川木通及常用習(xí)用品的生藥學(xué)研究.pdf

1、目的:川木通系毛茛科植物小木通Clematis armandii Franch.或繡球藤Clematismontana Buch.-Ham.的干燥藤莖。具有利尿通淋，清心除煩，通經(jīng)下乳的作用。目前市場混用嚴(yán)重，飲片鑒別困難，用藥安全性及藥效難以保障，本研究擬從生藥性狀、顯微、薄層定性、DNA條形碼和HPLC特征圖譜基因化學(xué)雙指紋研究，形成綜合研究體系。對市場占有率較高的川木通混品粗齒鐵線蓮和小蓑衣藤進(jìn)行初步的化學(xué)成分及藥效研究，為川木通

2、鑒定及替代品使用提供依據(jù)。
　　方法:本次研究采用石蠟包埋技術(shù)和番紅固綠染色法對小木通、繡球藤、粗齒鐵線蓮和小蓑衣藤的莖進(jìn)行了顯微鑒定，對四種藥材進(jìn)行了粉末對比研究;以對照藥材為對照建立了川木通TLC鑒別方法。進(jìn)行了川木通藥材的水分、總灰分以及浸出物等檢查項(xiàng)測定;提取生藥和飲片總DNA，對DNA的ITS2序列進(jìn)行擴(kuò)增測序，對DNA序列進(jìn)行比較分析;采用HPLC法建立了川木通的HPLC特征圖譜，利用“中藥色譜指紋圖譜相似度評價系統(tǒng)”

3、對收集到的樣品與小木通和繡球藤進(jìn)行了相似度比對;最后為藥典法定品種與市場習(xí)用品種之間藥效區(qū)別，初步進(jìn)行了藥典品種小木通、繡球藤和非藥典品種粗齒鐵線蓮和小蓑衣藤的利尿效果比較研究
　　結(jié)果:從顯微結(jié)果看，初生射線:小木通17條，其它均為12條;繡球藤的韌皮部的厚壁細(xì)胞環(huán)帶不連續(xù)成環(huán)，在髓射線處間斷;粗齒鐵線蓮呈現(xiàn)不明顯六凹槽，導(dǎo)管孔粗大;小蓑衣藤橫截面花瓣?duì)?粉末結(jié)果顯示，小木通、繡球藤、粗齒鐵線蓮以及小蓑衣藤在韌皮射線細(xì)胞、石細(xì)胞

4、和導(dǎo)管的形態(tài)及大小上有著不同程度的差別?；贗TS2的DNA條形碼結(jié)果顯示，川木通飲片主要以粗齒鐵線蓮為主，小木通使用較少，未發(fā)現(xiàn)繡球藤;通過NJ樹看出繡球藤、粗齒鐵線蓮和小蓑衣藤三者親緣關(guān)系相近。通過HPLC特征圖譜比對，粗齒鐵線蓮、小蓑衣藤和繡球藤在化學(xué)成分上相似度非常高;通過利尿效果研究發(fā)現(xiàn)粗齒鐵線蓮與川木通一樣均有明顯的利尿效果。
　　結(jié)論:
　　1、建立了一個川木通較為系統(tǒng)鑒定的方法，能準(zhǔn)確有效地將川木通與鐵線蓮屬