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1、經(jīng)驗(yàn)鑒別是過(guò)去國(guó)內(nèi)對(duì)于穿山甲鑒定研究的主要集中點(diǎn)。隨著技術(shù)的進(jìn)步,顯微、薄層、液相、毛細(xì)管電泳、紅外、X衍射、DNA技術(shù)等也都相繼應(yīng)用于穿山甲的定性、定量分析。但是,穿山甲的鑒別研究主要集中于豬蹄甲、羊蹄甲等偽品摻假,而性狀鑒別依賴(lài)于檢驗(yàn)人員的經(jīng)驗(yàn)和感覺(jué)。這些方法都不是建立在穿山甲屬動(dòng)物相關(guān)成分的基礎(chǔ)上的,不能很好地反應(yīng)穿山甲屬動(dòng)物的內(nèi)在物質(zhì)基礎(chǔ),都沒(méi)有關(guān)注不同種屬穿山甲藥材的區(qū)別,而目前市場(chǎng)上穿山甲藥材品種混雜較為嚴(yán)重,因此,有必要建
2、立簡(jiǎn)便、經(jīng)濟(jì)、可靠的方法來(lái)鑒別穿山甲類(lèi)藥材,保證臨床用藥安全有效。
本研究利用收集到的4種共16個(gè)樣品的穿山甲屬動(dòng)物鱗片,通過(guò)性狀、微形態(tài)學(xué)、顯微、薄層色譜及高效液相色譜四種方法,為它的鑒別提供科學(xué)依據(jù)。
性狀鑒別進(jìn)行外觀數(shù)據(jù)的測(cè)量,隨機(jī)選取了不同材料個(gè)體和不同部位的20個(gè)穿山甲鱗片測(cè)量了其重量、長(zhǎng)度、寬度、厚度,進(jìn)行SPSS分析,并對(duì)其鱗片性狀、鱗片內(nèi)表面、斷面進(jìn)行了性狀觀察。外觀數(shù)據(jù)測(cè)量結(jié)果表明,在鱗片重量和長(zhǎng)度
3、上,大穿山甲與中華穿山甲、馬來(lái)穿山甲、樹(shù)穿山甲三者的差異達(dá)到極顯著水平(P<0.01);在鱗片寬度上大穿山甲與中華穿山甲、馬來(lái)穿山甲、樹(shù)穿山甲之間的差異達(dá)到極顯著水平(P<0.01),樹(shù)穿山甲與中華穿山甲、馬來(lái)穿山甲、大穿山甲之間的差異也達(dá)到極顯著水平(P<0.01),這主要是由于樹(shù)穿山甲整體偏瘦長(zhǎng),大穿山甲整體寬大,中華穿山甲與馬來(lái)穿山甲寬度差異不大;在鱗片厚度上,四種穿山甲之間都存在極顯著差異(P<0.01),其中大穿山甲最厚,樹(shù)穿
4、山甲最薄,中華穿山甲要厚于馬來(lái)穿山甲。四種穿山甲鱗片顏色有一定差異,中華穿山甲鱗片顏色呈褐色,顏色較深,馬來(lái)穿山甲鱗片常呈灰黑色,樹(shù)穿山甲呈紅褐色或棕黃色,大穿山甲顏色灰黃。
鱗片微形態(tài)學(xué)觀察結(jié)果表明,中華穿山甲背甲后緣平圓或凹入,馬來(lái)穿山甲背甲后緣形狀向后凸突;樹(shù)穿山背甲鱗片后緣常見(jiàn)三個(gè)尖,鱗片邊緣可見(jiàn)明顯橫向皺縮紋理,與其他三種穿山甲都有所不同,這可能是由于樹(shù)穿山甲較薄,磨損較少所致,這可以作為樹(shù)穿山甲片的鑒別依據(jù)之一。<
5、br> 薄層色譜研究結(jié)果表明,4種穿山甲屬動(dòng)物鱗片的薄層色譜均有膽固醇主斑點(diǎn),其余斑點(diǎn)也大部分對(duì)應(yīng)。其中,中華與馬來(lái)顯色前后圖譜相近,與其他兩者差異明顯。大穿山甲顯色前在Rf值0.43,0.25處有兩個(gè)明顯的熒光斑點(diǎn),其中,Rf值0.43處斑點(diǎn)在280nm波長(zhǎng)掃描下顯強(qiáng)烈吸收,明顯區(qū)別于其他品種穿山甲。顯色后樹(shù)穿山甲缺失Rf值為0.56、0.62的兩個(gè)主斑點(diǎn),與其他三者有明顯區(qū)別。
高效液相研究結(jié)果表明,隨著提取溶劑水,50
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