結腸癌轉移相關基因1對食管癌細胞增殖和遷移的作用及其機制研究.pdf

1、目的:
　　研究結腸癌轉移相關基因1(Metastasis Associated In Colon Cancer1，MACC1)對食管癌細胞增殖和遷移的作用及可能的機制。
　　方法:
　　1.采用RT-PCR及Western blot檢測不同食管癌細胞株EC109、EC9706、TE13、EC1和正常食管上皮細胞株HEEpiC中MACC1的表達，選取低表達MACC1的細胞株TE13和高表達MACC1的細胞株EC109進

2、行后續(xù)實驗。
　　2.構建攜帶MACC1的腺病毒載體Ad-MACC1和MACC1 siRNA，Ad-MACC1感染TE13細胞，增加MACC1的表達，MACC1 siRNA轉染EC109食管癌細胞，降低MACC1的表達，通過Western blot檢測感染或轉染效果。
　　3.Ad-MACC1和MACC1 siRNA分別處理TE13和EC109細胞后，通過MTT實驗檢測MACC1對人食管癌細胞增殖的影響，流式細胞術檢測對MA

3、CC1細胞周期的影響。采用劃痕實驗及克隆形成實驗觀察感染或轉染前后食管癌細胞侵襲及遷移變化。
　　4.采用Western blot檢測Ad-MACC1和MACC1 siRNA處理食管癌細胞TE13和EC109后的增殖細胞核抗原(PCNA)和c-MET等的表達。
　　結果:
　　1.MACC1在食管癌細胞株EC9706和Eca109中表達較正常食管上皮細胞株HEEpiC中高，而在TE13和EC1中表達較低。
　　2

4、.成功構建Ad-MACC1和MACC1 siRNA，Ad-MACC1感染TE13細胞后，MACC1基因和蛋白的表達增加。而MACC1 siRNA轉染EC109細胞后，MACC1基因和蛋白的表達降低。
　　3.Ad-MACC1感染TE13細胞后，細胞的增殖和遷移明顯的增加。而MACC1 siRNA轉染EC109細胞后，細胞的增殖和遷移受到明顯的抑制。
　　4.Ad-MACC1感染TE13細胞后，PCNA和c-MET基因和蛋白表

5、達明顯增加，而MACC1siRNA轉染EC109細胞后，PCNA和c-MET基因和蛋白表達較陰性對照組降低。
　　結論:
　　MACC1在EC9706和Eca109中表達較TE13和EC1高，其高表達可促進細胞的增殖和遷移，而表達下調后明顯抑制食管癌細胞的增殖、侵襲及轉移潛能，MACC1高表達促進PCNA和c-MET的表達，而低表達抑制其表達。MACC1促進食管癌細胞的增殖、侵襲及轉移。其機制可能通過調節(jié)下游基因c-MET表