基于血液生理生化特性變化的屠宰場(chǎng)PSE豬肉在線快速檢測(cè)技術(shù)的研究.pdf

1、我國(guó)是全球第一大豬肉生產(chǎn)國(guó)，隨著規(guī)?；B(yǎng)殖的發(fā)展，曾困擾歐美發(fā)達(dá)國(guó)家多年的PSE肉問題在我國(guó)重現(xiàn)。與正常豬肉相比，PSE肌肉表面蒼白、質(zhì)地松軟沒有彈性且汁液損失嚴(yán)重，其營(yíng)養(yǎng)價(jià)值、食用風(fēng)味和商品價(jià)值均有不同程度的下降。目前我國(guó)的豬肉產(chǎn)業(yè)主要以熱鮮肉銷售為主，屠宰場(chǎng)生產(chǎn)的豬胴體經(jīng)過一級(jí)、二級(jí)批發(fā)市場(chǎng)進(jìn)入農(nóng)貿(mào)市場(chǎng)，然后再分割零售，而關(guān)于PSE肉的檢測(cè)方法主要有感官檢查、質(zhì)構(gòu)檢測(cè)、理化檢測(cè)和相關(guān)基因檢測(cè)（如氟烷基因）等，雖然這些方法可以有效的將

2、PSE肉檢測(cè)出來，但是它們只能在實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行或者在屠宰完成以后針對(duì)肌肉本身進(jìn)行，不能夠在屠宰場(chǎng)生產(chǎn)線上將可能攜帶有PSE肉的豬胴體提前檢測(cè)出來，PSE肉一旦流入市場(chǎng)，將會(huì)給企業(yè)帶來嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失。因此，如何避免PSE肉出廠，減少屠宰企業(yè)經(jīng)濟(jì)損失成為現(xiàn)代肉類工業(yè)亟需解決的難題。PSE肉主要由宰前處理過程中產(chǎn)生的應(yīng)激導(dǎo)致，如屠宰季節(jié)、運(yùn)輸、待宰時(shí)間和致暈方式等，而應(yīng)激直接影響生豬血液成分的變化，因此生豬的各項(xiàng)血液生理生化指標(biāo)可以敏感而準(zhǔn)確地反

3、映機(jī)體的應(yīng)激程度，可能對(duì)PSE肉的發(fā)生有一定的指示作用。本論文主要研究不同質(zhì)量豬肉對(duì)應(yīng)的血液生理生化指標(biāo)，通過建立血液生理生化指標(biāo)與PSE肉的聯(lián)系，篩選出血液生理生化指標(biāo)中表征PSE肉的生物標(biāo)志，然后針對(duì)該生物標(biāo)志建立適用于生豬在線屠宰的快速檢測(cè)方法，并用判別分析建立對(duì)不同程度發(fā)生的PSE肉的分類預(yù)測(cè)模型。
　　試驗(yàn)一:隨機(jī)選取宰前檢驗(yàn)健康合格的杜×長(zhǎng)×大三元雜交豬200頭，體重115±5 kg，分別采取每頭豬的背最長(zhǎng)肌，測(cè)定相關(guān)

4、指標(biāo)，進(jìn)行PSE肉的判定，同時(shí)分別采集其對(duì)應(yīng)的血液樣本，進(jìn)行血清生化指標(biāo)測(cè)定，然后使用單因素分析和主成分分析對(duì)不同質(zhì)量豬肉對(duì)應(yīng)的血液生理生化指標(biāo)進(jìn)行分析。結(jié)果表明:該屠宰場(chǎng)200頭豬中有15頭豬產(chǎn)生PSE肉，冬季PSE肉發(fā)生率為7.5％;與正常豬血清生化指標(biāo)相比，攜帶PSE肉的生豬血清中AST、CK、LDH、LAC和GLU水平顯著升高(P＜0.05)，PSE情況生豬血液中AST水平為161.83±51.51 U/L，CK水平為12380

5、±5030 U/L，LDH水平為2050±1240 U/L，GLU濃度為8.26±2.50mmol/L， LAC濃度為17.18±1.87mmol/L，而正常豬血液中AST水平為75.75±24.06U/L，CK水平為4240±1440 U/L，LDH水平為640±110 U/L，GLU濃度為6.55±0.98 mmol/L，LAC濃度為10.84±2.27mmol/L，其他指標(biāo)均無顯著差異(P＞0.05);通過主成分分析對(duì)200個(gè)血清

6、樣本分析，從PCA得分圖上可知，正常豬血清樣本和攜帶PSE肉的血清樣本分別聚集在兩個(gè)區(qū)域，可以被主成分得分圖區(qū)分開，從因子載荷和得分雙重信息圖上可知，血液中AST、CK、LDH、LAC和GLU的水平對(duì)PSE情況血液樣本和正常血液樣本的區(qū)分有決定性的作用，與PSE肉的發(fā)生有著緊密的聯(lián)系。研究結(jié)果表明，血液中AST、CK、LDH、LAC和GLU可以表征PSE肉的發(fā)生，可以作為PSE肉的生物標(biāo)志。
　　試驗(yàn)二:隨機(jī)選取宰前檢驗(yàn)健康合格的

7、杜×長(zhǎng)×大三元雜交豬48頭，體重115±5 kg，分別采集其對(duì)應(yīng)的血液樣本，分離血清，用全自動(dòng)生化儀測(cè)定其PSE肉生物標(biāo)志，篩選出低中高濃度樣本各4個(gè)，然后分別采用建立的連續(xù)監(jiān)測(cè)法來測(cè)定AST、CK和LDH，紫外酶動(dòng)力學(xué)法和己糖激酶法分別測(cè)定LAC和GLU，并以全自動(dòng)生化儀測(cè)定結(jié)果為基準(zhǔn)對(duì)其進(jìn)行評(píng)價(jià)，結(jié)果表明實(shí)驗(yàn)方法結(jié)果與全自動(dòng)生化儀測(cè)定結(jié)果相關(guān)性較好，變異系數(shù)均小于5％，回收率均在95％～，105％之間，該方法準(zhǔn)確度和精度均滿足要求，

8、且反應(yīng)用時(shí)較短。與全自動(dòng)生化儀測(cè)定血液生化指標(biāo)相比，在保證測(cè)定結(jié)果準(zhǔn)確、重復(fù)性好的前提下，該實(shí)驗(yàn)方法不需要昂貴儀器，且操作簡(jiǎn)單靈活，能夠更準(zhǔn)確穩(wěn)定地應(yīng)用于PSE肉生物標(biāo)志的在線快速測(cè)定。
　　試驗(yàn)三:隨機(jī)選取宰前檢驗(yàn)健康合格的杜×長(zhǎng)×大三元雜交豬500頭，體重115±5 kg，分別收集每頭豬的血液并采取對(duì)應(yīng)的背最長(zhǎng)肌，對(duì)肉品質(zhì)進(jìn)行判定，分為正常肉、輕度PSE肉、中度PSE肉和重度PSE肉，篩選出35個(gè)攜帶不同品質(zhì)肉的豬，并采集對(duì)應(yīng)

9、35個(gè)血清樣本，其中25個(gè)做為建模樣品，10個(gè)做為預(yù)測(cè)樣品，同時(shí)使用第二章中建立的在線快速檢測(cè)方法測(cè)定血清PSE肉生物標(biāo)志，然后分別利用Fisher判別和Bayes判別對(duì)25個(gè)不同質(zhì)量豬肉的血清樣本（正常肉、輕度PSE肉、中度PSE肉和重度PSE肉）的PSE肉生物標(biāo)志進(jìn)行判定，建立判別分析模型，F(xiàn)isher判別函數(shù)為:
　　F1=0.007X1+0.530X2-0.095X3+0.001X4+0.001X5-12.66
　　

10、F2=0.002X1+0.636X2+0.461X3+0.001X4-0.005X5-9.742
　　正常肉對(duì)應(yīng)血清樣本的重心為(-6.578，-1.511)，輕度PSE肉對(duì)應(yīng)血清樣本重心為(-2.816，1.088)，中度PSE肉對(duì)應(yīng)血清樣本的重心為(2.274，3.047)，重度PSE肉對(duì)應(yīng)血清樣本的重心為(12.945，-1.633)。
　　Bayes判別函數(shù)為:
　　D1=0.096X1+11.027X2+3.

11、913X3+0.008X4-0.037X5-63.698
　　D2=0.132X1+15.506X2+4.225X3+0.013 X4-0.049X5-119.580
　　D3=0.168X1+18.392X2+5.309X3+0.018X4-0.050X5-205.344
　　D4=0.239X1+21.543X2+1.837X3+0.022X4-0.014X5-372.625
　　Fisher判別模型和Bay

12、es判別模型對(duì)不同品質(zhì)豬肉對(duì)應(yīng)血清樣本和未知類別血清樣本的判定正確率均為100％，無一例錯(cuò)判。結(jié)果表明該判別模型能夠很好的將不同質(zhì)量豬肉的血液樣本判定出來，可以有效的應(yīng)用于屠宰場(chǎng)PSE肉的在線檢測(cè)。
　　試驗(yàn)四:隨機(jī)選取宰前檢驗(yàn)健康合格的杜×長(zhǎng)×大三元雜交豬500頭，體重115±5 kg，使用PSE肉在線快速檢測(cè)技術(shù)來預(yù)判可能攜帶PSE肉的豬胴體，通過測(cè)定肌肉指標(biāo)和屠宰場(chǎng)完善的追蹤系統(tǒng)進(jìn)行驗(yàn)證。試驗(yàn)結(jié)果表明，該技術(shù)對(duì)PSE肉的總判