低劑量X射線輻照(LDI)對周圍神經(jīng)橫斷損傷后神經(jīng)再生的影響及其機制研究.pdf

1、目的：探討低劑量X射線輻照（LDI）對周圍神經(jīng)橫斷損傷后神經(jīng)再生的影響及其作用機制。
　　方法：兩月齡 Sprague-Dawley雄性大鼠80只，體重200-250g，隨機分為輻照組（A組）、對照組（B組）兩組，每組40只，暴露大鼠左側坐骨神經(jīng)，顯微剪刀橫斷神經(jīng)后，由同一術者采用神經(jīng)外膜端端吻合法縫合修復離斷神經(jīng)，恢復神經(jīng)的連續(xù)性。術后24h內(nèi)A組予以1Gy劑量X線單次局部輻照，其余部位予鉛板防護。對照組不予以照射處理。術后每周

2、觀察大鼠步態(tài)、足部潰瘍、展爪反射等大體情況；術后第三天取左側大鼠坐骨神經(jīng)樣品，以RT-PCR、Western Blot法測VEGF表達結果；術后第2周取左側大鼠坐骨神經(jīng)，以 PCR、Western Blot法測GAP-43表達結果；術后第4、8、12周測定大鼠坐骨神經(jīng)功能指數(shù)；術后第12周測定神經(jīng)電生理從而評價神經(jīng)功能恢復情況；術后第12周行大體標本、組織學和免疫組織學觀察；術后第12周行透射電鏡檢查觀察神經(jīng)超微結構變化。從大體形態(tài)、運

3、動功能、組織化學、超微結構、電生理等檢測指標來觀察電離輻照對周圍神經(jīng)橫斷傷后神經(jīng)再生修復和功能恢復的影響，以明確電離輻照對周圍神經(jīng)橫斷損傷后神經(jīng)再生及功能恢復的促進作用，并通過檢測損傷周圍神經(jīng)中VEGF、GAP-43的表達，以進一步探討電離輻照促進周圍神經(jīng)再生修復及功能恢復的作用機制。
　　結果：
　　1、大體形態(tài)觀察：造模后兩組大鼠均出現(xiàn)左后肢癱瘓，足趾完全并攏，行走時左下肢呈拖行狀，輻照組大鼠足態(tài)恢復較對照組快；造模后第

4、1～2周，兩組大鼠左后足均出現(xiàn)足跟部潰瘍，輻照組第3～4周潰瘍開始愈合，早于對照組；造模后，針刺所有大鼠左后肢均無肢體回縮及展爪反射形成。輻照組肢體回縮及展爪反射開始恢復時間早于對照組，且較早恢復正常。
　　2、VEGF測定：造模后第三天，輻照組左側坐骨神經(jīng)內(nèi)VEGF表達明顯高于對照組，有統(tǒng)計學意義（P<0.01）。
　　3、GAP-43測定：造模后第2周，輻照組左側坐骨神經(jīng)內(nèi)GAP-43表達明顯高于對照組，有統(tǒng)計學意義（P

5、<0.01）。
　　4、坐骨神經(jīng)功能指數(shù)（SFI）：造模后2周內(nèi)，由于各組大鼠均出現(xiàn)左下肢拖行、左足完全并攏，各組SFI值無法測量計算。術后第4周到12周SFI逐漸恢復，經(jīng)統(tǒng)計學分析，術后第4、8周，各組SFI較前均有所好轉(zhuǎn)，輻照組SFI恢復率優(yōu)于對照組，有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。
　　5、神經(jīng)電生理檢測：造模后第12周，輻照組運動神經(jīng)的波幅及傳導速度高于對照組有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。
　　6、組織學和免疫組

6、織學觀察：造模后第12周，輻照組軸突腫脹、髓鞘結構與周圍組織粘連程度及S-100、NF-kb蛋白表達分布均優(yōu)于對照組。
　　7、透射電鏡觀察：造模后第12周，輻照組每高倍鏡視野下神經(jīng)纖維數(shù)量、軸突直徑、髓鞘形態(tài)、神經(jīng)纖維形態(tài)結構均優(yōu)于對照組。
　　結論：周圍神經(jīng)損傷后早期應用X線低劑量輻射治療有促進周圍神經(jīng)損傷后再生的作用。其可能機制包括：1．LDI可增加神經(jīng)元細胞及雪旺氏細胞表達 VEGF，促進這些細胞遷移生長和分裂增殖，