溶血磷脂酸及其受體在鼠肺纖維化模型中的表達(dá)及意義.pdf

1、目的：本研究旨在鼠肺纖維化模型中，檢測(cè)肺纖維化不同時(shí)期溶血磷脂酸及其三種受體亞型LPA1、LPA2及LPA3的表達(dá)情況，分析溶血磷脂酸及其受體與肺纖維化的關(guān)系，進(jìn)而探討肺纖維化的發(fā)病機(jī)制。
　　方法：選取8周齡昆明小鼠80只，（北京維通利華實(shí)驗(yàn)動(dòng)物技術(shù)有限公司）40-60g之間，雄性，按照隨機(jī)數(shù)字表法分為生理鹽水對(duì)照組和博來霉素組（實(shí)驗(yàn)組），每組各40只。稱重后，實(shí)驗(yàn)組給予博來霉素（3.5mg/kg）一次性經(jīng)氣管注入，于實(shí)驗(yàn)0d氣

2、管內(nèi)一次性注入生理鹽水2ml/kg。造模完成后常規(guī)飼養(yǎng)。以上2組小鼠分別在14天、21天、28天時(shí)各處死10只，取血、提取肺組織，常規(guī)福爾馬林固定，包埋，切片，行蘇木精-依紅（HE）染色、Masson膠原染色法評(píng)價(jià)肺泡炎及肺纖維化情況。采用酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）檢測(cè)血清中LPA在14、21、28天時(shí)在對(duì)照組及實(shí)驗(yàn)組的表達(dá)情況；用免疫組化法檢測(cè)14、21、28天時(shí)小鼠肺組織中溶血磷脂酸三種受體亞型(LPA1、LPA2、LPA3)在對(duì)

3、照組及實(shí)驗(yàn)組的表達(dá)情況。
　　結(jié)果：（1）小鼠一般情況：博來霉素組小鼠在造模后逐漸出現(xiàn)精神萎靡，進(jìn)食少，消瘦，毛色灰暗，唇及爪紫紺。對(duì)照組整體狀態(tài)均較博來霉素組好，未發(fā)生顯著變化；肺臟外觀：對(duì)照組動(dòng)物雙肺淡粉色，肺葉清晰，表面光滑，濕潤，彈性好。博來霉素組雙肺逐漸出現(xiàn)顏色暗紅甚至蒼白，彈性逐漸變差，體積由大變小，質(zhì)變硬，部分出現(xiàn)少數(shù)出血點(diǎn)；（2）與對(duì)照組相比，實(shí)驗(yàn)組在14天、21天及28天均呈明顯肺泡炎性病理改變，且具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義

4、（P＜0.01），于第14天肺泡炎最為明顯，第21、28天肺泡炎改變逐漸減弱；與對(duì)照組相比，實(shí)驗(yàn)組第14天、21天和28天均可見肺纖維化病理改變，并隨時(shí)間延長逐漸加重，且具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＜0.01）；（3）NS組小鼠血清中LPA有少量表達(dá)，BLM組小鼠血清中LPA呈高表達(dá)，各觀察時(shí)間點(diǎn)血清的LPA表達(dá)水平較正常對(duì)照組明顯增加，有顯著性差異（P＜0.01）（4）相較對(duì)照組，實(shí)驗(yàn)組肺組織中LPA三個(gè)受體亞型LPA1、LPA2、LPA3在氣

5、道上皮細(xì)胞膜呈高表達(dá)，并隨時(shí)間延長而加重，在28天時(shí)最高，并有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p<0.05）。實(shí)驗(yàn)組組內(nèi)對(duì)比，每一周三種LPA受體亞型均較上一周期表達(dá)增多，并具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（p<0.05）。（5）小鼠生存情況：對(duì)照組小鼠分別于實(shí)驗(yàn)第2、7、10天各死亡1只；BLM組小鼠分別于實(shí)驗(yàn)第1、5、12、17、25天各死亡1、2、2、3、1只。
　　結(jié)論：(1)肺纖維化小鼠模型其肺部病理改變?cè)缙谝苑闻菅装Y改變?yōu)橹?晚期則以肺間質(zhì)纖維化為主；（2