狼毒組織培養(yǎng)及其黃酮類成分研究.pdf

1、狼毒（Stellera chamaejasme），又名斷腸草（內(nèi)蒙古），拔蘿卜、燕子花（河北），饅頭花（青海），是瑞香科(Thymel aeaceae)狼毒屬（Stellera）多年生草本植物，是我國傳統(tǒng)中藥狼毒的正品，也是重要的蒙藥和藏藥，有清熱解毒、消腫、瀉火、止?jié)?、祛腐生肌之功效?br>　　本研究以瑞香科狼毒屬狼毒的葉片為外植體，探討了不同濃度的2，4-D對愈傷組織誘導率的影響，得到了誘導愈傷組織的最佳2，4-D濃度;進行了不

2、同接種量的細胞生長動態(tài)研究，確定了增殖培養(yǎng)適宜的接種量，并著重探討了生長素類和細胞分裂素類對愈傷組織增殖培養(yǎng)的效應，獲得了愈傷組織增殖的最佳培養(yǎng)基配方;用比色法測定了愈傷組織中總黃酮的含量，研究生長素和細胞分裂素類對愈傷組織總黃酮累積的影響;采用DPPH自由基清除法探究了愈傷組織總黃酮提取物的抗氧化活性。本研究為狼毒的開發(fā)利用奠定了基礎。主要結(jié)論歸納如下：
　　1.以狼毒的葉片為外植體，誘導愈傷組織的最佳2，4-D濃度為1.0mg

3、/L，誘導率可達98.33％，愈傷組織呈淡黃色，致密。
　　2.愈傷組織生長量的動態(tài)研究表明：鮮重和干重的生長曲線均呈“S”型，明顯地分為：延遲生長期、指數(shù)生長期和衰減期。
　　3.單獨使用2，4-D和KT對狼毒愈傷組織的增殖效應不明顯并嚴重褐化;單獨使用NAA增殖效應明顯但褐化較明顯;單獨使用6-BA增殖效應很好但輕微褐化;單獨使用TDZ增殖效應最好。生長素與細胞分裂素組合對愈傷組織的增殖效應比單一的植物生長調(diào)節(jié)劑好。MS

4、+NAA0.5mg/L+TDZ1.0mg/L是最佳增殖培養(yǎng)基，鮮重為14.49g/瓶，是初始接種量的28.98倍，干重為0.61g/瓶，為初始接種量的25.41倍。
　　4.單獨使用NAA和6-BA可促進愈傷組織中總黃酮的累積，而培養(yǎng)基中附加不同濃度的TDZ時總黃酮的累積均低于NAA和6-BA?？傸S酮累積的最佳培養(yǎng)基配方為MS+NAA1.0mg/L+6-BA0.25mg/L，總黃酮含量達10.779mg/g，明顯高于野生狼毒根(總