三個(gè)圓圈①、②、③分別表示含細(xì)胞壁、核糖體、中心體的細(xì)胞，那么陰影部分表示的細(xì)胞可能是B,A．乳酸菌B．小球藻C．肝細(xì)胞D．棉花葉肉細(xì)胞,核心考點(diǎn)歸納整合,解析本題考查多種多樣的細(xì)胞。乳酸菌屬于細(xì)菌，細(xì)胞內(nèi)唯一的細(xì)胞器是核糖體，不含中心體，A錯(cuò)誤；小球藻是綠藻，屬于低等植物，含有細(xì)胞壁、核糖體和中心體結(jié)構(gòu)，B正確；肝細(xì)胞屬于高等動(dòng)物細(xì)胞，無細(xì)胞壁，C錯(cuò)誤；中心體存在于動(dòng)物細(xì)胞和低等植物細(xì)胞中，棉花葉肉細(xì)胞是高等植物細(xì)胞，不含中心體，D錯(cuò)誤。,核心考點(diǎn)歸納整合,,類型二物理模型類,物理模型是指客觀實(shí)物的相似模型或者是客觀現(xiàn)實(shí)的形象顯示，一般分為形態(tài)結(jié)構(gòu)模型和過程模型兩類，通常是用特殊的符號(hào)、色彩和圖形來反映生命現(xiàn)象的發(fā)生、發(fā)展以及生物的結(jié)構(gòu)、生理和相互聯(lián)系。它濃縮了大量的生物知識(shí)信息，是生物知識(shí)的重要表達(dá)方式。此類試題的特點(diǎn)是①新情境。即通過圖解、圖示創(chuàng)設(shè)新情境，提供新材料。②重能力。以圖解、圖示的方式展示生物原理、過程等，對(duì)考生綜合能力要求較高。,核心考點(diǎn)歸納整合,?知能儲(chǔ)備物理模型歸類總結(jié)1形態(tài)結(jié)構(gòu)模型描述生物體、器官、組織、細(xì)胞的形態(tài)結(jié)構(gòu)示意圖或模式圖或部分圖解。常考的形態(tài)結(jié)構(gòu)模型如下,核心考點(diǎn)歸納整合,核心考點(diǎn)歸納整合,2過程模型描述生命活動(dòng)的動(dòng)態(tài)過程或生物進(jìn)化的過程。?？嫉倪^程模型如下,核心考點(diǎn)歸納整合,核心考點(diǎn)歸納整合,核心考點(diǎn)歸納整合,核心考點(diǎn)歸納整合,核心考點(diǎn)歸納整合,核心考點(diǎn)歸納整合,?跟蹤訓(xùn)練3．下列中可以借助電子顯微鏡觀察到的是B,解析電子顯微鏡看到的結(jié)構(gòu)叫作亞顯微結(jié)構(gòu)。細(xì)胞膜的結(jié)構(gòu)和DNA的雙螺旋結(jié)構(gòu)及染色體都可以用光學(xué)顯微鏡觀察到。線粒體的內(nèi)部結(jié)構(gòu)只能用電子顯微鏡觀察。,核心考點(diǎn)歸納整合,4．細(xì)胞是生物體結(jié)構(gòu)和功能的基本單位。對(duì)下列有關(guān)細(xì)胞的敘述，正確的是B,A．三種細(xì)胞中共同具有的細(xì)胞器是核糖體和DNAB．水分子進(jìn)入三種細(xì)胞的方式都為滲透C．A、B都有細(xì)胞周期，其內(nèi)的化學(xué)成分也在不斷更新D．A能進(jìn)行光合作用，C不會(huì)發(fā)生質(zhì)壁分離,核心考點(diǎn)歸納整合,解析DNA不是細(xì)胞器，A錯(cuò)誤，圖A為高度分化的細(xì)胞不能增殖，C錯(cuò)誤。C也能發(fā)生質(zhì)壁分離，D錯(cuò)誤。,核心考點(diǎn)歸納整合,5．下圖中①～④表示某細(xì)胞的部分細(xì)胞器，下列有關(guān)敘述正確的是C,A．此細(xì)胞不可能是原核細(xì)胞，只能是動(dòng)物細(xì)胞B．結(jié)構(gòu)③是合成脂質(zhì)的場(chǎng)所，結(jié)構(gòu)②無磷脂C．結(jié)構(gòu)①不能將葡萄糖分解成二氧化碳和水D．結(jié)構(gòu)①和④都存在堿基A和T的互補(bǔ)配對(duì),核心考點(diǎn)歸納整合,解析圖示此細(xì)胞中含有①線粒體、②中心體、③高爾基體、④核糖體和細(xì)胞核等結(jié)構(gòu)，為真核生物，可能為動(dòng)物細(xì)胞或低等植物細(xì)胞，A錯(cuò)誤；高爾基體是蛋白質(zhì)的加工場(chǎng)所，不是脂質(zhì)合成場(chǎng)所，脂質(zhì)合成場(chǎng)所是內(nèi)質(zhì)網(wǎng)，B錯(cuò)誤；線粒體是有氧呼吸的主要場(chǎng)所，但葡萄糖氧化分解的第一階段是在細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)中進(jìn)行，因此線粒體不能將葡萄糖分解成二氧化碳和水，C正確；線粒體和核糖體中均存在堿基互補(bǔ)配對(duì)行為，但是在核糖體中進(jìn)行的是MRNA與TRNA的配對(duì)，沒有A和T的互補(bǔ)配對(duì)，D錯(cuò)誤。,核心考點(diǎn)歸納整合,,類型三數(shù)學(xué)模型類,?知能儲(chǔ)備一、坐標(biāo)曲線型解答生物坐標(biāo)曲線分析題時(shí)，要明確無論曲線多么復(fù)雜，關(guān)鍵都是數(shù)和形。數(shù)就是坐標(biāo)曲線中的點(diǎn)，如起點(diǎn)、轉(zhuǎn)折點(diǎn)和終點(diǎn)；形就是曲線的變化趨勢(shì)，乃至將來的動(dòng)態(tài)，“讀軸看線綜合”是坐標(biāo)曲線類試題思維分析過程的“三步曲”。讀軸即明確橫軸自變量和縱軸因變量各是什么，弄清它們的含義，做到“讀軸而能識(shí)變量”；“看線”即看曲線的走勢(shì)，弄清自變量是如何影響因變量的，領(lǐng)會(huì)曲線表示了什么、說明了什么，做到“看線而能理關(guān)系”；“綜合”即綜合分析各曲線間的關(guān)系，是相互依賴還是相互制約，做到“綜合而能求突破”。,核心考點(diǎn)歸納整合,1．單曲線單曲線常表示某種生物的數(shù)量或某一生理過程與某一相關(guān)因素之間的關(guān)系。常有以下種類1升曲線。,核心考點(diǎn)歸納整合,2降曲線。,核心考點(diǎn)歸納整合,3先升后降。,核心考點(diǎn)歸納整合,4先降后升。,核心考點(diǎn)歸納整合,5升降不斷變化。,核心考點(diǎn)歸納整合,2．雙曲線和多曲線雙曲線和多曲線指在一個(gè)坐標(biāo)系中，有兩條或兩條以上的曲線，通常表示不同生物的數(shù)量或同一生物的不同器官或生理過程與某一相關(guān)因素之間的關(guān)系。,核心考點(diǎn)歸納整合,核心考點(diǎn)歸納整合,核心考點(diǎn)歸納整合,?跟蹤訓(xùn)練6．某校生物興趣小組以玉米為實(shí)驗(yàn)材料，研究不同條件下細(xì)胞光合作用速率和呼吸速率的關(guān)系，并繪制了甲、乙、丙、丁四幅圖。其中圖中“A”點(diǎn)不能表示光合作用速率與細(xì)胞呼吸速率相等的是A,核心考點(diǎn)歸納整合,解析圖甲中所示A點(diǎn)代表凈光合速率與呼吸速率相等，其余各圖的A點(diǎn)均代表總光合速率與呼吸速率相等。,核心考點(diǎn)歸納整合,解析寒冷刺激時(shí)，甲狀腺激素含量增多，A錯(cuò)誤；正常人空腹?fàn)顟B(tài)下口服一定量葡萄糖一段時(shí)間后，血糖含量仍應(yīng)維持在80～120MG/DL，B錯(cuò)誤；進(jìn)食后隨血糖濃度的變化，人體內(nèi)胰島素的降血糖作用和胰高血糖素的升血糖作用相互拮抗，共同實(shí)現(xiàn)對(duì)糖代謝的調(diào)節(jié)，C錯(cuò)誤；當(dāng)空腹時(shí)，肝糖原分解，從而血糖升高，但隨時(shí)間進(jìn)行肝糖原越來越少，血糖先增加后減少，然后處于動(dòng)態(tài)平衡，故D正確。,核心考點(diǎn)歸納整合,7．下圖表示不同條件下，人體內(nèi)某些物質(zhì)含量變化的趨勢(shì)，其中正確的是D,核心考點(diǎn)歸納整合,解析寒冷刺激時(shí)，甲狀腺激素含量增多，A錯(cuò)誤；正常人空腹?fàn)顟B(tài)下口服一定量葡萄糖一段時(shí)間后，血糖含量仍應(yīng)維持在80～120MG/DL，B錯(cuò)誤；進(jìn)食后隨血糖濃度的變化，人體內(nèi)胰島素的降血糖作用和胰高血糖素的升血糖作用相互拮抗，共同實(shí)現(xiàn)對(duì)糖代謝的調(diào)節(jié)，C錯(cuò)誤；當(dāng)空腹時(shí)，肝糖原分解，從而血糖升高，但隨時(shí)間進(jìn)行肝糖原越來越少，血糖先增加后減少，然后處于動(dòng)態(tài)平衡，故D正確。,核心考點(diǎn)歸納整合,二、表格分析型表格“三看”法此法主要適用于表格數(shù)據(jù)類實(shí)驗(yàn)題。一看“點(diǎn)”就是要注意表格中的特殊數(shù)據(jù)，如最多、最少、平均等，尤其是表格中出現(xiàn)“0”的地方；二看“線”就是要注意弄清數(shù)據(jù)變化規(guī)律，如上升或下降；三看“面”就是要注意采取對(duì)比或分組對(duì)比的方法，找出各個(gè)組數(shù)據(jù)之間的關(guān)系及各組之間的相同點(diǎn)和不同點(diǎn)。,核心考點(diǎn)歸納整合,,,,?跟蹤訓(xùn)練8．某種鐵線蓮的根莖可作中藥，有重要經(jīng)濟(jì)價(jià)值。下表為不同遮光處理對(duì)其光合作用影響的結(jié)果，相關(guān)敘述正確的是C,核心考點(diǎn)歸納整合,,,,A．適當(dāng)?shù)恼诠馓幚?，?huì)降低其干重B．葉綠素含量與凈光合速率呈正相關(guān)C．葉綠素A/B可作為其利用弱光能力的判斷指標(biāo)D．遮光90時(shí)，鐵線蓮不進(jìn)行光合作用,解析從植株干重一列看，適當(dāng)?shù)恼诠馓幚頃r(shí)，可以提高干重，A錯(cuò)誤。但葉綠素的含量與凈光合作用之間數(shù)據(jù)變化不是一直增加，所以B不正確。據(jù)表格中的A/B的比值看比值越大植株增重越多，可以作為利用光的判斷指標(biāo)。當(dāng)遮光達(dá)90時(shí)，雖然凈光合作用為0，但還是進(jìn)行了光合作用，且光合作用產(chǎn)生的有機(jī)物剛好滿足呼吸作用消耗的；所以凈光合作用為0。,核心考點(diǎn)歸納整合,,,,9．根據(jù)有關(guān)材料作答。Ⅰ植物光合作用吸收的CO2與呼吸作用釋放的CO2相等時(shí)的光照強(qiáng)度稱為光補(bǔ)償點(diǎn)。光照強(qiáng)度增加到某一點(diǎn)時(shí)，再增加光照強(qiáng)度，光合強(qiáng)度也不增加，該點(diǎn)的光照強(qiáng)度稱為光飽和點(diǎn)。A～D4種植物的單個(gè)植株在自然CO2濃度及最適溫度下的光補(bǔ)償點(diǎn)和光飽和點(diǎn)如下表。,核心考點(diǎn)歸納整合,,,,1植物細(xì)胞產(chǎn)生CO2的具體部位是________________；利用CO2的具體部位是__________。2光照強(qiáng)度為04KLX時(shí)，表格中______植物的呼吸作用產(chǎn)生的CO2多于光合作用吸收的CO2。3僅考慮溫度和CO2含量的影響，在溫度較高，CO2較少的密閉溫室中，植物的光補(bǔ)償點(diǎn)較________。大田玉米群體的光飽和點(diǎn)比單株玉米的光飽和點(diǎn)要高，主要原因是______________________________________________________。,核心考點(diǎn)歸納整合,,,,Ⅱ科學(xué)家在黑暗時(shí)把葉綠體基粒放在PH＝4的溶液中，讓基粒類囊體膜腔的PH值下降至4，然后將基粒移入PH＝8并含有ADP和PI的緩沖溶液中如下圖。一段時(shí)間后，有ATP產(chǎn)生。,核心考點(diǎn)歸納整合,,,,4為獲取葉綠體，先要破碎葉肉細(xì)胞，再用__________法分離。5上述實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，基粒類囊體合成ATP的原因是________________。據(jù)此推測(cè)，葉綠體在自然狀態(tài)下產(chǎn)生ATP的過程中，光能的作用是_______________________________________________________________________________。,核心考點(diǎn)歸納整合,,,,解析1植物在有氧呼吸和無氧呼吸中均可產(chǎn)生CO2，植物產(chǎn)生CO2的部位為細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)和線粒體基質(zhì)。光合作用過程中CO2參與的暗反應(yīng)是在葉綠體基質(zhì)中完成的，植物利用CO2的具體部位是葉綠體基質(zhì)。2題目中給出的實(shí)際光照強(qiáng)度為04KLX，要滿足題目中要求的呼吸作用產(chǎn)生的CO2多于光合作用釋放的CO2，該光照強(qiáng)度應(yīng)小于光補(bǔ)償點(diǎn)，只有A、C兩種植物滿足此要求。3在該條件下溫度升高與呼吸作用相關(guān)的酶活性增強(qiáng)，呼吸作用消耗的有機(jī)物較之前有所增加，而此時(shí)容器中CO2較少，要制造出與呼吸作用相等量的有機(jī)物，植物需利用更強(qiáng)的光照，即光補(bǔ)償點(diǎn)會(huì)升高。在大田玉米群體中給予相同的光照強(qiáng)度，由于在群體中葉片間有相互遮擋的現(xiàn)象，下部的很多葉片所接收的光能在光飽和點(diǎn)以下，要想使下部葉片也達(dá)到光飽和點(diǎn)，需要再增強(qiáng)光照，即光飽和點(diǎn)會(huì)上升。,核心考點(diǎn)歸納整合,,,,4要從破碎葉肉細(xì)胞的眾多微粒中獲取葉綠體，可采用差速離心法或采用密度梯度法。5ATP的合成與基粒類囊體膜內(nèi)外的PH差值有關(guān)，而造成PH差值的原因則為膜內(nèi)外H＋濃度的不同，即H＋濃度差。由此可推知，葉綠體在自然狀態(tài)下產(chǎn)生ATP也應(yīng)與H＋有關(guān)，具體原因可能是在光的作用下水分解產(chǎn)生H＋，使類囊體膜腔內(nèi)PH下降，形成類囊體膜內(nèi)外的H＋濃度差，從而導(dǎo)致葉綠體基質(zhì)中的ADP和PI合成ATP。答案1線粒體基質(zhì)和細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)葉綠體基質(zhì)2A、C3高植株間存在遮光現(xiàn)象CO2濃度增加4差速離心5膜內(nèi)外存在H＋梯度H＋濃度差使水分解產(chǎn)生H＋；使類囊體膜內(nèi)外之間產(chǎn)生H＋梯度H＋濃度差,核心考點(diǎn)歸納整合,,,,三、坐標(biāo)直方圖型第一步看清楚縱、橫坐標(biāo)軸的含義以及坐標(biāo)系中直方圖所代表的意義，即分析直方圖所蘊(yùn)含的生物學(xué)信息。第二步認(rèn)真分析、對(duì)比各變量之間的關(guān)系，找出各變量之間的內(nèi)在聯(lián)系。第三步結(jié)合相關(guān)的生物學(xué)知識(shí)做進(jìn)一步的推理分析，并進(jìn)行圖文轉(zhuǎn)化，正確作答。,核心考點(diǎn)歸納整合,,,,?跟蹤訓(xùn)練10．在黃瓜冬、春季生產(chǎn)中，由于光照弱，連陰天較多，溫室大棚內(nèi)易形成弱光環(huán)境。研究人員研究了含水量對(duì)黃瓜弱光光合適應(yīng)性的影響，獲得如下結(jié)果。,核心考點(diǎn)歸納整合,,,,請(qǐng)回答1選取長(zhǎng)勢(shì)一致的________黃瓜品種的健壯幼苗若干株，分成________組分別進(jìn)行不同處理。為了保證各水分處理始終保持試驗(yàn)要求，要每日補(bǔ)水，補(bǔ)水時(shí)需要進(jìn)行________。,核心考點(diǎn)歸納整合,,,,220天后，測(cè)定各項(xiàng)指標(biāo)測(cè)定____________________的含量時(shí)，需使用酒精作為溶劑。3在弱光條件下________對(duì)于吸收光能有更大的作用，C5最大再生速率下降的原因是_________________________________________________________________________________________。4實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，在弱光條件下，可以通過__________________方法提高溫室大棚內(nèi)黃瓜的光合效率，其可能的原因是弱光時(shí)蒸騰作用較弱，水分過多會(huì)抑制______________________從而影響光合作用。,核心考點(diǎn)歸納整合,解析1由題目信息可知，應(yīng)選擇耐弱光黃瓜幼苗，分成4組進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。2葉綠素A、葉綠素B易溶于有機(jī)溶劑中，故測(cè)定葉綠素A、葉綠素B的含量時(shí)，需使用酒精作為溶劑。3由表格信息可知，在弱光條件下葉綠素B對(duì)于吸收光能有更大的作用。C5最大再生速率下降的原因是弱光下光反應(yīng)弱，生成的ATP和H不足。4弱光下，含水量低的植物光合作用比較強(qiáng)，故可通過適當(dāng)減少澆水提高溫室大棚內(nèi)黃瓜的光合效率，水分過多會(huì)抑制根細(xì)胞的呼吸作用從而影響光合作用。,核心考點(diǎn)歸納整合,答案1耐弱光四稱重2葉綠素A、葉綠素B3葉綠素B光反應(yīng)生成的ATP和H不足4適當(dāng)減少澆水根細(xì)胞的呼吸作用,核心考點(diǎn)歸納整合,11．2014深圳外國語學(xué)校月考同位素標(biāo)記法在生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中使用廣泛，下列哪組實(shí)驗(yàn)最適于研究分泌蛋白的合成和分泌的過程B,核心考點(diǎn)歸納整合,解析研究分泌蛋白的合成和分泌的過程，應(yīng)標(biāo)記原料氨基酸，所以A錯(cuò)誤；唾液腺細(xì)胞的分泌物為唾液淀粉酶，屬于蛋白質(zhì)，B正確；汗腺細(xì)胞的分泌物汗液不含蛋白質(zhì)成分，C錯(cuò)誤；性腺細(xì)胞分泌性激素是固醇類不含蛋白質(zhì)成分，D錯(cuò)誤。,,

簡(jiǎn)介：第14章同位素標(biāo)記技術(shù)在分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中的應(yīng)用,中國農(nóng)業(yè)大學(xué)齊孟文,標(biāo)記探針,探針（PROBLE帶有檢測(cè)標(biāo)記的，與被檢測(cè)目標(biāo)物分子具有特異性互補(bǔ)反應(yīng)性能的探測(cè)物分子或分子片斷。探針類別核酸探針DNA、RNA探針非核酸探針，抗體、蛋白質(zhì)分子標(biāo)簽等,,核酸探針,標(biāo)記類別,標(biāo)記核素,標(biāo)記單體,摻入DNA探針的常用單體標(biāo)記化合物?32PDATP，?32PDCTP，?32PUTP，?32PATP。國內(nèi)供應(yīng)商北京福瑞國外供應(yīng)商UK,標(biāo)記單體,在分子克隆操作中用于標(biāo)記核酸分子的標(biāo)記物主要是放射性同位素，如32P，33P和35S。在摻入核苷酸的標(biāo)記過程中，只有三磷酸核苷酸的Α位磷酸整合到核酸鏈中，因此使用Α位磷酸被標(biāo)記的三磷酸核苷酸，如Α32PDATP。而在標(biāo)記5末端磷酸基團(tuán)的反應(yīng)中一般使用Γ位磷酸被標(biāo)記的ATP。放射性的信號(hào)通過X光片放射自顯影或磷屏掃描獲取。,核酸探針標(biāo)記法,1雙鏈DNA探針⑴切口平移法首先用DNAASEI在探針DNA雙鏈上造成缺口，然后借助于ECOLIDNA聚合酶I的5→3外切酶活性，切去帶有5磷酸的核苷酸；同時(shí)利用該酶5→3聚合酶活性，使同位素標(biāo)記的互補(bǔ)核苷酸補(bǔ)入缺口。這兩種活性同時(shí)作用，缺口不斷向3方向移動(dòng)，DNA鏈上的核苷酸不斷為標(biāo)記的核苷酸取代，成為帶有標(biāo)記的DNA，純化除去游離脫氧核苷酸后成為標(biāo)記DNA探針。最合適的切口平移片段一般為50500個(gè)核苷酸,產(chǎn)生均勻標(biāo)記的探針。切口平移反應(yīng)受幾種因素的影響A產(chǎn)物的比活性取決于Α32PDNTP的比活性和模板中核苷酸被置換的程度。BDNA酶Ⅰ的用量和ECOLIDNA聚合酶的質(zhì)量會(huì)影響產(chǎn)物片段的大小。CDNA模板中的抑制物如瓊脂糖會(huì)抑制酶的活性,故應(yīng)使用仔細(xì)純化后的DNA。,,,切口平移法,2隨機(jī)引物法通過熱變性使模板DNA變?yōu)閱捂淒NA，隨機(jī)引物與單鏈DNA退火后，利用KLENOWFRAGMENT合成互補(bǔ)鏈。此時(shí)如果底物中DNTP的一種或幾種被Α32P,Α35S,3H等標(biāo)記時(shí)，那么合成的互補(bǔ)鏈DNA也被標(biāo)記。合成后的雙鏈DNA通過熱變性變成單鏈后即可用作雜交探針。,,隨機(jī)引物法,DNA標(biāo)記法比較,2單鏈DNA探針,⑴從M13載體衍生序列合成單鏈DNA探針M13噬菌體是一種單鏈DNA噬菌體，但它在感染宿主（大腸桿菌）后，在菌體細(xì)胞內(nèi)復(fù)制成為雙鏈并繁殖，又以單鏈形式透出菌體，再度感染新的宿主菌。將模板序列克隆到M13噬菌體,以特定的同用引物或人工合成寡合苷酸為引物，在?32PDNTP存在下，由KLENOW片斷酶促合成標(biāo)記探針，反應(yīng)完畢后，酶切長(zhǎng)短不一的產(chǎn)物，然后通過變性凝膠電泳與模板分離。,,⑵從RNA合成單鏈CDNA探針用RNA為模板合成CDNA探針?biāo)玫囊镉袃煞NA寡聚DT為引物合成CDNA探針。本方法只能用于帶POLYA的MRNA,并且產(chǎn)生的探針極大多數(shù)偏向于MRNA3‘末端序列。B可用隨機(jī)引物合成CDNA探針。該法可避免上述缺點(diǎn),產(chǎn)生比活性較高的探針。但由于模板RNA中通常含有多種不同的RNA分子,所得探針的序列往往比以克隆DNA為模板所得的探針復(fù)雜得多,應(yīng)預(yù)先盡量富集MRNA中的目的序列。反轉(zhuǎn)錄得到的產(chǎn)物RNA/DNA雜交雙鏈經(jīng)堿變性后,RNA單鏈可被迅速地降解成小片段,經(jīng)SEPHADEXG50柱層析即可得到單鏈探針。,3寡核苷酸探針,若只知道待分離的目的基因編碼的蛋白質(zhì)產(chǎn)物，而對(duì)其核苷酸序列一無所知，即可設(shè)計(jì)合成寡核苷酸探針。利用寡核苷酸探針可檢測(cè)到靶基因上單個(gè)核苷酸的點(diǎn)突變。單一已知序列的寡核苷酸探針種類許多兼并性寡核苷酸探針組成的寡核苷酸探針庫,,4RNA探針,許多載體如PBLUESCRIPT,PGEM等均帶有來自噬菌體SP6或ECOLI噬菌體T7或T3的啟動(dòng)子,它們能特異性地被各自噬菌體編碼的依賴于DNA的RNA聚合酶所識(shí)別,合成特異性的RNA。在反應(yīng)體系中若加入經(jīng)標(biāo)記的DNTP，則可合成RNA探針。RNA探針一般都是單鏈,它具有單鏈DNA探針的優(yōu)點(diǎn),又具有許多DNA單鏈探針?biāo)鶝]有的優(yōu)點(diǎn)，主要是RNADNA雜交體比DNADNA雜交體有更高的穩(wěn)定性,所以在雜交反應(yīng)中RNA探針比相同比活性的DNA探針?biāo)a(chǎn)生信號(hào)要強(qiáng)。RNARNA雜交體用RNA酶A酶切比S1酶切DNARNA雜交體容易控制,所以用RNA探針進(jìn)行RNA結(jié)構(gòu)分析比用DNA探針效果。,5末端標(biāo)記,（1）一種是在5末端加成標(biāo)記法先用堿性磷酸酶（AP）去掉DSDNA5磷酸，再用T4多核苷酸激酶催化標(biāo)記的ATP轉(zhuǎn)移加到DNA片段5OH上。（2）在探針3末端用末端轉(zhuǎn)移酶摻入一個(gè)單標(biāo)記的DDUTP。,6PCR擴(kuò)增標(biāo)記,在PCR擴(kuò)增時(shí)加入標(biāo)記的DNTP，不僅能對(duì)探針DNA進(jìn)行標(biāo)記還可進(jìn)行大量擴(kuò)增，尤其適合于探針DNA濃度很低的情形。,標(biāo)記一般流程,,核酸分子雜交,互補(bǔ)的核苷酸序列通過WALSONCRICK堿基配對(duì)形成穩(wěn)定的雜合雙鏈分子DNA分子的過程稱為雜交。雜交過程是高度特異性的,可以根據(jù)所使用的探針已知序列進(jìn)行特異性的靶序列檢測(cè)。,雜交類型,SOUTHERN雜交,DNA片段經(jīng)電泳分離后,從凝膠中轉(zhuǎn)移到硝酸纖維素濾膜或尼龍膜上,然后與探針雜交。被檢對(duì)象為DNA,探針為DNA或RNA。SOUTHERN雜交可用來檢測(cè)經(jīng)限制性內(nèi)切酶切割后的DNA片段中是否存在與探針同源的序列,它包括下列步驟1酶切DNA,凝膠電泳分離各酶切片段,然后使DNA原位變性。2將DNA片段轉(zhuǎn)移到固體支持物硝酸纖維素濾膜或尼龍膜上。3預(yù)雜交濾膜,掩蓋濾膜上非特異性位點(diǎn)。4讓探針與同源DNA片段雜交,然后漂洗除去非特異性結(jié)合的探針。5通過顯影檢查目的DNA所在的位置。,檢測(cè)靈敏SOUTHERN雜交能很靈敏地檢測(cè)出低于01PG與32P標(biāo)記的高比活性探針的109CPM/ΜG互補(bǔ)DNA。如果將10ΜG基因組DNA轉(zhuǎn)移到濾膜上，并與長(zhǎng)度為幾百個(gè)核苷酸的探針雜交,曝光過夜,則可檢測(cè)出哺乳動(dòng)物基因組中1KB大小的單拷貝序列。,,帶有DNA片段的凝膠,,SOUTHERN印跡雜交的技術(shù)流程,,電泳示意圖,凝膠電泳,轉(zhuǎn)印方法1毛細(xì)管虹吸優(yōu)點(diǎn)是簡(jiǎn)單,不需要用其他儀器。缺點(diǎn)是轉(zhuǎn)移時(shí)間較長(zhǎng),轉(zhuǎn)移后雜交信號(hào)較弱。2電泳轉(zhuǎn)印將DNA變性后,經(jīng)電泳印移至帶電荷的尼龍膜上。優(yōu)點(diǎn)是可直接轉(zhuǎn)移較大的DNA片段，缺點(diǎn)是轉(zhuǎn)移中電流較大,溫度難以控制。通常只有當(dāng)毛細(xì)管和真空轉(zhuǎn)移無效時(shí),才予以采用。3真空轉(zhuǎn)移一般是將硝酸纖維素膜或尼龍膜放在真空室上面的多孔屏上,再將凝膠置于濾膜上,緩沖液從上面的一個(gè)貯液槽中流下,洗脫出凝膠中的DNA,使其沉積在濾膜上。該法的優(yōu)點(diǎn)是快速,在30分鐘內(nèi)就能從正常厚度45MM和正常瓊脂糖濃度1的凝膠中定量地轉(zhuǎn)移出來。轉(zhuǎn)移后得到的雜交信號(hào)比SOUTHERN轉(zhuǎn)移強(qiáng)23倍。缺點(diǎn)是如不小心，會(huì)使凝膠碎裂,在洗膜不嚴(yán)格時(shí),其背景比毛細(xì)管法的要高。,,虹吸印跡,,分子雜交爐,雜交過程,,成像觀測(cè),放射性自顯影利用標(biāo)記核素自身的放射性射線使感光材料感光成象的過程。目前常用的方法有傳統(tǒng)的膠片自顯影感光屏醫(yī)用X光片；原理爆光過程，射線粒子使X光片乳膠基質(zhì)中均勻分布的溴化銀晶粒感光形成物點(diǎn)的潛影，然后經(jīng)顯影及定影得像圖。膠片影象可在底片上直接觀察。,,X光自顯影暗盒及圖像增強(qiáng)屏,,成像觀測(cè),儲(chǔ)存磷光屏（STORAGEPHOSPHORSCREEN）一種由磷光晶體制成的影像屏（IMAGINGPLATE。經(jīng)射線爆光后IP以潛能儲(chǔ)存射線能，當(dāng)在讀取裝置下掃描讀取時(shí)，IP在掃描激光下釋放潛能發(fā)出藍(lán)綠光，光強(qiáng)與爆光時(shí)射線強(qiáng)度成正比，用光電傳感器轉(zhuǎn)換電信號(hào)，再經(jīng)模數(shù)轉(zhuǎn)換成二進(jìn)制編碼信號(hào)，由計(jì)算機(jī)成象系統(tǒng)合成為影象圖。操作用塑料薄膜蓋電泳凝膠，貼附于裝于暗盒的磷光屏曝光，然后在成像儀上，通過掃描磷光屏上儲(chǔ)存的光能進(jìn)行成象。,,UVI化學(xué)發(fā)光凝膠成像系統(tǒng),與著名的MOLECULARDYNAMICSTMPHOSPHORIMAGERTM系統(tǒng)是一樣，臺(tái)風(fēng)儲(chǔ)磷技術(shù)磷屏TYPHOON9000系列能對(duì)所有電離輻射源提供高分辨率圖像并精確定量3H32P14C33P125I35S18F99MTC大成像面積，高分辯光學(xué)系統(tǒng)和靈敏的磷屏組合，為您提供可靠的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。下圖給出的是用32P標(biāo)記的ATLASTM微陣列MACROARRAY在GP屏上的圖像。,,成像觀測(cè),閃爍光纖屏由塑料光纖制成的板，光纖中填有鉛和發(fā)光染料，使射線能轉(zhuǎn)換為可見光光子，然后再由電荷耦合器件CCD攝像機(jī)成像。較膠片和磷光屏的分辨率好，近實(shí)時(shí)成像且需曝光量低。,成像觀測(cè),放射性薄層掃描儀由空間位置靈敏探測(cè)器組成核探測(cè)儀器?？捎糜诒訉游霭濉⒛z電泳轉(zhuǎn)印膜上放射性條帶的直接定位測(cè)定。,美國的BIOSCAN公司AR2000圖像掃描儀,AR2000圖像掃描儀可對(duì)所有類型同位素（包括3H）標(biāo)記的TLC板、凝膠、印跡進(jìn)行直接定位定量計(jì)數(shù)測(cè)量。掃描儀采用充氣式計(jì)數(shù)器，可檢測(cè)Γ和Β射線的同位素。對(duì)整塊薄層層析條帶的掃描可在1分鐘內(nèi)完成。整套系統(tǒng)包括一個(gè)儀器控制和數(shù)據(jù)采集軟件，掃描結(jié)果以層析圖或2D圖像顯示，自動(dòng)完成對(duì)峰的定量，并以多種方式顯示結(jié)果。應(yīng)用于TLC板、凝膠和印跡不需破壞TLC板即可進(jìn)行定量對(duì)所有類型同位素（包括3H）靈敏簡(jiǎn)單易用的WINSCAN軟件快速、自動(dòng)、可靠的運(yùn)行提供出色的空間分辨率針對(duì)1、2、3塊TLC板可選擇不同的型號(hào)2D彩色圖像主要應(yīng)用于放射化學(xué)純度、脂類生物化學(xué)、代謝研究、酶分析、毒理學(xué)研究等領(lǐng)域。,,瑞士卡瑪產(chǎn)地德國,同位素薄層掃描儀技術(shù)參數(shù)掃描面積為400200MM（GITA,RITA）50200MMMINIGITA,MINIRITA掃描速度可選軌道數(shù)目180檢測(cè)器ΓRADIATIONBGODETECTOR，?RADIATIONGMCOUNTINGTUBE，GASFLOW檢測(cè)能量范圍02000KEV可檢測(cè)的放射物ΓRADIATIONBGOSCINTILLATIONPROBE背景129I07CPS20100KEV靈敏度129I20BQIN10MIN分辨率129I23MMDEPENDINGONTHEUSEDCOLLIMATOR可檢測(cè)的放射物?RADIATIONOPENPROPORTIONALCOUNTINGTUBERECOMMENDEDFOR3HREQUIRESCOUNTINGGASP1090AR10CH4背景18F01CPS靈敏度18F10BQIN10MIN分辨率18F12MM,防護(hù)措施,,,INSPECTOR,NORTHERN雜交,NORTHERN雜交與SOUTHERN雜交很相似,主要區(qū)別是被檢測(cè)對(duì)象為RNA,其電泳在變性條件下進(jìn)行,以去除RNA中的二級(jí)結(jié)構(gòu),保證RNA完全按分子大小分離。變性劑主要有3種乙二醛，甲醛，羥甲基汞。電泳后的瓊脂糖凝膠用與SOUTHERN轉(zhuǎn)移相同的方法將RNA轉(zhuǎn)移到硝酸纖維素濾膜上,然后與探針雜交。,菌落原位雜交,對(duì)分散在若干個(gè)瓊脂平板上的少數(shù)菌落（100200）進(jìn)行克隆篩選時(shí)，可采用本方法。將這些菌落歸并到一個(gè)瓊脂主平板以及已置于第二個(gè)瓊脂平板表面的一張硝酸纖維素濾膜上。經(jīng)培養(yǎng)一段時(shí)間后，對(duì)菌落進(jìn)行原位裂解。主平板應(yīng)貯存于4℃直至得到篩選結(jié)果。,,菌落原位雜交,,斑點(diǎn)雜交,斑點(diǎn)雜交是指將DNA或RNA樣品直接點(diǎn)在硝酸纖維素濾膜上,然后與核酸探針分子雜交，以顯示樣品中是否存在特異的DNA或RNA。同一種樣品經(jīng)不同倍數(shù)的稀釋,還可以得到半定量的結(jié)果。所以它是一種簡(jiǎn)便、快速、經(jīng)濟(jì)的分析DNA或RNA的方法,在基因分析和基因診斷中經(jīng)常用到,是研究基因表達(dá)的有力工具。但由于目的序列未與非目的序列分離,不能了解目的序列的長(zhǎng)度。尤其當(dāng)本底干擾較高時(shí),難以區(qū)分目的序列信號(hào)和干擾信號(hào)。,,DNA序列分析,SANGER雙脫氧鏈終止法CAMBRIDGE的FSANGER于1977年發(fā)明?；驹恝貲NA聚合酶能夠以單鏈DNA作為模板，準(zhǔn)確合成的DNA互補(bǔ)鏈；②該酶能夠用2，3雙脫氧核苷三磷酸作底物并將其聚合到新生寡核苷酸鏈的3末端，從而終止其延伸反應(yīng)。在DNA測(cè)序反應(yīng)中，加入模板DNA，引物（特異性引物，如T7，T3，M13等），DNA聚合酶，DA，DT，DG，DC和一種DDNTP。常用KLENOW大片段，無5→3外切酶活性。,,DNA序列分析,MAXAMGILBERT化學(xué)修飾法哈佛大學(xué)對(duì)一個(gè)末端標(biāo)記的DNA片段，用化學(xué)試劑在A、G、C、T處特定地裂解DNA片段。把反應(yīng)分為四組，每一組反應(yīng)特異性地針對(duì)某一種或某一類堿基，并且要保證每個(gè)DNA分子平均只有一個(gè)靶堿基被修飾，這樣，在每一組反應(yīng)中都在同一個(gè)或兩個(gè)核苷酸處DNA鏈發(fā)生斷裂，由于堿基位置不同，就會(huì)產(chǎn)生一組不同長(zhǎng)度的DNA片段。最后，經(jīng)過變性聚丙烯酰胺凝膠電泳分離，放射自顯影后就可讀出待測(cè)DNA的核苷酸序列。,化學(xué)修飾法,,MAXAMGILBERT法所用的化學(xué)修飾技術(shù),DNA序列分析,DNA序列分析自動(dòng)化用四甲基若丹明TETRAMETHYLRHODAMINE作為熒光劑標(biāo)記DNA引物，帶有這種引物的DNA片段能在激光誘導(dǎo)下發(fā)出熒光。按照標(biāo)準(zhǔn)的雙脫氧終止法或化學(xué)終止法進(jìn)行測(cè)序反應(yīng)，跑DNA凝膠后用計(jì)算機(jī)檢測(cè)。,,熒光標(biāo)記物,,,,,,DDGTP,DDATP,DDTTP,DDCTP,,,,,,,,,,,,,單泳道電泳及信號(hào)收集,,,,,,,,,正極,負(fù)極,,,,,,,,,,計(jì)算機(jī)排序,5ˊ,GSFLX系統(tǒng)超高通量測(cè)序技術(shù)原理GSFLX系統(tǒng)的測(cè)序原理和GS20一樣，也是一種依靠生物發(fā)光進(jìn)行DNA序列分析的新技術(shù)在DNA聚合酶，ATP硫酸化酶，熒光素酶和雙磷酸酶的協(xié)同作用下，將引物上每一個(gè)DNTP的聚合與一次熒光信號(hào)釋放偶聯(lián)起來圖1。通過檢測(cè)熒光信號(hào)釋放的有無和強(qiáng)度，就可以達(dá)到實(shí)時(shí)測(cè)定DNA序列的目的。此技術(shù)不需要熒光標(biāo)記的引物或核酸探針，也不需要進(jìn)行電泳；具有分析結(jié)果快速、準(zhǔn)確、靈敏度高和自動(dòng)化的特點(diǎn)。,GSFLX系統(tǒng)的操作過程GSFLX系統(tǒng)提供了完整的從樣品制備到后續(xù)的生物信息學(xué)分析解決方案。1）樣品種類GSFLX系統(tǒng)支持各種不同來源的樣品序列測(cè)定包括基因組DNA，PCR產(chǎn)物，BAC，CDNA，小分子RNA等等。2）樣品DNA打斷樣品例如基因組DNA或者BAC等被打斷成300－800BP的片段；對(duì)于小分子的非編碼RNA，這一步驟則不需要。短的PCR產(chǎn)物則可以利用GS融合引物進(jìn)行擴(kuò)增后直接進(jìn)行步驟4的工作。3）銜接子連接借助一系列標(biāo)準(zhǔn)的分子生物學(xué)技術(shù)，將A和B接頭（3’和5’端具有特異性）連接到DN段上。接頭也將在后繼的純化，擴(kuò)增和測(cè)序步驟中用到。圖中僅僅顯示了后續(xù)步驟中要用到的單鏈的DN段。,GSFLX系統(tǒng)的操作過程4）一條DNA片段＝一個(gè)磁珠接頭使成百上千條DN段結(jié)合到它們自己唯一的磁珠上，此磁珠被單個(gè)油水混合小滴包被后，在這個(gè)小滴里進(jìn)行獨(dú)立的擴(kuò)增，而沒有其他的競(jìng)爭(zhēng)性或者污染性序列的影響；整個(gè)DN段進(jìn)行平行擴(kuò)增。5）一個(gè)磁珠＝一條讀長(zhǎng)經(jīng)過PCR擴(kuò)增后，每個(gè)磁珠上的DN段擁有了成千上萬個(gè)相同的拷貝。經(jīng)過富集以后，這些片段仍然和磁珠結(jié)合在一起，隨后就可以放入到PICOTITERPLATE板中供后繼測(cè)序使用了。6）數(shù)據(jù)讀取和分析工具GSFLX系統(tǒng)在75小時(shí)的運(yùn)行當(dāng)中可獲得40多萬個(gè)讀長(zhǎng)，讀取超過1億個(gè)堿基信息。GSFLX系統(tǒng)提供三種不同的生物信息學(xué)工具對(duì)測(cè)序數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，適用于不同的應(yīng)用例如多達(dá)3GB序列的重測(cè)序，對(duì)比已知參考序列進(jìn)行的擴(kuò)增產(chǎn)物差異分析，及120MB的從頭測(cè)序工作等。,,備注,焦磷酸測(cè)序PYROSEQUENEING是通過核苷酸和模板結(jié)合后釋放的焦磷酸引發(fā)酶級(jí)聯(lián)反應(yīng)，促使熒光素發(fā)光并進(jìn)行檢測(cè)的測(cè)序技術(shù)。既可進(jìn)行DNA序列分析，又可進(jìn)行基于序列分析的單核昔酸多態(tài)性SINGLE年NUELEOTIDEPOLYMOHISM，SNP檢測(cè)及等位基因頻率測(cè)定。焦磷酸測(cè)序是由DNA聚合酶DNAPOLYMERASE、三磷酸腺酰硫酸化酶ATPSULFURYLASE、熒光素酶LUCIFERASE和雙磷酸酶APYRASE4種酶催化同一反應(yīng)體系的酶級(jí)聯(lián)化學(xué)發(fā)光反應(yīng)，反應(yīng)底物為5’磷酰硫酸ADENOSINES5’PHOSPHOSUIFATE，ASP）,,備注,和熒光素。反應(yīng)體系還包括待測(cè)序DNA單鏈和測(cè)序引物。在每一輪測(cè)序反應(yīng)中，加人1種DNTP，若該DNTP與模板配對(duì)，聚合酶就可以將其摻人到引物鏈中并釋放出等摩爾數(shù)的焦磷酸基團(tuán)PPI。硫酸化酶催化APS和PPI形成ATP，后者驅(qū)動(dòng)熒光素酶介導(dǎo)的熒光素向氧化熒光素的轉(zhuǎn)化，發(fā)出與ATP量成正比的可見光信號(hào)，并由PYROGRAMMT轉(zhuǎn)化為一個(gè)峰值，其高度與反應(yīng)中摻入的核苷酸數(shù)目成正比。根據(jù)加人DNTP類型和熒光信號(hào)強(qiáng)度就可實(shí)時(shí)記錄模板DNA的核昔酸序列。,DNA序列分析,DNA雜交測(cè)序法SBHSEQUENCINGBYHYBRIDIZATION如果一段較短的DNA探針能與較長(zhǎng)的DNA片段雜交，并形成完全的雙鏈結(jié)構(gòu)，則可認(rèn)為靶DNA上存在著相應(yīng)的互補(bǔ)序列，這就是DNA雜交測(cè)序法的基本原理。如果將一種12MER的靶DNA與完全隨機(jī)合成的8MER寡核苷酸探針混合雜交，在總數(shù)為4865536種8MER的探針群體中，僅有5種探針會(huì)與靶DNA雜交，形成完全互補(bǔ)的雙鏈分子。,DNA雜交測(cè)序法,SBH的應(yīng)用①可有效檢測(cè)靶DNA中的單堿基突變；②可用于不同DNA片段之間的序列比較；③可用于檢測(cè)不同生長(zhǎng)發(fā)育狀態(tài)下細(xì)胞中特定基因的表達(dá)狀況；④可用于檢驗(yàn)傳統(tǒng)測(cè)序技術(shù)的準(zhǔn)確性。,蛋白質(zhì)研究技術(shù),WESTERN免疫印跡將蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)移到膜上，然后利用抗體進(jìn)行檢測(cè)。對(duì)已知表達(dá)蛋白，可用相應(yīng)抗體作為一抗進(jìn)行檢測(cè)，對(duì)新基因的表達(dá)產(chǎn)物，可通過融合部分的抗體檢測(cè)。WESTERNBLOT采用的是聚丙烯酰胺凝膠電泳，被檢測(cè)物是蛋白質(zhì)，“探針”是抗體。經(jīng)過PAGE分離的蛋白質(zhì)樣品，轉(zhuǎn)移到固相載體（如硝酸纖維素膜）上，固相載體以非共價(jià)鍵形式吸附蛋白質(zhì)，且保持電泳分離的多肽類型及其生物學(xué)活性不變。以固相載體上的蛋白質(zhì)或多肽作為抗原，與對(duì)應(yīng)的抗體起免疫反應(yīng)，再與酶或同位素標(biāo)記的第二抗體起反應(yīng)，經(jīng)過底物顯色或放射自顯影以檢測(cè)電泳分離的特異性目的基因表達(dá)的蛋白成分。該技術(shù)也廣泛應(yīng)用于檢測(cè)蛋白水平的表達(dá)。,,WB,,PCR應(yīng)用,1PCR技術(shù)的原理無細(xì)胞克隆法以擬擴(kuò)增的DNA片段為模板，一對(duì)分別與模板互補(bǔ)的寡核苷酸為引物，在4種脫氧核苷酸（DNTP）存在下，由DNA聚合酶在引物所結(jié)合的位置向3’方向合成新的互補(bǔ)鏈。其反應(yīng)以雙鏈DNA的變性、退火、延伸為一個(gè)循環(huán)。經(jīng)過多次循環(huán)（2530次），便目標(biāo)DNA片段得以大量擴(kuò)增。由于每一次循環(huán)所產(chǎn)生的新鏈均可成為新的模板用于下一輪循環(huán)，故PCR產(chǎn)物以指數(shù)方式增加。,MULLIS的PCR構(gòu)思,,,預(yù)變性9395?C,25M,變性9395?C,30S,復(fù)性5070?C,30S,延伸75?C,3060S,總延伸75?C,7M,,,,,,2535,PCR的一般過程,經(jīng)過30次的循環(huán),擴(kuò)增的DNA片段可達(dá)100萬倍以上。,PCR技術(shù)的原理,PCR步驟（1）高溫變性，雙鏈DNA變性（90～95℃）成為單鏈；（2）低溫退火（3760℃），引物與單鏈DNA互補(bǔ)序列結(jié)合；（3）適溫延伸，DNA聚合酶催化（7075℃）使引物延伸。（4）重復(fù)（1）（3）步。,PCR技術(shù)的原理,實(shí)驗(yàn)材料、儀器和試劑1材料含1KB插入片段的克隆載體PMD18T質(zhì)粒DNA2儀器微量移液器及吸頭、PCR儀及PCR管瓊脂糖凝膠電泳設(shè)備3試劑10XPCR反應(yīng)緩沖液25MMOL/LMGCL210MMOL/LDNTP10ΜMOL/L引物1和引物2,PCR操作步驟,1按照如下體積向PCR管中按順序加入各試劑并混勻10XPCR反應(yīng)緩沖液25ΜL25MMOL/LMGCL220ΜL10MMOL/LDNTP10ΜL10ΜMOL/L引物110ΜL10ΜMOL/L引物210ΜL質(zhì)粒DNA10ΜLTAQ01ΜL5U水補(bǔ)充至250ΜL,2PCR循環(huán),,PCR儀,,3反應(yīng)完成后,將反應(yīng)液與凝膠電泳緩沖液按比例混勻,上樣電泳。,PCR操作步驟,,,,PCR應(yīng)用,,PCR應(yīng)用,2與標(biāo)記相結(jié)合的應(yīng)用LPPCRLABELLEDPRIMERS利用同位素、熒光素等對(duì)PCR引物進(jìn)行標(biāo)記，可用以直觀的檢測(cè)目的基因，特別適合于臨床基因診斷，同時(shí)可以檢測(cè)多種基因成分。,PCR應(yīng)用,2與標(biāo)記相接合的應(yīng)用原位PCRISPCR以整個(gè)細(xì)胞作為反應(yīng)體系，對(duì)目的基因進(jìn)行擴(kuò)增，然后通過原位雜交等不破壞細(xì)胞結(jié)構(gòu)的方法進(jìn)行檢測(cè)的方法。其檢測(cè)標(biāo)本一般為細(xì)胞涂片或組織切片，適合低拷貝靶序列的檢測(cè)。可用于細(xì)胞內(nèi)的病毒感染、基因重排，以及基因表達(dá)的檢測(cè)。,

簡(jiǎn)介：微生物學(xué)檢驗(yàn)一選擇題1用來測(cè)量細(xì)菌大小的單位是ACMBMMCUMDNM2細(xì)菌缺乏下列哪一種結(jié)構(gòu)仍可存活（）A細(xì)胞壁B細(xì)胞核C細(xì)胞質(zhì)D核3抗毒素（）A為外毒素經(jīng)甲醛處理后獲得B可中和游離外毒素性作用C可中和與易感細(xì)胞結(jié)合的外毒素的毒性作用D由細(xì)菌內(nèi)毒素刺激機(jī)體產(chǎn)生4關(guān)于病毒核酸（）A可控制病毒的遺傳和變異B決定病毒包膜所有成分的形成CRNA不能攜帶遺傳信息D不能決定病毒的感染性5病毒的致病因素（）A內(nèi)毒素B外毒素C莢膜D以上都不是6對(duì)外界抵抗力最強(qiáng)的細(xì)菌結(jié)構(gòu)（）A細(xì)胞壁B莢膜C芽孢D核質(zhì)7L型細(xì)菌特性（）A需用低滲含血清培養(yǎng)基B對(duì)青霉素敏感C細(xì)胞膜缺乏D細(xì)胞壁缺損A喹諾酮類B大環(huán)內(nèi)脂類C糖肽類D頭孢菌素類16下列屬于殺菌劑的抗生素是（）A羅紅霉素B卡那霉素C米諾環(huán)素D克林霉素17不能抑制Β內(nèi)酰胺酶的制劑是（）A他唑巴坦B克拉維酸C舒巴坦D呋喃唑坦18在Β內(nèi)酰胺類抗生素中，具有單環(huán)的抗生素為（）A氨曲南B美洛培南C氨芐青霉素D頭孢匹胺19細(xì)菌耐藥機(jī)制不包括（）A產(chǎn)生鈍化酶和滅活酶B青霉素結(jié)合蛋白改變C藥物濃度的改變C藥物作用靶位的改變20下列選項(xiàng)中不屬于膜耐藥范疇的是（）APBP突變B膜通透性降低C藥物濃度的改變D藥物作用靶位的改變21屬于Β內(nèi)酰胺酶的是（）A氨基糖苷類B紅霉素酶C頭孢菌素酶D拓?fù)洚惤Y(jié)構(gòu)22加入某種化學(xué)成分以抑制某些細(xì)菌的生長(zhǎng)而有助于需要的細(xì)菌生長(zhǎng)的培養(yǎng)基稱為（）A基礎(chǔ)培養(yǎng)基B鑒別培養(yǎng)基

簡(jiǎn)介：臨床執(zhí)業(yè)醫(yī)師微生物學(xué)模擬習(xí)題及答臨床執(zhí)業(yè)醫(yī)師微生物學(xué)模擬習(xí)題及答案A型題1甲型肝炎病毒屬于A腸道病毒70型B腸道病毒72型C腺病毒8型D皰疹病毒6型EECHO病毒A形態(tài)B大小C結(jié)構(gòu)D對(duì)熱的抵抗力E目前無法細(xì)胞培養(yǎng)4HAV隨糞便排出體外最主要的時(shí)間是A感染后1周內(nèi)

簡(jiǎn)介：臨床助理醫(yī)師微生物學(xué)模擬習(xí)題臨床助理醫(yī)師微生物學(xué)模擬習(xí)題41、維生素D3的活性形式是A2425H2D3B125H2D3C24OHD3D1H3E25HD342、哺乳類動(dòng)物體內(nèi)氨的主要去路是B氫氯噻嗪C呋塞米D氨苯蝶啶E甘露醇44、65歲以上單純主動(dòng)脈瓣狹窄的常見病因是A單純主動(dòng)脈瓣狹窄B風(fēng)濕性瓣膜病C二葉式主動(dòng)脈瓣鈣化

簡(jiǎn)介：臨床執(zhí)業(yè)醫(yī)師微生物學(xué)模擬習(xí)題臨床執(zhí)業(yè)醫(yī)師微生物學(xué)模擬習(xí)題A型題1流行性乙型腦炎病毒的傳染源是A幼豬B三帶喙庫蚊C虱D蜱E螨A野生動(dòng)物B蜱C病人D螨E豬4預(yù)防乙腦的關(guān)鍵是A防蚊滅蚊B易感人群普遍接種疫苗

簡(jiǎn)介：臨床執(zhí)業(yè)醫(yī)師微生物學(xué)練習(xí)題臨床執(zhí)業(yè)醫(yī)師微生物學(xué)練習(xí)題A型題1下列哪種結(jié)構(gòu)與細(xì)菌侵襲力有關(guān)A芽胞B莢膜C細(xì)胞壁D中介體E核糖體A由活菌釋放到菌體外的一種蛋白質(zhì)C主要由革蘭陽性菌產(chǎn)生，少數(shù)革蘭陰性菌也能產(chǎn)生E性質(zhì)穩(wěn)定，耐熱F毒力強(qiáng)G抗原性強(qiáng)4能引起內(nèi)毒素休克的細(xì)菌成分是AH抗原BO抗原

簡(jiǎn)介：臨床執(zhí)業(yè)醫(yī)師微生物學(xué)習(xí)題及答案臨床執(zhí)業(yè)醫(yī)師微生物學(xué)習(xí)題及答案A型題1流行性感冒的病原體是A流感病毒B流感桿菌C鼻病毒D呼吸道合胞病毒E腦膜炎病毒2引起急性呼吸道感染的主要病原體是A細(xì)菌B真菌C病毒D衣原體E螺旋體3呼吸道病毒是指A以呼吸道為傳播途徑的病毒B引起呼吸道局部病變C主要以呼吸道為入侵門戶，進(jìn)入血流引起全身癥狀的病毒D主要以呼吸道為入侵門戶，引起呼吸道局部病變而不引起全身癥狀的病毒E主要以呼吸道為入侵門戶，引起呼吸道局部病變或伴有全身癥狀的病毒D脂質(zhì)雙層ELPS8流感病毒在細(xì)胞內(nèi)增殖的檢測(cè)指標(biāo)通常是ACPEB紅細(xì)胞凝集或吸附試驗(yàn)C蝕斑測(cè)定D干擾現(xiàn)象E包涵體9下列哪組病毒主要經(jīng)呼吸道傳播A流感病毒、呼吸道合胞病毒、柯薩基病毒B流感病毒、麻疹病毒、脊髓灰質(zhì)炎病毒C風(fēng)疹病毒、鼻病毒、腺病毒D呼吸道合胞病毒、流感病毒、甲型肝炎病毒E腮腺炎病毒、乙型肝炎病毒、流感病毒10普通感冒的主要病原體是A流感病毒B副流感病毒C腺病毒D鼻病毒E呼吸道病毒參考答案1A2C3E4B5C6C

簡(jiǎn)介：臨床助理醫(yī)師微生物學(xué)練習(xí)試題臨床助理醫(yī)師微生物學(xué)練習(xí)試題11、滑動(dòng)疝最易發(fā)生的部位是A臍血管穿過的臍環(huán)B外傷處C愈合不良的手術(shù)切口D小網(wǎng)膜孔E髂窩區(qū)后腹膜與后腹壁結(jié)合處12、無癥狀性菌尿B人腰淋巴結(jié)C人腹股溝淋巴結(jié)D主要人閉孔淋巴結(jié)E人髂總淋巴結(jié)14、食糜進(jìn)人小腸引起胃液分泌的特點(diǎn)是A以胃蛋白酶含量增高為主B胃液的酸度和胃蛋白酶含量均高C以胃液的酸度增高為主

簡(jiǎn)介：臨床執(zhí)業(yè)醫(yī)師微生物學(xué)試題臨床執(zhí)業(yè)醫(yī)師微生物學(xué)試題1氣性壞疽易發(fā)生于A合并大腸桿菌感染時(shí)B體表、四肢C深在的開放性損傷D腸管、膽囊E子宮、肺2化生不可能發(fā)生于B成纖維細(xì)胞C肌成纖維細(xì)胞D巨噬細(xì)胞E血管內(nèi)皮細(xì)胞4下列哪項(xiàng)不是一期愈合的特點(diǎn)A組織缺損少B創(chuàng)緣整齊C炎癥反應(yīng)輕

簡(jiǎn)介：臨床執(zhí)業(yè)醫(yī)師微生物學(xué)模擬題及答案臨床執(zhí)業(yè)醫(yī)師微生物學(xué)模擬題及答案A型題1HSV1主要潛伏部位是A口唇皮膚B唾液腺C脊髓后根神經(jīng)節(jié)D骶神經(jīng)節(jié)E三叉神經(jīng)節(jié)A骶神經(jīng)節(jié)B三叉神經(jīng)節(jié)C頸上神經(jīng)節(jié)D局部淋巴結(jié)E腎4下列疾病的病因，與皰疹病毒無關(guān)的是A粘膜的局部皰疹B先天性感染

簡(jiǎn)介：臨床助理醫(yī)師微生物學(xué)模擬試題臨床助理醫(yī)師微生物學(xué)模擬試題21、患者已確診為骨巨細(xì)胞瘤，局部皮膚表淺靜脈怒張，腫脹與壓痛均顯著，觸診有乒乓球樣感覺。X線片骨密質(zhì)已破壞，斷裂。病理報(bào)告骨巨細(xì)胞瘤Ⅲ級(jí)。治療應(yīng)選擇A刮除骨水泥充填術(shù)B截肢術(shù)C刮除滅活骨水泥充填術(shù)D刮除植骨術(shù)E刮除滅活植骨術(shù)B大腿內(nèi)側(cè)及小腿外側(cè)靜脈曲張C下肢內(nèi)側(cè)和小腿后側(cè)靜脈曲張D大腿內(nèi)、外側(cè)靜脈曲張并向腹壁延伸E全下肢內(nèi)后側(cè)靜脈曲張24、在我國引起慢性腎功能衰竭最常見的原因是A慢性腎盂腎炎BE糖尿病腎病