環(huán)境敏感高分子與稀土螯合劑的合成及在熒光分析中的應(yīng)用研究.pdf

1、廈門大學(xué)博士學(xué)位論文環(huán)境敏感高分子與稀土螯合劑的合成及在熒光分析中的應(yīng)用研究姓名：林鵬申請學(xué)位級別：博士專業(yè)：分析化學(xué)指導(dǎo)教師：許金鉤2002.11.1定物質(zhì)的免疫活性也得到了改善，且其相轉(zhuǎn)變pH更為狹窄。更重要的是：采用這種熱引發(fā)方式聚合使得一些必須在有機(jī)相或高溫條件下合成的環(huán)境敏感高分子也可適用于活性物質(zhì)的固定。通過人IgG的測定，將兩種固定方式做了對比，指出了兩種方法的優(yōu)缺點。將少量疏水性單體甲基丙烯酸丁酯(BMA)與NIP和MA

2、A在有機(jī)相中和活性酯一起共聚，發(fā)現(xiàn)新合成的pH敏感高分子臨界溶解pH(LCSP)提高到了60，更適合于免疫分析，利用競爭法進(jìn)行了兔血清中兔IgG的測定。第四章將NIP與N，N二甲基氨丙基甲基丙烯酰胺(DMAPM)共聚，合成出37。C下相轉(zhuǎn)變pH值在74左右的pH敏感高分子P(NIP—DMAPM)，當(dāng)溶液pH在74以上時，高分子很快從溶液中沉淀出來，離心即可將沉淀與溶液分離。在74以下時，高分子又重新溶解，呈透明溶液。將其作為免疫分析的載

3、體，建立了兔IgG和人IgG的pH敏感相分離熒光免疫分析法，由于其LCSP在中性，分離時對抗原一抗體復(fù)合物造成的損壞大為降低，反應(yīng)溫度的提高使得反應(yīng)平衡時間也大為減少，并探討了標(biāo)記抗體在P(NIP—DMAPM)上的非特異吸附及其消除。第五章合成了一種新型的熒光螯合劑2，9一雙[N，N一雙(羧甲基)氨甲基卜I，10一(菲咯啉)(BBCAP)，研究了其與稀土離子所形成的熒光螯合物探針的性能，該螯合劑有著良好的水溶性，本身即可與銪、鋱等稀土金

4、屬離子形成強(qiáng)熒光的螯合物，不需要加入增強(qiáng)液。且與稀土離子所形成的螯合物熒光強(qiáng)度非常穩(wěn)定，Tb—BBCAP螯合物標(biāo)記的抗體稀釋至5X10“omol／L仍可加以測定，檢測靈敏度大于一般的稀土類螯合物標(biāo)記抗體。此外，該探針發(fā)射波長在547nm，可有效避開生物背景樣品的干擾(生物樣品發(fā)射波長一般在320—470hm)，更重要的是由于其熒光壽命較長，可望用在時間分辨熒光免疫分析中，使靈敏度得到進(jìn)一步提高。我們將BBCAP上的羧基通過碳化二亞胺與羊