Myosin Va在中華絨螯蟹精子發(fā)生過程中的空間分布與表達(dá).pdf

1、本文采用免疫熒光、免疫電鏡和RT-PCR的方法，對(duì)肌球蛋白Myosin Va在中華絨螯蟹精子發(fā)生過程中的空間分布與表達(dá)進(jìn)行研究。精子發(fā)生是一個(gè)復(fù)雜的細(xì)胞改變的過程，從干細(xì)胞、精母細(xì)胞轉(zhuǎn)化成成熟的精子，包括精子形成階段有絲分裂和減數(shù)分裂中的紡錘體的形成，細(xì)胞骨架的改變，膜區(qū)域的形成和重組。這些改變和細(xì)胞的重組是理解馬達(dá)分子蛋白在細(xì)胞改變中機(jī)制的理想模型。哺乳動(dòng)物的精子發(fā)生一直是近年來國(guó)內(nèi)外研究的熱點(diǎn)問題，但較低等動(dòng)物如甲殼動(dòng)物(Crust

2、acea)中，精子結(jié)構(gòu)、形態(tài)及精子發(fā)生調(diào)控的分子機(jī)制都跟哺乳動(dòng)物的精子存在顯著差別，它們的精子不具有微管套和精子尾部。而這恰恰是研究的薄弱環(huán)節(jié)。目前，學(xué)術(shù)界對(duì)肌球蛋白在十足類甲殼動(dòng)物精子形成過程中作用的分子機(jī)制研究尚屬空白。因此研究肌球蛋白Myosin Va在中華絨螯蟹精子發(fā)生過程中的空間分布與表達(dá)具有重要意義。肌動(dòng)蛋白是馬達(dá)分子蛋白之一。其在精子發(fā)生過程中改變精細(xì)胞形狀，運(yùn)輸線粒體，參與頂體發(fā)生過程。許多肌動(dòng)蛋白微絲的末端結(jié)合蛋白(包

3、括myosin蛋白)在肌動(dòng)蛋白的聚合和解聚方面起到重要的作用。肌動(dòng)蛋白在精子細(xì)胞中存在多種結(jié)構(gòu)，肌動(dòng)蛋白和它相關(guān)的蛋白家族myosin的關(guān)系及它們?cè)诰影l(fā)生過程中的作用越來越引起人們的重視。所有的肌動(dòng)蛋白的馬達(dá)蛋白都屬于肌球蛋白(myosin)家族。Myosin Va是在脊椎動(dòng)物中表達(dá)的三種肌球蛋白V(myosinsV)之一，是最具典型特征的myosins V。Myosin-Va參與小泡的運(yùn)輸，參與在肌動(dòng)蛋白一微管的交叉處的從肌動(dòng)蛋白(

4、actin)到微管(microtubule)上的轉(zhuǎn)換，以及在微管上短距離運(yùn)輸。本研究首次確定myosin Va在中華絨螯蟹精巢中表達(dá)，且其與哺乳動(dòng)物精子中的acroplaxome結(jié)構(gòu)類似，并首次觀察到該物種的精子形成過程及肌球蛋白Va在精子發(fā)生過程中的空間分布。將對(duì)其進(jìn)一步研究提供有價(jià)值參考，并對(duì)未來進(jìn)一步研究myosin Va在其它較低等動(dòng)物的精子發(fā)生中的機(jī)制奠定了基礎(chǔ)。
　　 本研究的實(shí)驗(yàn)結(jié)果是myosin Va在中華絨螯蟹