核仁磷酸蛋白B23在調控微管動力學的功能.pdf

1、核仁磷酸蛋白(B23)是一種多功能的磷酸蛋白，它主要定位于細胞核內，并且快速的穿梭于細胞核和細胞質之間。目前對于B23的研究主要集中在細胞核內它對細胞周期和增值調控，關于B23在胞質內對微管的調控研究還知之甚少。
　　 微管是由微管蛋白的異二聚體構成的管狀空間網架結構，它是維持細胞結構和細胞行使各種生理功能的基礎結構。細胞對微管的效調控極其精細和復雜生物學過程，微管動力學主要分為兩種狀態(tài)：一種是增長，另一種是解聚，這兩種狀態(tài)的互

2、換是快速并且隨機的。微管由長聚合態(tài)解聚成短的解聚態(tài)的過程叫做catastrophe；由解聚態(tài)聚合成長聚合態(tài)的過程叫做rescue。這兩種過程(增長/解聚)受到各種因子的調控，促進細胞解聚的因子叫做解聚因子，行使相反作用的因子是聚合因子。
　　 本文主要研究核仁磷酸蛋白(B23)調控微管的動力學過程。我們發(fā)現(xiàn)作為一種微管穩(wěn)定因子，B23可以調控微管的動力學過程，并且通過抑制其下游解聚因子的從而保護微管解聚。
　　 通過解聚

3、態(tài)/聚合態(tài)微管分離實驗，我們發(fā)現(xiàn)B23的敲除使細胞內的聚合態(tài)微管量下降，并且這種解聚不受微管聚合藥物紫杉醇的恢復。我們發(fā)現(xiàn)，通過同時敲除B23下游微管解聚因子Eg5可以恢復由B23敲除引起的微管解聚，這就說明B23調控微管是依賴于Eg5的解聚功能的。我們通過體內免疫共沉淀發(fā)現(xiàn)B23可以和Eg5結合，并且這種結合是直接的蛋白質相互作用。我們進一步通過體外偶聯(lián)-酶活實驗證明B23可以直接通過抑制Eg5的水解酶活抑制微管解聚。