毒死蜱及TCP對生物DNA的損傷和土壤微生物多樣性的影響.pdf

1、毒死蜱(Chlorpyrifos)是一種常用的有機磷殺蟲劑，其化學(xué)名稱為：O，O-二乙基-O-(3，5，6-三氯-2-吡啶基)硫代磷酸酯，主要用于農(nóng)作物害蟲和家庭衛(wèi)生害蟲的防治。毒死蜱作為高毒農(nóng)藥甲胺磷、甲基對硫磷等替代品被廣泛使用，現(xiàn)已成為世界上應(yīng)用最廣泛的殺蟲劑之一。近年來，毒死蜱的毒性效應(yīng)備受關(guān)注，許多國家已經(jīng)認識到毒死蜱的危害，并逐步限制甚至禁止使用毒死蜱。毒死蜱在環(huán)境中的主要降解產(chǎn)物為TCP(3，5，6-三氯-2-吡啶酚)，毒

2、死蜱的廣泛使用導(dǎo)致環(huán)境中存在一定量的TCP。TCP較毒死蜱水溶性大、移動性強，從而更容易滲入地下，污染水體和土壤，對環(huán)境生物造成危害。本研究采分子生物學(xué)技術(shù)，研究了毒死蜱及其降解產(chǎn)物TCP對蠶豆、蚯蚓和土壤微生物的毒性影響，為了解和認識毒死蜱及降解產(chǎn)物TCP對生態(tài)系統(tǒng)的影響提供依據(jù)。主要研究結(jié)果如下： 1、微核實驗：將蠶豆次生根的根尖分別用0.01、0.1、1.0、10.0 mg·L-1毒死蜱溶液和0.01、0.1、1.0、5.

3、0 mg·L-1TCP溶液處理12、24、36、48h，測定蠶豆根尖細胞微核率。實驗結(jié)果表明，一定劑量的毒死蜱和TCP可誘導(dǎo)蠶豆根尖細胞產(chǎn)生微核，這說明毒死蜱和TCP對蠶豆根尖細胞可造成一定程度的遺傳損害；通過比較毒死蜱和TCP誘導(dǎo)蠶豆根尖細胞產(chǎn)生的微核率，可知毒死蜱降解產(chǎn)物TCP對蠶豆具有更大的遺傳毒性。 2、單細胞凝膠電泳實驗(SCGE)：在人工土中添加毒死蜱，使得毒死蜱的終濃度為0.01、0.1、1.0和10.0mg·kg

4、-1，另在人工土中添加TCP，使得TCP的終濃度為0.01、0.1、1.0和5.0mg·kg-1，然后將赤子愛勝蚓放入人工土中染毒7、14、21、28d，通過單細胞電泳檢測了毒死蜱及TCP對蚯蚓體腔細胞DNA的損傷。實驗結(jié)果表明：經(jīng)不同濃度毒死蜱和TCP處理均可造成蚯蚓細胞DNA損傷，而且隨著濃度的增加和時間的延長，彗星拖尾長度、Olive尾矩的值呈上升的趨勢，這說明毒死蜱、TCP可對蚯蚓體腔細胞DNA造成損傷，損傷程度與毒死蜱、TCP

5、的濃度、處理時間存在劑量-效應(yīng)和時間-效應(yīng)關(guān)系。通過比較相同條件下毒死蜱與TCP對蚯蚓體腔細胞DNA所造成影響，可知毒死蜱降解為TCP后毒性加大。 3、變性梯度凝膠電泳實驗(DGGE)：以山東農(nóng)業(yè)大學(xué)南校區(qū)試驗農(nóng)場土壤為材料，在室內(nèi)培養(yǎng)的基礎(chǔ)上，運用變性梯度凝膠電泳技術(shù)，研究了0.01、0.1、1.0、10.0mg·kg-1的毒死蜱和0.01、0.1、1.0、5.0mg·kg-1的TCP對土壤微生物多樣性的影響。實驗結(jié)果表明，毒