2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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文檔簡介

1、金屬材料在腐蝕過程中受到微生物腐蝕的影響,硫酸鹽還原菌(SRB)是一種能促進(jìn)金屬腐蝕的微生物。本文旨在通過以硫酸鹽還原菌厭氧培養(yǎng)體系的建立為基礎(chǔ),在成功培養(yǎng) SRB菌株的前提下,利用兩種核酸擴(kuò)增技術(shù)——聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)和重組酶聚合酶擴(kuò)增反應(yīng)(RPA)建立快速檢測SRB菌株的方法。
  通過以厭氧操作箱和厭氧培養(yǎng)盒為主的厭氧培養(yǎng)方法,培養(yǎng)了購自中國普通微生物菌種保藏管理中心的Desulfovibrio fructosivor

2、ans(Df,菌株編號3468)和獲贈于中國科學(xué)院海洋研究所的Desulfovibrio vulgaris(Dv),Desulfovibrio caledoniensis(Dc)及7株采集分離后未鑒定的硫酸鹽還原菌。分別以硫酸鹽還原菌16s rDNA中的特異性保守片段和SRB特異性基因異化亞硫酸鹽還原酶(DSR)、腺苷酰硫酸還原酶(APS)為模板設(shè)計了11對引物。通過聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)以標(biāo)準(zhǔn)菌株Desulfovibrio cale

3、doniensis(Dc)基因組DNA為模板驗證引物的有效性并用多種SRB菌株以及大腸桿菌DH5α基因組DNA為模板驗證引物的特異性,找到了2對能夠特異性擴(kuò)增部分SRB基因組DNA的引物。在PCR驗證的2對特異性引物的基礎(chǔ)上,初步探索了利用重組酶聚合酶擴(kuò)增反應(yīng)(RPA)檢測SRB的方法,設(shè)計了4對RPA引物,經(jīng)過驗證沒有獲得特異性檢測SRB的引物,但發(fā)現(xiàn)其中一對引物可用于PCR方法檢測SRB,為將來優(yōu)化RPA反應(yīng)體系及引物設(shè)計提供了重要

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