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1、山西醫(yī)科大學(xué)博士學(xué)位論文載脂蛋白E4神經(jīng)毒作用機(jī)制的研究:K通道抑制和Ca超載姓名:秦穎申請學(xué)位級別:博士專業(yè):神經(jīng)生物學(xué)指導(dǎo)教師:喬健天;祁金順20040614山西醫(yī)科走羋博士學(xué)位論文憶等。如果K + 通道確系a p o E 4 的靶點之一,其通道性質(zhì)和動力學(xué)特征發(fā)生了哪些變化? 保護(hù)K + 通道是否可以減輕a p o E 4 引起的C a ”超載和其它毒性作用?本研究利用膜片鉗技術(shù),在單通道和全細(xì)胞水平觀察了急性給與a p o E
2、4 對大鼠海馬C A 1 區(qū)神經(jīng)元K + 離子電流的影響;并結(jié)合鈣離子熒光成像手段觀察了a p o E 4 X } [ C a 2 + ] i 的影響,探討了a p o E 4 引起C a 2 + 超載的膜途徑以及K + 通道和( C a 2 + 】.之間可能的聯(lián)系。第一部分:載脂蛋白E 4 對海馬神經(jīng)元延遲整流r 通道單通道特性的影響在多種不同的電壓門控K + 通道中,由于延遲整流K + 通道( d e l a y e d .r e
3、c t i f i e rp o t a s s i u m c h a n n e l s ,I k c h a n n e l s ) 具有去極化激活和外向整流的特性,對動作電位的復(fù)極化以及終止動作電位期間C a ”的內(nèi)流起到促進(jìn)作用;在技術(shù)上,I k 的研究不需要對其它的電流成分進(jìn)行藥理學(xué)阻斷:并且,在內(nèi)面向外式( i n s i d e —o u t ) 膜片上更容易表現(xiàn)a p o E 4 的細(xì)胞內(nèi)直接作用。因此,我們首先選擇內(nèi)
4、面向外式膜片上的I t 單通道作為研究對象。實驗結(jié)果表明:1 ) 實驗中記錄到的電導(dǎo)為3 5p S 通道的活動由去極化所激活,其活動隨胞膜去極化的程度增加而增強(qiáng),該通道的活動不受胞外C a 2 + 濃度的影響,但能夠被2 0 m m o t /LT E A 可逆性的阻斷,結(jié)合以往的研究,該電導(dǎo)為3 5p S 通道屬于I k 通道;2 ) 膜片胞漿側(cè)給予0 5 p .m o l /La p o E 4 可以顯著地抑制T 。電流:其開放概牢
5、、開放頻率及開放時間的抑制幅度分別為9 7 5 84 - 7 .9 3 %、9 86 64 - 3 .0 l %及5 l 5 54 - 4 .5 0 %,而關(guān)閉時間則延長了1 38 94 - 2 .6 8 倍( n = 1 0 ,P < 0 .0 1 ) ,a p o E 4 對I k 單通道電流的抑制作用是可逆的;3 ) 作為x , /J 豫,在同樣的實驗條件和同樣的摩爾濃度下,載脂蛋白a p o A ( 存在于腦脊液和老年斑中
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