刺激強(qiáng)度和刺激頻率對(duì)骨骼肌收縮的影響

1、刺激強(qiáng)度和刺激頻率對(duì)骨骼肌收縮的影響,掌握：蛙類動(dòng)物坐骨神經(jīng)—腓腸肌標(biāo)本和神經(jīng)干標(biāo)本的制備方法，電刺激強(qiáng)度或電刺激頻率改變對(duì)骨骼肌收縮形式的影響及機(jī)制。熟悉：刺激強(qiáng)度與復(fù)合動(dòng)作電位幅值的關(guān)系。了解：測(cè)定神經(jīng)干動(dòng)作電位的傳導(dǎo)速度和不應(yīng)期的測(cè)定方法。,實(shí)驗(yàn)?zāi)康?刺激：細(xì)胞所處環(huán)境因素的變化。生理學(xué)中常用電刺激。,閾刺激：相當(dāng)于閾強(qiáng)度的刺激。閾強(qiáng)度是指能使組織發(fā)生興奮的最小刺激強(qiáng)度。最大刺激：具有引起肌肉最大收縮的最小刺激強(qiáng)度的刺激。,

2、實(shí)驗(yàn)原理,,1.靜息電位 靜息電位是指細(xì)胞未受刺激時(shí)，存在于細(xì)胞膜內(nèi)外兩側(cè)的電位差。靜息電位（Resting potiential, RP）。,,2.動(dòng)作電位 電刺激神經(jīng)，引起神經(jīng)纖維膜產(chǎn)生去極化，當(dāng)去極化達(dá)閾電位水平時(shí)，膜產(chǎn)生一次在神經(jīng)纖維上可傳導(dǎo)的快速電位變化-------動(dòng)作電位（action potiential, AP）。,中樞神經(jīng)系統(tǒng),,神經(jīng)沖動(dòng)（AP),,肌細(xì)胞興奮收縮,?,AP跨細(xì)胞傳導(dǎo),爆發(fā)肌細(xì)

3、胞膜AP,Ca2＋內(nèi)流,,囊泡移動(dòng)、融合、破裂，,,釋放ACh,神經(jīng)-肌接頭處的興奮傳遞過(guò)程,4、骨骼肌收縮的形式,（一）單收縮(single twitch)肌肉受到一次刺激，引起一次收縮和舒張的過(guò)程。,實(shí)驗(yàn)原理,刺激強(qiáng)度與肌肉收縮的關(guān)系,2.不完全強(qiáng)直收縮,肌肉受到連續(xù)刺激，前一次收縮和舒張尚未結(jié)束，新的收縮在此基礎(chǔ)上出現(xiàn)的過(guò)程。,（二）強(qiáng)直收縮(tetanus),1.完全強(qiáng)直收縮,刺激頻率與肌肉收縮的關(guān)系,實(shí)驗(yàn)原理,實(shí)驗(yàn)材料,,實(shí)

4、驗(yàn)動(dòng)物：牛蛙。實(shí)驗(yàn)器材：常用蛙類手術(shù)器械，張力換能器，BL-420生物機(jī)能實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)，電極，鐵支架，培養(yǎng)皿，滴管。藥品與試劑：任氏液。,1、制備在體坐骨神經(jīng)-腓腸肌標(biāo)本破壞腦和脊髓，一側(cè)下肢剝皮分離一側(cè)腓腸肌，結(jié)扎肌腱 分離同側(cè)大腿部坐骨神經(jīng),實(shí)驗(yàn)步驟,1）破壞腦和脊髓,左手握蟾蜍，食指按壓頭部前端，拇指按壓背部，使頭部前俯；右手持金屬探針由頭前端沿中線向尾方劃觸、觸及凹陷處即枕骨大孔的所在。探針由枕骨大孔處垂直刺入，再轉(zhuǎn)向

5、頭方，向前探入顱腔內(nèi)，然后向各方攪動(dòng)探針搗毀腦組織。退出探針，再由枕骨大孔刺入，轉(zhuǎn)向尾方，與脊髓平行刺入脊管破壞脊髓。腦和脊髓是否完全破壞，可檢查動(dòng)物四肢肌肉的緊張性是否完全消失。,破壞腦和脊髓,游離坐骨神經(jīng)—腓腸?。?大頭針將標(biāo)本繃直、固定，背面向上； 股二頭肌與半膜肌肌縫內(nèi)，用玻璃分針?lè)蛛x坐骨神經(jīng)，直到腘窩； 沿腓腸肌向下找到跟腱，并穿線結(jié)扎，結(jié)扎線遠(yuǎn)端剪斷跟腱，執(zhí)線提起腓腸肌，剪去下方相連筋膜，注意勿損傷腓腸

6、肌，保留腓腸肌起始點(diǎn)與骨的聯(lián)系。 結(jié)扎跟腱的絲線與張力換能器連接，坐骨神經(jīng)搭在刺激電極上，開始實(shí)驗(yàn)。,2、連接實(shí)驗(yàn)裝置,張力換能器一端與腓腸肌肌腱上的結(jié)扎線連接，另一端與BL－420/410系統(tǒng)相連。 坐骨神經(jīng)放在刺激導(dǎo)線的神經(jīng)鉤上。,①進(jìn)入BL-410/420系統(tǒng)→“實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目”→神經(jīng)肌肉實(shí)驗(yàn)→刺激強(qiáng)度與反應(yīng)的關(guān)系→系統(tǒng)自動(dòng)記錄。調(diào)節(jié)起始強(qiáng)度，確定閾刺激，分析刺激強(qiáng)度與骨骼肌收縮的關(guān)系。②進(jìn)入BL-410/420系統(tǒng)→“

7、實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目”→肌肉神經(jīng)實(shí)驗(yàn)→刺激頻率與反應(yīng)的關(guān)系→經(jīng)典實(shí)驗(yàn)→系統(tǒng)自動(dòng)記錄。觀察單收縮、不完全強(qiáng)直收縮和完全強(qiáng)直收縮。,3、軟件操作,標(biāo)本制備過(guò)程中切勿過(guò)度牽拉神經(jīng)干和肌肉實(shí)驗(yàn)中每次肌收縮后必須間隔一定時(shí)間0.5－1min再給刺激，以確保肌肉的收縮力和興奮性。經(jīng)常用任氏液濕潤(rùn)標(biāo)本，使之維持良好機(jī)能狀態(tài)。,注意事項(xiàng),頻率選擇由低開始逐漸增大，每種頻率的刺激持續(xù)時(shí)間不宜太長(zhǎng)，出現(xiàn)理想的收縮曲線即可。 若肌肉在未給刺激時(shí)即出現(xiàn)攣縮，可