新型角膜上皮細胞載體促進角膜堿燒傷修復(fù)的作用研究.pdf

1、目的：評價羧甲基殼聚糖（Carboxymethyl chitosan，CMCTS）共混膜片的理學(xué)及生物學(xué)性能，并研究其在角膜堿燒傷修復(fù)中的作用。
　　方法：將CMCTS與明膠（Gelatin，Gel）和透明質(zhì)酸（Hyaluronic acid，HA）按照20∶1∶2的比例制備CMCTS共混膜片，使用全波長酶標儀于400～800 nm波長下檢測該膜片的透光性；將膜片植入大鼠皮下及肌肉組織，組織切片HE染色評價其組織相容性和炎癥反應(yīng)；

2、通過大鼠肝臟和腎臟的體重質(zhì)量比評估膜片在體內(nèi)的降解毒性。將兔原代角膜上皮細胞接種于CMCTS共混膜片上構(gòu)建角膜上皮細胞移植體，CFSE染色和掃描電鏡觀察細胞在膜片上的活性和生長狀態(tài)；將該細胞移植體用于新西蘭大白兔角膜堿燒傷眼表的治療，通過外眼相觀察、裂隙燈觀察和組織免疫熒光染色與空白對照組、模型組及沒有細胞移植的膜片組相比較，評價其修復(fù)效果。
　　結(jié)果：本研究制備的CMCTS共混膜片在400～800 nm波長下透光率均高于80%；

3、大鼠肌肉及皮下植入膜片2 w后，組織切片HE染色可見周圍組織炎癥反應(yīng)基本消失；膜片在皮下及肌肉組織中能夠穩(wěn)定降解，在皮下組織中降解時間超過8 w，而在肌肉組織中4 w完成降解；膜片在降解過程中對肝、腎均無明顯毒性；CFSE染色和掃描電鏡觀察兔原代角膜上皮細胞能夠在膜片上貼附生長并連接成片；將其移植到角膜堿燒傷的兔眼表，發(fā)現(xiàn)其在術(shù)后30 d內(nèi)基本完成創(chuàng)面修復(fù)，而單純膜片組的修復(fù)能力較弱，模型組僅靠角膜自身修復(fù)作用不能進行角膜堿燒傷的完全修