附子水溶性生物堿治療急性心力衰竭的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：研究附子水溶性生物堿對(duì)急性心力衰竭的治療作用。
　　實(shí)驗(yàn)方法：①對(duì)健康的成年大鼠采用左心室插管的方法監(jiān)控其心率與心室內(nèi)壓，并以靜脈注射普羅帕酮制作急性心力衰竭模型，造模成功后，分別對(duì)各組大鼠進(jìn)行給藥：陽(yáng)性組給予參麥注射液（6.67mL/kg）、模型組給予蒸餾水0.1mL/kg、給藥組給予附子水溶性生物堿（1.25×10-3g/kg，2.50×10-3g/kg，5.00×10-3g/kg）。記錄其造模前后與給藥后5、10、20

2、、30、60min的HR、+dp/dtmax及-dp/dtmax值的變化。另取一批大鼠，以相同方式進(jìn)行急性急性心力衰竭造模給藥，給藥20min后對(duì)各組大鼠進(jìn)行股靜脈采血，并用酶聯(lián)免疫法（Elisa）測(cè)定其血清中各細(xì)胞因子（TNF-α、Ang-Ⅰ、Ang-Ⅱ、BNP、ANP、ALD）的含量水平及其活性變化。②原代培養(yǎng)心肌細(xì)胞（以差速貼壁為純化方法），除正常組細(xì)胞不予處理外，其余組別細(xì)胞通過(guò)給予戊巴比妥鈉（濃度0.8％）對(duì)細(xì)胞進(jìn)行造模，造模

3、成功后給藥：模型組（同體積無(wú)血清培養(yǎng)基）、陽(yáng)性組（去乙酰毛花苷4mL/L）、給藥組（附子水溶性生物堿0.01g/L，0.02g/L，0.04g/L）。藥物與細(xì)胞作用90min后，對(duì)其進(jìn)行染色，于顯微鏡下觀察其形態(tài)并記錄。再直接將各濃度附子水溶性生物堿與正常心肌細(xì)胞作用，90min后，測(cè)定細(xì)胞的活力以及相關(guān)細(xì)胞因子、離子的濃度與ATP酶的活性。另取一批細(xì)胞，除正常組細(xì)胞不予處理外，其余組別細(xì)胞通過(guò)給予戊巴比妥鈉（濃度0.8%）對(duì)細(xì)胞進(jìn)行造

4、模，造模成功后給藥：模型組（同體積無(wú)血清培養(yǎng)基）、陽(yáng)性組（去乙酰毛花苷4mL/L）、給藥組（附子水溶性生物堿0.01g/L，0.02g/L，0.04g/L）。藥物與細(xì)胞作用90min后，測(cè)定心肌細(xì)胞活力以及相關(guān)細(xì)胞因子濃度、ATP酶的活性與相關(guān)的離子濃度。
　　結(jié)果：①用普羅帕酮造模之后的大鼠，HR與+dp/dtmax出現(xiàn)下降，而-dp/dtmax值則顯著升高，附子水溶性生物堿1.25×10-3、2.50×10-3、5.00×10

5、-3g/kg靜脈給藥后，可有效升高模型大鼠的HR和+dp/dtmax，降低-dp/dtmax。給藥后，血清中Ang-Ⅰ、Ang-Ⅱ、ANP、BNP、ALD、TNF-α等指標(biāo)均有所降低。②正常心肌細(xì)胞通過(guò)戊巴比妥鈉造成急性心力衰竭模型后，搏動(dòng)減弱或消失，且胞形態(tài)也發(fā)生了明顯改變，并有細(xì)絲狀的觸角伸出，部分細(xì)胞形狀變圓。陽(yáng)性組與附子水溶性生物堿組細(xì)胞形態(tài)大多有所恢復(fù)，且絲狀觸角明顯減少。附子水溶性生物堿各劑量均有降低正常心肌細(xì)胞Na+、Ca

6、2+含量以及升高正常心肌細(xì)胞K+含量的作用，且各劑量組均能使Ca2+-Mg2+-ATP酶、Ca2+-ATP酶與Na+-K+-ATP酶的活性提高。經(jīng)戊巴比妥鈉造模后的心肌細(xì)胞，其膜上Na+-K+-ATP酶的活性增高，而Ca2+-ATP酶與Ca2+-Mg2+-ATP酶的活性出現(xiàn)降低，細(xì)胞內(nèi)Ca2+、K+的濃度升高，Na+與Mg2+的濃度下降；陽(yáng)性藥與附子水溶性生物堿各劑量給藥后，急性心力衰竭模型細(xì)胞活力顯著提高，且Na+與Mg2+的濃度與C

7、a2+-ATP酶、Ca2+-Mg2+-ATP酶的活性均有所升高，Ca2+、K+的含量與Na+-K+-ATP酶的活性則有所降低，其對(duì)急性心力衰竭細(xì)胞模型的作用趨勢(shì)和強(qiáng)心苷類(lèi)藥物相仿。
　　結(jié)論：附子水溶性生物堿對(duì)急性心力衰竭大鼠模型以及急性心力衰竭細(xì)胞模型都具有改善作用；能調(diào)節(jié)HR、+dp/dtmax、-dp/dtmax使之趨于正常水平，并可調(diào)節(jié)動(dòng)物體內(nèi)與急性心力衰竭相關(guān)的細(xì)胞因子；還能提高心肌細(xì)胞的活力、調(diào)節(jié)心肌細(xì)胞內(nèi)與急性心力衰