桔小實蠅為害柑橘的生物學特性及其嗅覺感受機制研究.pdf

1、桔小實蠅是一種重要的檢疫性害蟲,可選擇香蕉、柑橘和芒果等多種水果作為寄主,其危害方式主要是以雌蟲產(chǎn)卵于果皮下,幼蟲取食果肉,從而導致水果腐爛或未熟先黃而落,嚴重影響了水果的產(chǎn)量和品質(zhì),有的甚至完全失去食用價值,給水果產(chǎn)業(yè)造成了嚴重的經(jīng)濟損失。目前對桔小實蠅的綜合防治過程中,誘劑誘殺是一種既有效又環(huán)保的防治措施,但目前采用的甲基丁香酚僅引誘雄蟲,而桔小實蠅的危害方式特殊,給防治帶來困難。此外,化學防治又不符合綠色環(huán)保的理念,所以開發(fā)桔小實

2、蠅雌蟲誘劑已成為一種新的生防思路。本論文研究桔小實蠅為害幾種不同柑橘的生物學特性及其嗅覺感受機制,為開發(fā)桔小實蠅雌蟲誘劑提供實驗依據(jù)。主要是研究內(nèi)容和結果如下:
　　1.桔小實蠅取食不同柑橘年度間生物學特性的差異研究連續(xù)兩年對桔小實蠅取食4類7種柑橘,即寬皮柑橘類的大葉尾張、本地早、宮川、椪柑,雜柑類的胡柚,金柑類的金桔,和枸櫞類的檸檬等柑橘類果實后生活史變化的觀察,結果表明桔小實蠅的幼蟲歷期與蛹歷期呈顯著的負相關性,相關系數(shù)為-

3、0.812;而一般,蟲輕蛹殼重與蟲重蛹殼輕的,其存活率均不高;而蛹殼重(0.95mg-1.0mg)或蟲體重適中(12mg-15mg)的桔小實蠅存活率均較高。尤其是金桔,兩年的存活率分別為95％與80%,均屬第一位;其次是椪柑、本地早等寬皮桔類,以檸檬和宮川為最低。不同年度間寬皮橘和雜柑類各品種上的性比較穩(wěn)定,性比值均>1,其中椪柑上雌蟲數(shù)穩(wěn)定多于雄蟲;而胡柚上雄蟲數(shù)穩(wěn)定多于雌蟲。此外,根據(jù)幼蟲歷期及其相應的成蟲或蛹及蛹殼的輕重,可初步推

4、斷金桔是桔小實蠅生長較適宜的果品,而檸檬為不太適宜的果品。經(jīng)生命表分析,在胡柚上桔小實蠅凈增殖率R0、內(nèi)稟增長率rm與周期增長率λ最大,種群加倍時間DT最短;在檸檬上R0、rm和λ值最小,而T和DT最長,而其他品種間差異不大。
　　2.桔小實蠅氣味結合蛋白BdorOBP2的基因克隆、表達和純化利用PCR技術克隆得到了桔小實蠅氣味結合蛋白基因BdorOBP2開放閱讀框全長,GenBank登錄號為KC773766。序列分析表明,Bdo

5、rOBP2的ORF長約447bp,編碼了148個氨基酸;多重序列比對結果表明,BdorOBP2蛋白與擬黃果蠅和黑腹果蠅的序列相似性最高;通過系統(tǒng)發(fā)育分析,桔小實蠅與雙翅目昆蟲的親緣關系較近,特別是蔥地種蠅的DantOBP2。并且構建了BdorOBP2原核表達載體,誘導表達獲得了BdorOBP2重組蛋白,為下一步的熒光結合實驗打下了基礎。
　　3.桔小實蠅氣味結合蛋白BdorOBP2的結合特性熒光競爭結合實驗結果表明,BdorOBP

6、2與醛類和酯類物質(zhì)的結合能力較強,而與醇類和烯類化合物的結合能力較弱。在酯類化合物的結合實驗中,除順3-己烯乙酸酯和水楊酸甲酯外,大多數(shù)氣味揮發(fā)物都能將1-NPN與BdorOBP2的結合率降至50%以下;在醛類化合物中,除乙醛外,幾乎都能將1-NPN與BdorOBP2的結合率降至50%以下,其中苯甲醛和3,4二甲基苯甲醛的結合能力最強,并且它們可以將相對熒光值競爭至10%或以下;BdorOBP2與β-紫羅蘭酮的結合能力也較強,且也能夠?qū)?/p>

7、1-NPN與BdorOBP2的結合率降至7%。這表明這些重要的揮發(fā)性物質(zhì)在桔小實蠅對寄主水果進行定位、產(chǎn)卵和危害等過程中發(fā)揮著重要的作用。
　　4.桔小實蠅對揮發(fā)性物質(zhì)的觸角電位反應觸角電位反應結果顯示,桔小實蠅對大多數(shù)酯類和醛類物質(zhì)具有較高的反應活性,這與結合實驗結果基本一致。桔小實蠅雌蟲對反-2-己烯醛和苯甲醛均能產(chǎn)生較強的電生理反應活性,而水楊酸甲酯卻能對雄蟲產(chǎn)生較強的反應活性,在熒光結合試驗中癸醛是結合較好的一種配基,但在