地鱉纖溶活性蛋白(EFP)抗腫瘤活性及其機(jī)理，及地鱉血淋巴抗菌活性的研究.pdf

1、地鱉又名土元、土鱉，藥用始見(jiàn)于《神農(nóng)本草經(jīng)》，在我國(guó)藥用已有兩干余年歷史，祖國(guó)醫(yī)學(xué)記載和豐富的臨床實(shí)踐均已證明其具有破血逐瘀、續(xù)筋接骨、消炎散結(jié)、舒經(jīng)活血和療傷止痛等重要藥用功效。現(xiàn)代藥學(xué)研究表明，地鱉及其提取物具有顯著活血化瘀與抑瘤功效。隨著現(xiàn)代中醫(yī)藥的發(fā)展，地鱉蟲(chóng)的藥理研究越來(lái)越深入，在食品、醫(yī)療、保健等方面有廣闊的應(yīng)用前景。
　　 本文以傳統(tǒng)中藥材中華真地鱉為原料，采用勻漿、鹽析、硫酸銨分段沉淀、透析和DEAE-52纖維素

2、離子層析等純化方法，從其體內(nèi)分離純化得到一種纖溶活性蛋白(Fibrinolyric Protein of Eupolyphaga sinensis Walker，EFP)，采用SDS-PAGE電泳法對(duì)其進(jìn)行了分子量和純度測(cè)定，采用纖維蛋白平板法測(cè)定EFP纖溶活性，并研究溫度、時(shí)間、表面活性劑、天然抑制劑、紫外線、超聲波和金屬離子等因素對(duì)其纖溶活性的影響。EFP被制成針劑注射到荷有S180和H22實(shí)體瘤的小鼠當(dāng)中，處死小鼠后取實(shí)體瘤，計(jì)算

3、抑瘤率，流式細(xì)胞儀測(cè)定細(xì)胞凋亡率，并測(cè)定caspase-3的表達(dá)。用大腸桿菌、金黃色葡萄球菌和枯草芽孢桿菌注射誘導(dǎo)中華真地鱉，取其血淋巴進(jìn)行抗菌活性實(shí)驗(yàn)，以尋求最有效的誘導(dǎo)菌和誘導(dǎo)時(shí)間，并通過(guò)加樣量、pH、溫度和加熱時(shí)間等影響因素得到其對(duì)血淋巴抗菌活性的影響。結(jié)果表明，從地鱉中提取純化的EFP為相對(duì)分子量為87．2kD的單一成分，具有顯著的纖溶活性，且其受各種物理、化學(xué)因素影響。地鱉纖溶活性蛋白對(duì)S180和H22實(shí)體瘤有一定的抑瘤作用，