PI3K-Akt信號(hào)通路與肝星狀細(xì)胞活化的關(guān)系及其在放射性肝纖維化中的作用.pdf

1、目的：探討PI3K/Akt信號(hào)通路與肝星狀細(xì)胞（HSC）活化的關(guān)系及其在放射性肝纖維化中的作用。
　　方法：使用6MV X射線聯(lián)合PI3K/Akt信號(hào)通路特異性抑制劑（Ly294002）處理HSC，分為空白對(duì)照組、抑制劑組、10Gy組、10Gy＋抑制劑組、20Gy組和20Gy＋抑制劑組。MTT法檢測(cè)24、48、72、96h后細(xì)胞抑制率；流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞凋亡率、ELISA法檢測(cè)TGF-β1濃度、RT-PCR檢測(cè)α-SMA、casp

2、ase-3、caspase-9的mRNA表達(dá)量、Western blot檢測(cè)p-Akt的表達(dá)量。
　　結(jié)果：空白對(duì)照組細(xì)胞形態(tài)正常，隨著照射劑量的增加細(xì)胞形態(tài)改變?cè)矫黠@，加入抑制劑后細(xì)胞形態(tài)改變減輕。MTT法顯示：相同時(shí)間，隨著照射劑量的增加抑制率也增加(F=40.421、319.196、128.928、270.54，P<0.05)。隨著時(shí)間的延長(zhǎng)，抑制率也增加。FCM法顯示：與空白對(duì)照組相比，10Gy和20Gy組細(xì)胞的凋亡率隨照

3、射劑量的增加而增加（t＝8.43、11.63，P<0.05）；與10Gy和20Gy組比較，分別加抑制劑后細(xì)胞的凋亡率降低（t＝8.09、4.88，P<0.05）。與空白對(duì)照組相比，抑制劑組、10Gy組、10Gy＋抑制劑組、20Gy組、20Gy＋抑制劑組α-SMA、caspase-3、caspase-9的表達(dá)量差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（F=67.942、56.503、10.069，P<0.05）。與10Gy照射組比較，20Gy組TGF-β1、α

4、-SMA、p-Akt的表達(dá)量增加（t=6.91、7.80、9.28，P<0.05），10Gy＋抑制劑組在加入抑制劑后TGF-β1、α-SMA、p-Akt的表達(dá)量降低（t=6.17、15.11、10.34，P<0.05）。與20Gy組比較，20Gy＋抑制劑組在加入抑制劑后TGF-β1、α-SMA、p-Akt的表達(dá)量同樣降低（t=10.04、6.85、23.84，P<0.05）。
　　結(jié)論：X射線通過(guò)激活PI3K/Akt信號(hào)通路使HS