四株海洋來源真菌活性次級代謝產(chǎn)物的研究.pdf

1、海洋真菌作為海洋微生物的重要組成部分，其遺傳背景復雜，次生代謝產(chǎn)物具有化學多樣性豐富、產(chǎn)量高等特點，在藥物先導化合物的發(fā)現(xiàn)、石油降解及海洋環(huán)境的修復等方面發(fā)揮著重要作用。近年來由于對隨著對陸生微生物天然產(chǎn)物研究的深入，由于化合物的重復分離，從陸生微生物中尋找尋找新的活性天然產(chǎn)物的難度越來越大。所以，天然產(chǎn)物學家們把他們的目光集中到海洋微生物上，特別是海洋真菌，由于其的生存的特殊環(huán)境，被認為是新的活性天然產(chǎn)物的重要源泉。
　　在這個

2、前提下以及作為我們前期海洋真菌活性天然產(chǎn)物發(fā)現(xiàn)工作的延續(xù)，我們采用化學和生物學相結(jié)合的方法，開展對海洋真菌活性次生代謝產(chǎn)物的研究工作。具體內(nèi)容包括:菌株的分離與純化;真菌菌株的篩選及“天才”真菌的獲得;目標真菌的發(fā)酵條件摸索;真菌發(fā)酵、提取及化合物分離;單體化合物的結(jié)構(gòu)鑒定;單體化合物活性的初步評價及構(gòu)效關(guān)系的分析。
　　本論文對15個海洋來源樣品進行了微生物的分離，最終分離得到90株真菌和46株放線菌。通過TLC、HPLC指紋圖

3、譜和HPLC-MS的化學篩選結(jié)合抗腫瘤、抗菌、抗病毒及糖苷酶抑制活性等活性篩選，最終分離篩選到4株海洋“天才”真菌，對其發(fā)酵條件進行了系統(tǒng)的摸索后進行大規(guī)模的發(fā)酵提取，然后對其次生代謝產(chǎn)物的結(jié)構(gòu)和活性進行了深入研究。
　　綜合采用薄層色譜、硅膠柱色譜、凝膠柱色譜和半制備高效液相等色譜法從菌株莖點屬真菌Phoma sp.OUCMDZ-1847中共分離得到18個化合物(1-18)，其中包括3個新的硫代二酮哌嗪類化合物(1-3)、10個

4、己知的硫代二酮哌嗪類化合物(4-13)、兩個簡單的二酮哌嗪類化合物(14-15)、一個苯的衍生物(16)、一個吲哚衍生物(17)和一個嘌呤類化合物(18)。從曲霉屬真菌Aspergillussp.OUCMDZ-1583中分離得到23個化合物(19-41)，包括18個新化合物(19-36)和5個已知的化合物(37-41)。從菌株OUCMDZ-1635中分離得到3個新的化合物(42-44)，包括一個以一對互變異構(gòu)體存在的生物堿類化合物(42

5、)、一個倍半萜類化合物(43)和一個甾體類化合物(44)。從菌株OUCMDZ-1857中分離得到2個已知的生物堿類化合物(45，46)。通過核磁共振譜(NMR)、質(zhì)譜(MS)、紫外光譜(UV)、紅外光譜(IR)、圓二色譜(CD)等現(xiàn)代波譜和光譜學方法結(jié)合X-射線單晶衍射和化學溝通反應(yīng)等方法確定了化合物的平面結(jié)構(gòu)以及絕對構(gòu)型。
　　最后，運用體外生物活性篩選模型，采用生物活性評價方法評價了所獲得的單體化合物的抗腫瘤、抗流感病毒H1N

6、1、抗菌和α糖苷酶抑制活性。結(jié)果表明:結(jié)果顯示化合物2，4，5，11和12對HL-60，HCT-116，A549，K562和MGC-803五株腫瘤細胞株的顯示有較好的腫瘤細胞毒活性。化合物19，20，23，28，29，32-36，和39-41具有一定的糖苷酶抑制活性，IC50分別是2.36，1.65，1.30，2.37，2.70，1.36，1.54，2.21，2.26，0.027，1.65，1.19和1.74 mM，陽性藥阿卡波糖的IC