基于調(diào)和肝脾法探討加味柴芍六君顆粒治療UC臨床及機(jī)制研究.pdf

1、目的:
　　李桂賢教授根據(jù)潰瘍性結(jié)腸炎大便溏爛，便次增多，大便夾有粘液、血液等主要臨床表現(xiàn)把之歸屬于泄瀉、下利、痢疾、腸風(fēng)、臟毒、大瘕泄等病范疇，其病機(jī)脾虛為其根本，肝脾不和是關(guān)鍵，濕熱為主要病理因素，氣滯血瘀貫穿在疾病的整個(gè)過(guò)程。李桂賢教授在臨床中發(fā)現(xiàn)，肝郁脾虛型的潰瘍性結(jié)腸炎最為常見(jiàn)，因此，李桂賢教授根據(jù)此現(xiàn)實(shí)情況常采用加味柴芍六君顆粒治療潰瘍性結(jié)腸炎。加味柴芍六君顆粒由四逆散和六君子湯化裁而成，取兩者合用以疏肝健脾，加味柴芍

2、六君顆粒加入白花蛇舌草、鳳尾草清熱利濕止瀉，三七活血祛瘀，合陳皮行氣止痛，寓“行血?jiǎng)t便膿自愈，調(diào)氣則后重自除”之意，同為佐使藥;甘草調(diào)和諸藥為使藥。諸藥合用，共奏疏肝解郁、理氣健脾、清熱利濕止瀉、活血祛瘀之功。
　　本課題在前期研究的基礎(chǔ)上，系統(tǒng)整理李桂賢教授的學(xué)術(shù)思想和治療UC的臨床經(jīng)驗(yàn);采用隨機(jī)、對(duì)照方法，基于治療前、后結(jié)腸鏡下黏膜愈合質(zhì)量、中醫(yī)證候?qū)W指標(biāo)、生存質(zhì)量及血清NF-KBp50、CRP表達(dá)變化，主客觀指標(biāo)合參，客觀評(píng)

3、價(jià)加味柴芍六君顆粒防治潰瘍性結(jié)腸炎的臨床效用及其可能機(jī)制;從潰瘍性結(jié)腸炎大鼠組織形態(tài)學(xué)及TLR-4/NF-KB信號(hào)通路中相關(guān)指標(biāo)變化，探討加味柴芍六君顆粒干預(yù)潰瘍性結(jié)腸炎的效應(yīng)及其可能機(jī)制。
　　方法:
　　本課題分為系統(tǒng)整理李桂賢教授的學(xué)術(shù)思想和治療UC的臨床經(jīng)驗(yàn)、臨床研究和實(shí)驗(yàn)研究三部分。
　　臨床研究方法:應(yīng)用前瞻性、非劣效設(shè)計(jì)原則，采用隨機(jī)、對(duì)照方法，將符合診斷標(biāo)準(zhǔn)、納入標(biāo)注及排除標(biāo)準(zhǔn)的60例潰瘍性結(jié)腸炎患者按

4、就診順序隨機(jī)1∶1分為兩組，即治療組和對(duì)照組。治療組予加味柴芍六君顆粒干預(yù)12周，對(duì)照組予美沙拉嗪干預(yù)12周。詳細(xì)記錄治療前、后中醫(yī)證侯學(xué)計(jì)分、腸鏡及生存質(zhì)量變化，應(yīng)用ELISA法檢測(cè)治療前、后NF-KBp50、CRP表達(dá)變化。基于黏膜愈合質(zhì)量、主要癥狀計(jì)分及生存質(zhì)量（漢密爾頓焦慮及抑郁量表評(píng)分）等變化，多角度評(píng)估加味柴芍六君顆粒干預(yù)潰瘍性結(jié)腸炎的效用。
　　實(shí)驗(yàn)研究方法:180只清潔級(jí)SD大鼠，按體質(zhì)量隨機(jī)分為6組，每組30只，

5、即正常組、模型組、對(duì)照組及治療組（低劑量、中劑量及高劑量組）。除正常組外，均應(yīng)用TNBS灌腸法制備潰結(jié)模型，自第4d起分組給藥，模型組予等劑量生理鹽水、對(duì)照組予美沙拉嗪、治療組予不同劑量加味柴芍六君顆粒，連續(xù)給藥1周。末次給藥后處死全部大鼠，應(yīng)用光鏡檢測(cè)大鼠腸道組織病理學(xué)，應(yīng)用Real-time PCR、免疫組化技術(shù)檢測(cè)TLR-4、NF-K Bp65表達(dá)變化。
　　結(jié)果:
　　1.臨床研究結(jié)果基于治療前、后腸鏡變化判定療效判

6、定:全部患者均完成臨床觀察，無(wú)病例脫落和中止。其中治療組臨床痊愈5例，顯效8例，好轉(zhuǎn)10例，無(wú)效7例，總有效率為76.66％;對(duì)照組臨床完全緩解3例，顯效7例，好轉(zhuǎn)11例，無(wú)效9例，總有效率為70％。經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，療效相似(P＞0.05)?；诎Y狀積分判定療效:治療組臨床完全緩解6例，顯效7例，好轉(zhuǎn)12例，無(wú)效5例，總有效率為83.33％;對(duì)照組臨床完全緩解4例，顯效6例，好轉(zhuǎn)10例，無(wú)效10例，總有效率為66.66％。經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，治

7、療組優(yōu)于對(duì)照組。經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，治療組優(yōu)于對(duì)照組(P＜0.05)。漢密爾頓生存質(zhì)量量表評(píng)估療效:治療組臨床完全緩解7例，顯效8例，好轉(zhuǎn)11例，無(wú)效4例，總有效率為86.66％;對(duì)照組臨床完全緩解4例，顯效5例，好轉(zhuǎn)12例，無(wú)效9例，總有效率為70％。經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，治療組優(yōu)于對(duì)照組。經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，治療組優(yōu)于對(duì)照組(P＜0.05)。治療前，兩組患者臨床癥狀比較，無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，具有可比性;治療4wk后，兩組患者便血、腹痛、腹瀉等癥狀較治療前無(wú)明

8、顯改善;治療8wk后，兩組患者便血、腹痛、腹瀉等癥狀較治療前均有不同程度改善，與治療前比較，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。治療后12wk，兩組患者上述癥狀積分較治療前有明顯改善，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。治療后12wk，兩組患者癥狀積分之間比較，治療組優(yōu)于對(duì)照組。治療后兩組患者NF-KBp50及CRP水平均較治療前下降，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，組間比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。治療前，兩組患者存在不同程度焦慮/抑郁

9、現(xiàn)象，經(jīng)比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05)，具有可比性;治療后，兩組患者焦慮/抑郁在伴隨臨床癥狀改善同時(shí)，積分比較亦呈同步變化趨勢(shì)，較治療前有明顯好轉(zhuǎn)(P＜0.05);治療后，治療組焦慮/抑郁改善明顯優(yōu)于對(duì)照組(P＜0.05)。
　　2.3.實(shí)驗(yàn)研究結(jié)果肉眼見(jiàn)正常組結(jié)腸黏膜未見(jiàn)病理變化;模型組結(jié)腸黏膜充血、腫脹，糜爛明顯，有壞死物及白色苔樣附著，潰瘍多而且大;各治療組結(jié)腸黏膜充血腫脹減輕，糜爛少，未見(jiàn)白色苔樣物附著，未見(jiàn)明顯潰瘍;對(duì)

10、照組結(jié)腸黏膜充血、腫脹較模型組減輕，潰瘍散在發(fā)生，未見(jiàn)苔樣物附著。光鏡下見(jiàn)正常組結(jié)腸黏膜形態(tài)正常;模型組黏膜層見(jiàn)一較大潰瘍，潰瘍表面有滲出壞死層，其下可見(jiàn)少量幼稚肉芽組織，潰瘍周圍的腺體擴(kuò)張，腺上皮細(xì)胞輕度增生，腸壁各層充滿浸潤(rùn)的炎細(xì)胞。各治療組見(jiàn)結(jié)腸壁黏膜及黏膜下層充血，水腫，炎性細(xì)胞浸潤(rùn)，及成纖維母細(xì)胞增加，見(jiàn)2例樣本有小潰瘍形成。對(duì)照組見(jiàn)結(jié)腸黏膜愈合性小潰瘍，腸壁各層充血、水腫，炎性細(xì)胞浸潤(rùn)，有4例樣本見(jiàn)較大潰瘍，潰瘍深達(dá)淺肌層。

11、經(jīng)比較，有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.05)。模型組TLR-4、NF-κ Bp65蛋白陽(yáng)性表達(dá)面積增加;高劑量組與模型組比較，其TLR-4、NF-κ Bp65蛋白陽(yáng)性表達(dá)面積減少，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。低、中劑量組與模型組比較，TLR-4、NF-κ Bp65蛋白表達(dá)差異不明顯(P＞0.05)。模型組大鼠結(jié)腸黏膜TLR-4、NF-κ Bp65mRNA呈高表達(dá)變化;而治療組TLR-4、NF-κ Bp65mRNA表達(dá)下降，與模型組比較，有統(tǒng)計(jì)

12、學(xué)意義(P＜0.05)。
　　結(jié)論:
　　1.加味柴芍六君顆?？梢越档蚒C患者NF-KBp50、血清C反應(yīng)蛋白水平，減輕病變結(jié)腸的炎癥程度，改善便血、腹痛及腹瀉等臨床癥狀，促進(jìn)潰瘍愈合，其臨床療效與美沙拉嗪腸溶片大致相當(dāng)，而且安全、無(wú)明顯毒副作用。另外，加味柴芍六君顆粒改善患者生存質(zhì)量方面優(yōu)于美沙拉嗪，值得推廣應(yīng)用。
　　2.加味柴芍六君顆?？赡芡ㄟ^(guò)下調(diào)TLR-4、NF-κ Bp65表達(dá)，緩解腸道炎癥，促進(jìn)潰瘍愈合，而