AM真菌孢子萌發(fā)及其與紫云英轉(zhuǎn)化根雙重培養(yǎng)體系建立的研究.pdf

1、叢枝菌根(AM)在自然界中廣泛分布，能夠與自然生態(tài)系統(tǒng)中80％以上的維管屬植物共生，形成叢枝菌根。AM真菌能夠促進(jìn)宿主植物礦質(zhì)營(yíng)養(yǎng)吸收，增強(qiáng)抗逆抗病能力，對(duì)維持陸生生態(tài)系統(tǒng)及植物多樣性有重要作用。
　　 由于AM真菌具有專性共生的特性，離體純培養(yǎng)至今尚未實(shí)現(xiàn)。因此，AM真菌的單菌培養(yǎng)是40余年來(lái)人們一直探索的關(guān)鍵技術(shù)，也是AM真菌研究的重點(diǎn)和熱點(diǎn)。世界各國(guó)都在積極開(kāi)展AM真菌單菌培養(yǎng)的研究工作。
　　 本論文研究了在離體

2、培養(yǎng)條件下培養(yǎng)基質(zhì)、金屬離子等環(huán)境因素對(duì)AM真菌孢子萌發(fā)和芽管菌絲生長(zhǎng)發(fā)育的影響；利用發(fā)根農(nóng)桿菌(Agrobacterium rhizogenes)轉(zhuǎn)化的豆科植物紫云英RiT-DNA轉(zhuǎn)化根與AM真菌Glomus intraradices、Gigasporamargarita、Gigaspora rosea建立了雙重培養(yǎng)體系。該雙重培養(yǎng)體系是研究AM真菌形態(tài)學(xué)、生理學(xué)、生物與非生物脅迫應(yīng)答、根際生物(PGPR、病原菌、線蟲(chóng))相互作用、分類

3、系統(tǒng)進(jìn)化等方面的理想模式，更是目前公認(rèn)的唯一能夠提供純凈AM真菌材料的方法。采用此雙重培養(yǎng)體系能夠進(jìn)行AM真菌與豆科植物相互識(shí)別信號(hào)和共生機(jī)制的研究。同時(shí)此雙重培養(yǎng)體系也為構(gòu)建AM真菌、豆科植物與根瘤菌離體三重培養(yǎng)體系提供了一些借鑒。論文取得主要結(jié)果如下：
　　 Gig. margarita、G. intraradices孢子在水瓊脂、MSR、M、MS培養(yǎng)基上均能萌發(fā)，以水瓊脂上萌發(fā)及菌絲生長(zhǎng)狀況最好。低濃度Zn2+、La3+促

4、進(jìn)Gig. margarita、Glomus intraradices孢子萌發(fā)，隨濃度上升，孢子萌發(fā)及菌絲生長(zhǎng)受抑制。
　　 以發(fā)根農(nóng)桿菌k599轉(zhuǎn)化劃傷處理的大豆子葉，并獲得大豆轉(zhuǎn)化根，但其不能在低離子濃度的人工培養(yǎng)基上生長(zhǎng)，故沒(méi)有用其與AM真菌構(gòu)建雙重培養(yǎng)體系。
　　 以發(fā)根農(nóng)桿菌k599轉(zhuǎn)化紫云英下胚軸，研究不同卡那霉素濃度對(duì)轉(zhuǎn)化根誘導(dǎo)率的影響，其結(jié)果為：適當(dāng)?shù)腒m濃度(40μg/ml)會(huì)提高紫云英RiT-DNA轉(zhuǎn)