雙歧桿菌乳桿菌三聯(lián)活菌片通過(guò)提高腸道防御功能預(yù)防大腸桿菌K1株感染.pdf

1、目的：
　　大腸桿菌引起的菌血癥和腦膜炎是導(dǎo)致新生兒死亡的嚴(yán)重感染性疾病。抗生素是目前預(yù)防及治療細(xì)菌性感染最主要的方法，但是隨著廣譜抗生素的不合理使用，耐藥性大腸桿菌發(fā)生率不斷增多。尋找一種有效的預(yù)防方法顯得越來(lái)越重要。益生菌作為一種對(duì)人體有益的細(xì)菌，其研究越來(lái)越受到人們的關(guān)注。將益生菌應(yīng)用于早期新生兒菌血癥及細(xì)菌性腦膜炎的預(yù)防，可有效克服上述缺點(diǎn)。前期實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)雙歧桿菌乳桿菌三聯(lián)活菌片（三聯(lián)活菌片）能夠有效預(yù)防新生乳鼠菌血癥及細(xì)

2、菌性腦膜炎，但是對(duì)于其具體機(jī)制卻不清楚。本實(shí)驗(yàn)將分別從體內(nèi)和體外證明E44是否對(duì)腸道屏障具有破壞作用及三聯(lián)活菌片是否能夠通過(guò)增強(qiáng)腸屏障功能抑制E44引起的菌血癥及腦膜炎。
　　方法：
　　本實(shí)驗(yàn)用HT-29細(xì)胞構(gòu)建體外腸屏障模型，新生SD大鼠乳鼠模擬體內(nèi)腸屏障模型，將其分成四個(gè)不同的處理組:PBS組、三聯(lián)活菌片組、三聯(lián)活菌片加E44組、E44組。
　　結(jié)果：
　　1、體外競(jìng)爭(zhēng)抑制實(shí)驗(yàn)證明三聯(lián)活菌片對(duì)E44黏附侵襲

3、HT-29細(xì)胞的影響。實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)三聯(lián)活菌片能夠抑制E44對(duì)HT-29細(xì)胞的黏附侵襲作用，且具有濃度依賴性;另一方面也發(fā)現(xiàn)三聯(lián)活菌片提前作用效果較三聯(lián)活菌片與E44共同作用效果更好。
　　2、細(xì)胞毒性及細(xì)胞凋亡檢測(cè)結(jié)果表明E44可以損傷細(xì)胞，增加細(xì)胞毒性及凋亡率，三聯(lián)活菌片可以降低E44引起的細(xì)胞損傷。
　　3、運(yùn)用PAS染色法對(duì)HT-29細(xì)胞及乳鼠腸道染色發(fā)現(xiàn)，E44能夠降解粘蛋白(Mucin)，三聯(lián)活菌片可以抑制E44對(duì)M

4、ucin的降解;同時(shí)三聯(lián)活菌片還可以促進(jìn)乳鼠體內(nèi)Mucin的表達(dá)。
　　4、腸道屏障完整性檢測(cè)表明E44可以破壞細(xì)胞間緊密連接，從而增加腸屏障滲透性;加入三聯(lián)活菌片處理可以有效的抑制E44對(duì)緊密連接蛋白破壞，從而降低腸屏障滲透性。
　　5、體內(nèi)實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)E44處理組中腸道分泌的IgA及ki67陽(yáng)性細(xì)胞明顯降低，加入三聯(lián)活菌片可以改善上述情況;同時(shí)還發(fā)現(xiàn)三聯(lián)活菌片可以促進(jìn)腸道IgA的表達(dá)及ki67陽(yáng)性細(xì)胞增加。
　　結(jié)論：