診斷試劑性能指標(biāo)評(píng)估

1、體外診斷試劑分析性能評(píng)估指導(dǎo)原則,2013.04.25,目錄,1.檢測(cè)限2.線性范圍3.可報(bào)告范圍4.準(zhǔn)確度（回收實(shí)驗(yàn)）5.準(zhǔn)確度（方法學(xué)比對(duì)）6.精密度7.干擾實(shí)驗(yàn)8.穩(wěn)定性9.參考值（參考區(qū)間）,基本要求,實(shí)驗(yàn)人員儀器設(shè)備試劑,檢測(cè)限（limit of detection）,1、定義：檢測(cè)限是指檢測(cè)方法可檢測(cè)出的最低被測(cè)量濃度，，也稱檢測(cè)低限或最小檢出濃度，有時(shí)也稱分析靈敏度。2、檢測(cè)方法：一次運(yùn)行中將空白樣

2、本重復(fù)測(cè)定20次。3、空白樣本制備：空白樣本應(yīng)不含被測(cè)物，但其基質(zhì)應(yīng)與待測(cè)常規(guī)樣本相同。若空白樣本難以得到，可采用5%牛血清或人血清白蛋白溶液，或根據(jù)測(cè)定項(xiàng)目選用相應(yīng)基質(zhì)樣本，但應(yīng)將基質(zhì)效應(yīng)減至最小。4、數(shù)據(jù)處理記錄：記錄初始響應(yīng)值，如吸光度值等。 統(tǒng)計(jì)：計(jì)算20次結(jié)果的均值X與標(biāo)準(zhǔn)差SD。5、結(jié)果報(bào)告 以空白均值加兩倍標(biāo)準(zhǔn)差報(bào)告方法的檢測(cè)限。（即X+2SD）,線性范圍,線性：測(cè)量結(jié)果與樣品中被測(cè)量的值直接成比例的能力

3、。樣本要求樣本基質(zhì)應(yīng)與臨床實(shí)驗(yàn)樣本相似。樣本不得含有干擾物質(zhì)：溶血、脂血、黃疸等。實(shí)驗(yàn)過程建立線性范圍：在預(yù)期線性范圍內(nèi)選擇9-11個(gè)濃度水平，每個(gè)濃度水平重復(fù)測(cè)定3-4次。驗(yàn)證線性范圍：測(cè)定4-6個(gè)濃度水平，每個(gè)濃度水平重復(fù)測(cè)定3-4次。,線性范圍,數(shù)據(jù)處理記錄原始數(shù)據(jù)計(jì)算精密度，剔除離群值進(jìn)行線性回歸線性范圍應(yīng)符合一定要求,可報(bào)告范圍（reportable range）,可報(bào)告范圍包括可報(bào)告低限和可報(bào)告高限樣本

4、要求低值樣本：接近方法線性范圍低限濃度水平的樣本，一般為5個(gè)濃度水平，濃度水平間隔應(yīng)小于線性范圍低限的10%。高值樣本：含有被測(cè)物的高值樣本，必要時(shí)可加入被分析物純品，并計(jì)算出理論值。將該高值樣本稀釋使其接近于線性范圍的上1/3區(qū)域內(nèi)，并記錄稀釋倍數(shù)。至少選擇3個(gè)高濃度樣本。,可報(bào)告范圍（reportable range）,實(shí)驗(yàn)過程在一次運(yùn)行中將低值樣本重復(fù)測(cè)定10次，高值稀釋樣本重復(fù)測(cè)定3次。數(shù)據(jù)處理數(shù)據(jù)記錄數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)：分別

5、計(jì)算AVE、SD、CV值。對(duì)于可報(bào)告高限還應(yīng)計(jì)算乘以稀釋倍數(shù)后的還原濃度和相對(duì)偏差。,可報(bào)告范圍（低限）數(shù)據(jù)記錄表,,可報(bào)告范圍（高限）數(shù)據(jù)記錄表,可報(bào)告范圍（reportable range）,結(jié)果報(bào)告可報(bào)告范圍低限：以方法性能標(biāo)示的CV值為可接受界值，由數(shù)據(jù)中選取CV值等于或小于可接受界值的最低濃度水平作為可報(bào)告低限?？蓤?bào)告范圍高限：選取還原濃度與理論濃度的偏差（%）等于或小于方法標(biāo)示的界值時(shí)的最大稀釋倍數(shù)為方法推薦的最大稀釋倍

6、數(shù)，方法線性范圍的上限與最大稀釋倍數(shù)的乘積為該方法可報(bào)告范圍的高限。,準(zhǔn)確度（回收實(shí)驗(yàn)）,準(zhǔn)確度：一個(gè)測(cè)量值與可接受的參考值之間的一致程度。樣本制備1、選擇合適濃度的常規(guī)檢測(cè)樣本，分為體積相同的3-4份。2、在其中2-3份樣本中加入不同量的待測(cè)物標(biāo)準(zhǔn)，制成2-3個(gè)不同加入濃度的回收樣本，計(jì)算加入的待測(cè)物的濃度。3、在另一份樣本中加入同樣量的無(wú)被測(cè)物的溶劑，制成基礎(chǔ)樣本。注意事項(xiàng)1、加入體積：加入的標(biāo)準(zhǔn)液體積一般在樣本體積的1

7、0%以內(nèi)2、加入待測(cè)物的濃度：保證總濃度在方法分析測(cè)量范圍內(nèi)。3、標(biāo)準(zhǔn)物濃度：因?yàn)闃?biāo)準(zhǔn)物溶液加入體積不到10%，為保證得到不同濃度的回收樣本，標(biāo)準(zhǔn)物的濃度應(yīng)該足夠高。,準(zhǔn)確度（回收實(shí)驗(yàn)）accuracy（recovery）,實(shí)驗(yàn)過程：用待評(píng)價(jià)方法對(duì)回收樣本和基礎(chǔ)樣本進(jìn)行測(cè)定，通常對(duì)樣本進(jìn)行2-3次重復(fù)分析，取其均值進(jìn)行計(jì)算。數(shù)據(jù)處理及結(jié)果報(bào)告1、計(jì)算回收率：回收率=（回收樣本濃度-基礎(chǔ)樣本濃度）/加入濃度×100%

8、2、計(jì)算平均回收率：平均回收率=（回收率1+回收率2+回收率3）/3×100%3、計(jì)算比例系統(tǒng)誤差：比例系統(tǒng)誤差=100%-平均回收率4、可接受判斷：比例系統(tǒng)誤差應(yīng)不大于相關(guān)規(guī)定。,范例-某法測(cè)定血清葡萄糖回收率,1、樣本制備基礎(chǔ)樣本：血清1ml（濃度5.5mmol/L）+蒸餾水0.1ml回收樣本1：血清1ml+0.1ml葡糖糖水溶液（濃度22mmol/L）回收樣本2：血清1ml+0.1ml葡糖糖水溶液（濃:55mm

9、ol/L）2、數(shù)據(jù)結(jié)果3、計(jì)算平均回收率：平均回收率=（103+99）/2×100%=101%4、計(jì)算比例系統(tǒng)誤差：比例系統(tǒng)誤差=/100%-101%/=1%,精密度,批內(nèi)精密度：嚴(yán)格的相似條件下，所得到的最佳精密度。批間精密度：指在同一實(shí)驗(yàn)室，由同一（組）操作員在同一儀器上，使用同一方法和同種、同一批號(hào)試劑，在一段時(shí)間內(nèi)（一般為一個(gè)月或20個(gè)工作日）對(duì)同一測(cè)試樣品（常用質(zhì)控品）測(cè)量結(jié)果的精密度。,精密度,樣

10、本要求1、至少評(píng)估兩個(gè)濃度水平的樣本，若兩個(gè)濃度樣本的精密度由顯著差異，則建議增加第三個(gè)濃度水平樣本；2、樣本濃度在測(cè)量范圍內(nèi)，至少有一個(gè)濃度在醫(yī)學(xué)決定水平左右；3、不要為了得到較小的精密度，而選擇高值樣本，也不要選擇靠近檢出限的樣本；4、如果不存在醫(yī)學(xué)決定水平，可在參考區(qū)間上限左右選一個(gè)濃度。,精密度,只評(píng)估批內(nèi)精密度 1、試劑和標(biāo)準(zhǔn)品：應(yīng)使用同一種類、同一批號(hào)的試劑和校準(zhǔn)物。2、方法：在一次檢測(cè)中，對(duì)同一樣本至少進(jìn)行20

11、次重復(fù)測(cè)定。3、數(shù)據(jù)處理：記錄所有數(shù)據(jù)，計(jì)算平均值、標(biāo)準(zhǔn)差及變異系數(shù)。4、離群值：結(jié)果與總均值的差值超過4個(gè)標(biāo)準(zhǔn)差時(shí)，可認(rèn)為該結(jié)果為離群值。一次評(píng)估只能有一個(gè)離群值，當(dāng)離群值超過一個(gè)時(shí)，應(yīng)懷疑該方法的穩(wěn)定性及操作者的熟練程度。,精密度,同時(shí)評(píng)價(jià)批內(nèi)和批間精密度依據(jù)樣品的情況選擇實(shí)驗(yàn)方法1、每天做2個(gè)批次的測(cè)試，每批對(duì)同一樣品作雙份測(cè)量，工作20天，共80 個(gè)測(cè)試結(jié)果。2、每天做1個(gè)批次的測(cè)試，每批對(duì)同一樣品作4次測(cè)量，工作20