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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:
腹腔注射MPTP誘導(dǎo)C57BL/6小鼠帕金森病模型,初步探討丹皮酚(paeonol, Pae)對(duì)MPTP誘導(dǎo)的帕金森病小鼠的神經(jīng)保護(hù)作用及其可能的保護(hù)機(jī)制。
方法:
將40只C57BL/6小鼠隨機(jī)均分為空白對(duì)照組(Control),模型組(MPTP),治療組(MPTP+Pae)和藥物對(duì)照組(Pae)。模型組和治療組小鼠予以MPTP(25 mg/kg,溶于生理鹽水)聯(lián)合丙磺舒(250 mg/kg,溶于
2、磷酸鹽緩沖液)腹腔注射建立PD小鼠模型,每日1次,連續(xù)5日,空白對(duì)照組和藥物對(duì)照組予以等體積的生理鹽水和磷酸鹽緩沖液腹腔注射;治療組在造模的第一天予以丹皮酚(20 mg/kg,溶于0.5%羧甲基纖維素鈉溶液)灌胃治療,每天1次,連續(xù)21天,空白對(duì)照組予以等體積的0.5%羧甲基纖維素鈉溶液灌胃,藥物對(duì)照組予以丹皮酚(20 mg/kg)進(jìn)行灌胃(具體同治療組)。在實(shí)驗(yàn)的第4日和第20日進(jìn)行轉(zhuǎn)棒實(shí)驗(yàn)檢測(cè),第5日和第21日進(jìn)行曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)的行為學(xué)檢
3、測(cè)。第22日麻醉小鼠,進(jìn)行心臟灌流內(nèi)固定,完整取出小鼠腦組織。免疫組化法檢測(cè)中腦黑質(zhì)部位TH,IBA-1, IL-1β和腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子的表達(dá),并對(duì)陽(yáng)性細(xì)胞分別進(jìn)行量化。比色法檢測(cè)中腦 SOD, CAT和Glu的活性水平。
結(jié)果:
1.丹皮酚可緩解帕金森病小鼠的行為學(xué)障礙:與對(duì)照組相比,模型組小鼠在第4日和20日的轉(zhuǎn)棒運(yùn)動(dòng)時(shí)間明顯下降,與模型組相比,治療組在轉(zhuǎn)棒的運(yùn)動(dòng)時(shí)間第20日才出現(xiàn)明顯的增加(P<0.01);與
4、對(duì)照組相比,模型組小鼠的曠場(chǎng)自主活動(dòng)能力在第5日和21日均明顯下降,與模型組相比,治療組小鼠的曠場(chǎng)自主活動(dòng)能力第21日才出現(xiàn)明顯的改善(P<0.01);與對(duì)照組相比,Pae藥物對(duì)照組小鼠的運(yùn)動(dòng)能力未發(fā)現(xiàn)明顯的區(qū)別(P>0.05)。
2.丹皮酚可緩解帕金森病小鼠黑質(zhì)多巴胺能神經(jīng)元的損傷:與對(duì)照組相比,模型組中腦黑質(zhì)多巴胺能神經(jīng)元的表達(dá)下降,陽(yáng)性細(xì)胞計(jì)數(shù)也出現(xiàn)了明顯的下降(P<0.01);相對(duì)于模型組而言,治療組黑質(zhì)多巴胺能神經(jīng)元
5、的表達(dá)增強(qiáng),陽(yáng)性細(xì)胞計(jì)數(shù)也出現(xiàn)了明顯的增加(P<0.01);與空白對(duì)照組相比,Pae藥物對(duì)照組黑質(zhì)TH的表達(dá)未發(fā)現(xiàn)明顯不同(P>0.05)。
3.丹皮酚可緩解帕金森病小鼠中腦的氧化應(yīng)激損傷:與對(duì)照組相比,模型組小鼠中腦的氧化應(yīng)激指標(biāo)的活性水平均出現(xiàn)了明顯下降(P<0.01);與模型組相比,治療組小鼠氧化應(yīng)激的活性水平均出現(xiàn)了明顯的升高(P<0.01);與對(duì)照組相比, Pae藥物對(duì)照組小鼠中腦氧化應(yīng)激的活性水平未發(fā)現(xiàn)明顯的不同(
6、P>0.05)。
4.丹皮酚可緩解帕金森病小鼠黑質(zhì)的神經(jīng)炎癥反應(yīng):與對(duì)照組相比,模型組小鼠黑質(zhì)IBA-1和IL-1β的表達(dá)增強(qiáng),陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)明顯增強(qiáng)(P<0.01);與模型組相比,治療組小鼠黑質(zhì) IBA-1和 IL-1β的表達(dá)下降,陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)也出現(xiàn)了的明顯下降(P<0.01);Pae藥物對(duì)照組與空白對(duì)照組小鼠中腦黑質(zhì)炎癥因子的表達(dá)未發(fā)現(xiàn)明顯的區(qū)別(P>0.05)。
5.丹皮酚可緩解帕金森病小鼠模型腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子的丟
7、失:與對(duì)照組相比,模型組小鼠黑質(zhì)BDNF的表達(dá)下降,陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)也明顯下降(P<0.01);與模型組相比,治療組小鼠黑質(zhì) BDNF的表達(dá)增強(qiáng),陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)也明顯的增加(P<0.01);Pae藥物對(duì)照組與空白對(duì)照組小鼠黑質(zhì) BDNF的表達(dá)未發(fā)現(xiàn)明顯的區(qū)別(P>0.05)。
結(jié)論:
1. MPTP腹腔注射可成功誘導(dǎo)出PD小鼠模型,氧化應(yīng)激和炎癥反應(yīng)均參與 PD的發(fā)病。
2.丹皮酚對(duì)帕金森病小鼠模型具有多巴胺能神經(jīng)元
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