白血病的出生前起源和出生后的骨髓微環(huán)境起源.pdf

1、人類(lèi)白血病是一個(gè)多步驟并且逐漸演化的過(guò)程。目前，通過(guò)對(duì)大量的人類(lèi)白血病樣本進(jìn)行基因表達(dá)譜分析，白血病因此得到有效的分類(lèi)和生物學(xué)研究。部分研究人員還報(bào)道了從病人標(biāo)本中直接獲取白血病干細(xì)胞（LSCs)特異的基因表達(dá)譜，所有這些在不同細(xì)胞群體之間比較基因表達(dá)譜的研究都是基于細(xì)胞表面的免疫分子的表達(dá)。然而，隨著移植模型的發(fā)展，許多之前被認(rèn)為不含有LSCs的細(xì)胞群，也能在小鼠體內(nèi)重建[1]。因此，用免疫表型來(lái)界定細(xì)胞群體或者鑒定白血病表型，并不能

2、真實(shí)反映白血病的發(fā)展進(jìn)程，更不能反映白血病的起源[2]。研究白血病細(xì)胞的起源，在早期臨床診斷和遏制白血病惡性程度方面有重要意義，也可為白血病高風(fēng)險(xiǎn)人群提供預(yù)防性的治療意見(jiàn)。本課題主要研究了白血病的出生前起源和出生之后的骨髓微環(huán)境起源。
　　1.出生前起源
　　Fev(也被稱(chēng)為petl)是最近發(fā)現(xiàn)的ETS家族的轉(zhuǎn)錄因子[3]。我們的合作者闡述了Fev在斑馬魚(yú)中對(duì)胚胎造血干細(xì)胞的生成發(fā)揮著重要作用[4]，這提示Fev基因可能在高

3、等動(dòng)物血液系統(tǒng)中同樣具有非常重要的作用。在前期的實(shí)驗(yàn)中，我們檢測(cè)Fev在人類(lèi)不同發(fā)育階段的干/祖細(xì)胞造血細(xì)胞群中的表達(dá)情況，結(jié)果發(fā)現(xiàn)Fev只在出生前的造血干/祖細(xì)胞中表達(dá)，在新生嬰兒血液系統(tǒng)和成年人骨髓造血系統(tǒng)不表達(dá)。隨后個(gè)我們又檢測(cè)了Fev在小鼠出生前和出生后的造血細(xì)胞中的表達(dá)情況，結(jié)果與人類(lèi)造血系統(tǒng)表達(dá)譜相同，即是Fev在出生前的造血系統(tǒng)表達(dá)并行調(diào)控造血干細(xì)胞的自我更新，在出生后的造血細(xì)胞中沉默。有趣的是，在一些急性髓細(xì)胞白血病（A

4、ML)和急性淋巴細(xì)胞白血?。ˋLL)臨床病人血樣中，我們檢測(cè)到Fev的重新表達(dá)，但是這種重新表達(dá)并沒(méi)有顯著的譜系特征。
　　Fev在某些白血病中的重新表達(dá)提示我們Fev可以作為一個(gè)標(biāo)志基因來(lái)研究白血病的出生前。為了進(jìn)一步研究病人白血病細(xì)胞中表達(dá)的Fev是由出生前的造血干細(xì)胞保留而來(lái)還是由出生后的血干細(xì)胞重新激活，我們分別在出生前和出生后的造血干/祖細(xì)胞中表達(dá)MLZ-JF9或者白血病致病基因，檢測(cè)不同起源的白血病細(xì)胞中Fev的表達(dá)情

5、況。結(jié)果提示白血病干細(xì)胞中Fev調(diào)控的自我更新能力不是發(fā)病過(guò)程中重新激活的，而是從胎肝造血干細(xì)胞中保留而來(lái)。
　　2.出生后的骨髓微環(huán)境起源
　　TEL-AML/融合基因在兒童白血病中非常常見(jiàn)，遺傳學(xué)研究顯示，約25%的兒童急性淋巴系白血病（ALL)患者存在t(12;21)染色體異位[5,6]。含有TEUML/融合基因的ALL患兒中，在CD34+CD38_CD19+細(xì)胞群中能夠檢測(cè)到ZEZ-4MZ/融合基因，但是在CD34+

6、CD38- CD19_的細(xì)胞群卻檢測(cè)不到ZEZ-AML1,說(shuō)明在此類(lèi)型ALL中，正常造血干細(xì)胞（HSCs)并沒(méi)有受到影響，同時(shí)CD34+CD38-CD19+在正常骨髓中并不存在。CD34+CD38-CD19+細(xì)胞群能夠在小鼠體內(nèi)多次重建，說(shuō)明該群細(xì)胞可以作為腫瘤起始細(xì)胞。因此，TEL-AML1是來(lái)源于胚胎時(shí)期的起始突變，可形成由前白血病干細(xì)胞維持的前白血病克隆。
　　為了研究骨髓微環(huán)境對(duì)白血病發(fā)生的影響，我們構(gòu)建了TEL-AML7