大鼠動脈瘤模型水凝膠彈簧圈HydroCoil栓塞治療的相關(guān)研究.pdf

1、第一部分:大鼠動脈瘤水凝膠彈簧圈HydroCoil栓塞的體內(nèi)研究
　　目的:HELPS臨床試驗研究結(jié)果顯示，與裸鉑金彈簧圈栓塞相比，用水凝膠彈簧圈HydroCoil栓塞系統(tǒng)治療腦動脈瘤時患者的復(fù)發(fā)率明顯降低了8.6％。在本實(shí)驗中，我們分別將裸鉑金彈簧圈和水凝膠彈簧圈HydroCoil植入大鼠動脈瘤模型中，旨在研究HydroCoil栓塞后的動脈瘤腔病理變化及其優(yōu)于裸鉑金彈簧圈的可能機(jī)制。
　　材料與方法:制備大鼠頸外動脈盲袋動

2、脈瘤模型，將長度為5mm的裸鉑金彈簧圈和水凝膠彈簧圈HydroCoil分別植入動脈瘤處，對照組除了未植入彈簧圈外，其余操作均同彈簧圈植入治療組。彈簧圈植入后14天，過量麻醉處死大鼠，將整個頸總動脈分叉部連同動脈瘤一起取出。動脈瘤腔連同周圍血管組織固定染色后行組織病理學(xué)檢測。ImageJ軟件勾畫并計算機(jī)化面積占管腔面積的百分比和剩余內(nèi)膜彈力層的百分比，進(jìn)行統(tǒng)計分析。
　　結(jié)果:彈簧圈植入大鼠動脈瘤14天后可以觀察到，水凝膠彈簧圈Hy

3、droCoil植入治療組，ECA瘤腔處的機(jī)化組織面積百分比明顯高于裸鉑金彈簧圈植入組(60.42±22.58％ vs.15.62±19.24％;P=.01)和對照組(60.42±22.58％ vs.4.61±3.86％，P=.002)。水凝膠彈簧圈HydrogelCoil植入大鼠ECA盲袋動脈瘤治療14天后，ECA瘤腔剩余彈力層的百分比遠(yuǎn)遠(yuǎn)低于對照組和裸鉑金彈簧圈治療組，分別為21.67±16.50％ vs.100％和96.06±8.7

4、8％;P＜0.001。而機(jī)化組織面積百分比和剩余彈力層的百分比在對照組和裸鉑金彈簧圈植入治療組之間無統(tǒng)計差異。
　　結(jié)論:在大鼠ECA盲袋動脈瘤模型上，水凝膠彈簧圈HydroCoil能夠引起明顯的動脈瘤壁組織增生機(jī)化和修復(fù)，而并非裸鉑金彈簧圈引起的瘤腔內(nèi)血栓形成和組織機(jī)化，這可能是由于HydroCoil能引起更多的血管內(nèi)皮和彈力層的破壞以及平滑肌細(xì)胞的增生所致。
　　第二部分:血管內(nèi)皮細(xì)胞在水凝膠彈簧圈HydroCoil上的

5、生長增值
　　目的:在第一部分實(shí)驗中，通過大鼠ECA盲袋動脈瘤模型觀察到，水凝膠彈簧圈HydroCoil能引起動脈瘤壁的血管內(nèi)皮和彈力層的破壞以及平滑肌細(xì)胞的增生。本實(shí)驗中我們將血管內(nèi)皮細(xì)胞接種在兩種彈簧圈進(jìn)行培養(yǎng)，比較血管內(nèi)皮細(xì)胞在兩種彈簧圈上生長增殖情況的差別，分析兩種彈簧圈在大鼠動脈瘤模型中引起不同組織反應(yīng)的可能機(jī)制。
　　材料與方法:將小鼠的腦血管內(nèi)皮細(xì)胞系bEnd3培養(yǎng)后分別接種子水凝膠彈簧圈HydroCoil和裸

6、鉑金彈簧圈上，在不同的時間點(diǎn)（第0、1、3、7、14和21天）將彈簧圈上生長的細(xì)胞用胰蛋白酶洗脫下來進(jìn)行計數(shù)，描述血管內(nèi)皮細(xì)胞在彈簧圈上的生長曲線，并進(jìn)行細(xì)胞的Live/Dead和PECAM-1熒光染色。
　　結(jié)果:腦血管內(nèi)皮細(xì)胞bEnd3在水凝膠彈簧圈HydroCoil上生長3天就達(dá)到高峰，但是3天后細(xì)胞明顯凋亡，而在裸鉑金彈簧圈上生長到第14天才到達(dá)高峰，而且高峰細(xì)胞數(shù)量也不及HydroCoil。Live/Dead細(xì)胞染色顯示

7、在裸鉑金彈簧圈上，細(xì)胞死亡后部分會粘附在彈簧圖表面，而在水凝膠彈簧圈HydroCoil上則沒有。水凝膠彈簧圈HydroCoil上的內(nèi)皮細(xì)胞表達(dá)PECAM-1較裸鉑金彈簧圈上的明顯弱。
　　結(jié)論:血管內(nèi)皮細(xì)胞在水凝膠彈簧圈HydroCoil上的生長增殖較裸鉑金彈簧圈迅速且顯著，但是凋亡也較快;而且在水凝膠彈簧圈HydroCoil上的血管內(nèi)皮細(xì)胞粘附能力較裸鉑金彈簧圈差。
　　第三部分:抗血小板藥對大鼠動脈瘤模型彈簧圈栓塞后動脈

8、瘤血栓化的影響
　　目的:支架輔助下的彈簧圈栓塞使顱內(nèi)巨大動脈瘤、寬頸動脈瘤和梭形動脈瘤均能進(jìn)行血管內(nèi)介入治療，但是其主要缺點(diǎn)是血栓形成。支架輔助動脈瘤栓塞術(shù)后抗血小板治療已經(jīng)被廣泛接受，但是口服抗血小板藥物在防止載瘤動脈血栓形成的同時是否會延遲動脈瘤內(nèi)血栓形成，目前尚無相關(guān)研究。本實(shí)驗利用大鼠ECA盲袋動脈瘤彈簧圈栓塞模型，研究目前臨床上常用的抗血小板藥物對彈簧圈栓塞后短期內(nèi)動脈瘤內(nèi)血栓形成和組織機(jī)化的影響。
　　材料與方

9、法:將30只大鼠隨機(jī)分為6組，每組5只。3組為裸鉑金彈簧圈植入組:阿司匹林組、氯吡格雷組和聯(lián)合用藥（阿司匹林+氯吡格雷）組。另3組為水凝膠彈簧圈HydroCoil植入組:阿司匹林組、氯吡格雷組和聯(lián)合用藥組。裸鉑金彈簧圈植入組和HydroCoil植入組分別用本實(shí)驗研究的第一部分中的數(shù)據(jù)作為各自的對照。給藥劑量為阿司匹林200mg/Kg，氯吡格雷75mg/Kg，聯(lián)合用藥是200mg/Kg阿司匹林+75mg/Kg氯吡格雷同時給予。給藥時間為手

10、術(shù)前1h給藥1次，手術(shù)后第1天開始每天給藥1次，直到第14天處死。給藥途徑為將藥物碾碎后按照大鼠體重稱取相應(yīng)重量的藥物，將其溶于1-2ml大鼠飲用水中制成混懸液，通過灌胃給藥。利用大鼠ECA盲袋動脈瘤模型，彈簧圈植入14天后，過量麻醉處死大鼠，將整個頸總動脈分叉連同動脈瘤一起取出。動脈瘤腔連同周圍血管組織固定染色后行組織病理學(xué)檢測，計算機(jī)化面積占管腔面積的百分比并進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析。
　　結(jié)果:大鼠動脈瘤模型植入裸鉑金彈簧圈后14天，

11、動脈瘤腔血栓形成和組織機(jī)化所占瘤腔的百分比在對照組、阿司匹林組、氯吡格雷組和聯(lián)合用藥組分別為15.62±19.24％ vs.13.62±5.22％ vs.8.20±9.23％ vs.24.46±23.90％，各組間比較均無明顯統(tǒng)計學(xué)差異。水凝膠彈簧圈HydroCoil植入后14天，動脈瘤內(nèi)血栓形成和組織機(jī)化所占瘤腔的百分比在各組分別為60.42±22.58％ vs.48.95±7.43％ vs.46.73±16.12％ vs.49.01