let-7、miR-21在食管鱗癌組織中的表達(dá)及臨床意義.pdf

1、食管癌是指從下咽到食管胃結(jié)合部之間食管上皮來源的癌，食管癌病理類型主要有兩大類:腺癌和鱗癌，其中95％以上是食管鱗狀細(xì)胞癌。食管鱗狀細(xì)胞癌(esophagealsquamous cancer，ESCC)是一種具有鱗狀細(xì)胞分化的惡性上皮性腫瘤。由于大多數(shù)患者就診時(shí)已屬中、晚期，不能手術(shù)，且化療、放療并未能明顯延長患者的生存期，因此從分子水平上探討食管癌的發(fā)生、發(fā)展機(jī)制對(duì)防止該病具有重要的現(xiàn)實(shí)意義及理論價(jià)值。微小RNA(microRNA，m

2、iRNA)的組成是一類在生物體內(nèi)源長度約為18～25nt的單鏈非編碼型小RNA。目前在人類體內(nèi)已有近1000種的miRNA被發(fā)現(xiàn)，越來越多的證據(jù)表明miRNA是通過對(duì)靶基因信使RNA（mRNA）的抑制作用參與生物調(diào)控，調(diào)節(jié)細(xì)胞增殖、細(xì)胞分化以及細(xì)胞凋亡等過程，和胚胎生長、個(gè)體發(fā)育、機(jī)體代謝及多種疾病的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)。據(jù)統(tǒng)計(jì)，人體中30％以上的基因都受到miRNA的調(diào)控。一個(gè)miRNA能夠潛在地靶向多個(gè)mRNA分子，而miRNA也可同時(shí)

3、對(duì)同一基因進(jìn)行調(diào)控。同時(shí)miRNA的失調(diào)也常見于多種疾病包括各種腫瘤，它通過轉(zhuǎn)錄后調(diào)控改變正常的基因表達(dá)，在疾病的發(fā)生發(fā)展中發(fā)揮重要的作用。microRNA let-7(let-7)是新近發(fā)現(xiàn)的一種具有抑癌作用的微小RNA，在人類喉癌、胃癌、肺癌、肝癌、膠質(zhì)瘤等多種腫瘤組織中發(fā)揮抑制腫瘤的作用。microRNA-21(miR-21)是在多種起源的癌細(xì)胞中顯著高表達(dá)的miRNA，與腫瘤的浸潤以及癌變有關(guān)，部分通過阻止細(xì)胞凋亡發(fā)揮癌基因的功

4、能，作為一種新型腫瘤生物學(xué)標(biāo)志，在腫瘤的診斷、治療及預(yù)后評(píng)價(jià)等方面發(fā)揮重要作用。
　　目的：本實(shí)驗(yàn)擬對(duì)食管鱗狀細(xì)胞癌(ESCC)患者組織中l(wèi)et-7、miR-21的表達(dá)水平進(jìn)行檢測，研究let-7、miR-21在ESCC癌組和相對(duì)應(yīng)的正常食管粘膜組中的表達(dá)情況，探討二者與臨床病理特征之間的關(guān)系，以及兩者之間的相關(guān)性，分析其在ESCC中的作用機(jī)制，為ESCC的早期診斷和治療提供理論依據(jù)。
　　方法：收集2015年6月至2016

5、年11月由山東省腫瘤醫(yī)院及山東省醫(yī)學(xué)科學(xué)院附屬院手術(shù)切除的48例食管癌患者的新鮮腫瘤組織及和相對(duì)應(yīng)的正常食管粘膜組織（距腫瘤邊緣5cm以上)。所有食管癌患者術(shù)前均未接受化療、放療，且病例均經(jīng)過病理學(xué)專家證實(shí)。統(tǒng)計(jì)患者的基本信息及臨床病理資料。采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR(quantitative real-timePCR，qRT-PCR)方法檢測癌組織和相對(duì)應(yīng)的正常食管粘膜組織中l(wèi)et-7、miR-21的表達(dá)水平。
　　采用統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件S

6、PSS17.0對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，探討let-7和miR-21的相對(duì)表達(dá)量在ESCC癌組標(biāo)本中的差異性及兩者在食管癌中的內(nèi)在聯(lián)系。
　　結(jié)果：
　　1.和正常食管粘膜組織[1.03(0.81-1.72)]相比，let-7在ESCC癌組織中的相對(duì)表達(dá)量[0.43(0.23-0.73)]表達(dá)下降，P＜0.05;和正常食管粘膜組織[3.32(1.71-6.15)]相比，miR-21在ESCC癌組織中相對(duì)表達(dá)量[6.12(3.98-

7、7.39)]表達(dá)升高，P＜0.05。
　　2.在ESCC患者癌組織中，let-7的低表達(dá)與臨床TNM分期有關(guān)，Ⅲ/Ⅳ期的相對(duì)表達(dá)量[0.38(0.19-0.49)]顯著低于Ⅰ/Ⅱ期的相對(duì)表達(dá)量[0.65(0.34-0.97)]，P＜0.05;而在性別、年齡、腫瘤大小、部位、分化程度及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的分組中無明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，P＞0.05。
　　在ESCC患者癌組織中miR-21的高表達(dá)與臨床TNM分期、分化程度及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移均有關(guān)。

8、Ⅲ/Ⅳ期的相對(duì)表達(dá)量[7.22(5.90-9.81)]顯著高于Ⅰ/Ⅱ期[4.33(2.42-6.53)]，P＜0.05;不同分化程度組的相對(duì)表達(dá)量有明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，P＜0.05。其中為高分化組[2.64(1.47-4.38)]、中分化組[5.38(4.08-8.56)]、低分化組[8.50(6.56-10.07)]。采用Mann-WhitneyU檢驗(yàn)在三組中兩兩進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析對(duì)比，結(jié)果顯示低分化組與中、高分化兩組均有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，P＜0.

9、05;中分化組與高分化組間無明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，P＞0.05。
　　3.ESCC癌組織中l(wèi)et-7與miR-21的相關(guān)性無明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，相關(guān)系數(shù)為0.96，P＞0.05。
　　結(jié)論：
　　1.ESCC癌組織中l(wèi)et-7的表達(dá)量明顯低于正常食管粘膜組織，miR-21的表達(dá)量明顯低于于正常食管粘膜組織。
　　2.ESCC癌組織中l(wèi)et-7的表達(dá)量與臨床TNM分期有一定相關(guān)性，與年齡、性別、腫瘤大小、腫瘤部位、分化程度以