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文檔簡介
1、目的:
右美托咪定是一種特異性的新型的α2受體激動劑,不但具有降血壓作用,還兼有鎮(zhèn)靜、鎮(zhèn)痛以及抗焦慮等作用,臨床上主要用作麻醉和機械通氣時的輔助鎮(zhèn)靜作用。近年來有文獻(xiàn)報道其對不同原因引起的小鼠急性肺水腫有很好的保護(hù)效果,但其具體機制尚未清楚。急性肺水腫是由于某種原因所引起肺腔組織液的生成和重吸收的動態(tài)平衡失調(diào),導(dǎo)致大量組織液在較短時間內(nèi)不能被肺臟淋巴和肺靜脈系統(tǒng)重吸收,水腫液積聚在肺泡、肺間質(zhì)以及細(xì)小支氣管內(nèi),造成肺通氣與肺換
2、氣的嚴(yán)重功能障礙,是臨床常見的疾病之一。急性肺水腫患者通常會出現(xiàn)嚴(yán)重的呼吸困難、端坐樣呼吸、咳嗽、口唇紫紺以及心率增快等癥狀,嚴(yán)重者可出現(xiàn)暈厥以及心臟驟停的后果。肺泡上皮鈉離子通道(epithelial sodium channel,ENaC)是一種對阿米洛利極其敏感的通道,因此又稱為阿米洛利敏感性鈉通道,其在急性肺水腫的水腫液清除過程中起著重要的作用。我們推測右美托咪定在脂多糖(lippolysaccharide,LPS)誘導(dǎo)的小鼠急
3、性水腫型肺損傷中有著同樣的保護(hù)作用,并且其保護(hù)作用的原因可能與ENaC有關(guān)。本研究主要目的在于討論右美托咪定對LPS導(dǎo)致的急性肺水腫的作用,并明確其中可能存在的分子機制。
方法:
一、采用將小鼠麻醉后在動物呼吸機給予氧氣的條件下向小鼠肺泡注射BSA溶液的方法,測定不同藥物條件下小鼠的肺泡液體清除率(alveolar fluidclearance,AFC)。
二、采用將小鼠麻醉后進(jìn)行LPS氣管滴注的方法,建立
4、小鼠急性肺水腫模型。
三、采用HE染色的方法來檢測LPS導(dǎo)致的小鼠急性肺損傷的損傷情況以及右美托咪定對小鼠水腫型肺損傷的影響。
四、應(yīng)用逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(reverse transcription polymerize chain reaction,RT-PCR)法檢測右美托咪定對LPS所致小鼠急性肺水腫α-ENaC和γ-ENaC的mRNA表達(dá)水平的影響。
五、采用ELISA的方法檢測在LPS所致小鼠急性
5、肺水腫以及給予右美托咪定后小鼠血清中TNF-α、IL-6和MPO等炎性因子的含量變化。
結(jié)果:
一、通過測定小鼠AFC之后,與對照組相比,阿米洛利組抑制肺泡液體清除的作用非常明顯,右美托咪定能夠顯著增加肺泡液體的清除,同時該作用能夠被阿米洛利所阻斷。
二、通過測定小鼠肺濕干重比,對照組比值最小,LPS組最高,在給予右美托咪定之后,小鼠肺濕干重比出現(xiàn)降低,說明LPS導(dǎo)致了小鼠肺水腫,肺水腫模型成功,右美托咪定
6、使小鼠的肺水腫程度得到減輕。
三、通過HE染色我們可以發(fā)現(xiàn),對照組幾乎沒有肺損傷,LPS組肺損傷非常嚴(yán)重,在給予右美托咪定之后,肺損傷出現(xiàn)好轉(zhuǎn),說明右美托瞇定逆轉(zhuǎn)了LPS導(dǎo)致的小鼠肺組織損傷。
四、在小鼠肺泡α-ENaC和γ-ENaC的mRNA表達(dá)中,與對照組相比,LPS組的表達(dá)顯著下降,在給予右美托咪定之后,小鼠肺泡α-ENaC和γ-ENaC的mRNA表達(dá)顯著增加。
五、在ELISA實驗中,對照組小鼠血清
7、中TNF-α、IL-6和MPO等炎性因子含量較低,LPS組小鼠血清中炎性因子含量顯著增加,在給予右美托咪定之后,小鼠血清炎性因子含量得到不同程度的降低,說明右美托咪定能夠降低肺水腫模型小鼠血清中TNF-α、IL-6和MPO等炎性因子的含量。
結(jié)論:
右美托咪定顯著增加了小鼠肺泡液體清除率,使在體小鼠肺泡內(nèi)水腫液得以清除,對于小鼠的急性肺水腫有著明顯的保護(hù)作用。右美托咪定的這種保護(hù)作用可以被阿米洛利所阻斷以及右美托咪定
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