丹參須狀細(xì)根化學(xué)成分研究.pdf

1、丹參(Salvia miltiorrhiza bge．)屬于唇形科(Labiatae)鼠尾草屬(Salvial)植物。該屬約包括700-1050余種植物，遍布在全球溫暖地帶，主要分布于地中海地區(qū)和西亞。在我國(guó)該屬植物約有78種，24個(gè)變種，8個(gè)變型，分布于全國(guó)各地，尤以西南地區(qū)居多。 中藥丹參(Radix Et Rhizoma Salviae Miltiorrhizae)為丹參(Salvia miltiorrhiza Bge．)

2、的干燥根及根莖。為更全面地開發(fā)利用該植物資源，首先，本論文利用HPLC法測(cè)定了丹參不同部位中幾種化學(xué)成分的含量；其次，以丹參須狀細(xì)根(陜西商洛)為研究對(duì)象，利用星點(diǎn)設(shè)計(jì)-效應(yīng)面法對(duì)其中有效成分的酶解工藝進(jìn)行研究；再者，以植物化學(xué)理論和現(xiàn)代化學(xué)分離分析技術(shù)為基礎(chǔ)，利用硅膠和聚酰胺柱層析、TLC、聚酰胺薄膜等分離檢測(cè)方法，對(duì)丹參須狀細(xì)根中的酚性成分進(jìn)行了分離純化；主要研究結(jié)果如下： 1.幾種有效成分在丹參不同部位的分布特征首先，按四

3、個(gè)不同部位將丹參植物樣分為葉、莖、主根和須狀細(xì)根。以丹參素、原兒茶醛、丹酚酸B、二氫丹參酮I、丹參酮I和丹參酮IIA六種成分為對(duì)照品，利用HPLC法分別測(cè)定丹參四個(gè)部位中上述六種成分的含量。從各對(duì)照品和丹參四個(gè)不同部位六種成分的HPLC可以看出，丹參葉除檢測(cè)出丹參素(0.0863％)和丹酚酸B(2.7989％)外，均未檢測(cè)出其余四種成分；丹參莖中除檢測(cè)出丹參素(0.0259％)、丹酚酸B(1.1450％)和丹參酮Ⅰ(0.0055％)外，

4、均未檢測(cè)出其余三種成分；丹參主根中未檢測(cè)出原兒茶醛、二氫丹參酮I和丹參酮Ⅰ，丹參素、丹酚酸B和丹參酮ⅡA的含量分別為0.0265％、7.4760％和0.0012％；而在丹參須狀細(xì)根中，丹參素、原兒茶醛、丹酚酸B、二氫丹參酮Ⅰ、丹參酮Ⅰ和丹參酮ⅡA六種成分均被檢測(cè)出，其中丹酚酸B和丹參酮Ⅰ含量較高，分別為10.9655％和0.1890％，其余四種成分含量較低：丹參素為0.0367％，原兒茶醛為0.0038％，二氫丹參酮Ⅰ為0.0033％，

5、丹參酮ⅡA為0.0077％。以上結(jié)果表明：相比較于主根，以上六種成分在須狀細(xì)根中的分布均存在量上的優(yōu)勢(shì)。 2.丹參須狀細(xì)根有效成分酶法提取工藝首先，通過(guò)單因素試驗(yàn)研究了pH值、加酶量、酶解溫度以及酶解時(shí)間對(duì)丹參須狀細(xì)根有效成分收率的影響，得出pH值、加酶量和酶解溫度對(duì)丹參須狀細(xì)根有效成分收率的影響較大，而酶解時(shí)間各水平(0.5、1.0、1.5、2.0和2.5h)之間沒(méi)有顯著性差異；其次，通過(guò)星點(diǎn)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)一效應(yīng)面法來(lái)優(yōu)化對(duì)丹參須狀

6、細(xì)根有效成分收率的影響較大且作用不易預(yù)測(cè)的三個(gè)因素—pH、加酶量和酶解溫度，結(jié)果表明，丹參須狀細(xì)根中總丹參酮的最優(yōu)纖維素酶酶解工藝參數(shù)為：纖維素酶用量84 mg·g-1須狀細(xì)根，緩沖液pH=4.2，溫度53℃；丹參須狀細(xì)根中總丹酚酸的最優(yōu)纖維素酶酶解工藝參數(shù)為：纖維索酶用量25mg·g-1須狀細(xì)根，緩沖液pH=5.4，溫度55℃。利用優(yōu)選出的酶解工藝所得到的丹參須狀細(xì)根提取液中總丹參酮和總丹酚酸的收率較非酶法分別提高了113.92％和3

7、0.64％，并且薄層檢測(cè)表明纖維素酶酶解對(duì)提取液中的有效成分無(wú)質(zhì)的影響；同時(shí)，建立的數(shù)學(xué)模型的復(fù)相關(guān)系數(shù)較高，并且通過(guò)檢驗(yàn)，說(shuō)明模型有較好的預(yù)測(cè)性。 3.丹參須狀細(xì)根化學(xué)成分的分離純化與結(jié)構(gòu)鑒定應(yīng)用柱層析(硅膠柱、聚酰胺柱和凝膠柱)和制備薄層層析等方法，對(duì)陜西天士力商洛丹參藥源基地提供的丹參須狀細(xì)根醇提物進(jìn)行了分離、純化研究，共分離得到了8個(gè)單體化合物，其編號(hào)和質(zhì)量分別為：Ⅰ(2.5mgl)、Ⅱ(2.8mg)、Ⅲ(4.9rag

8、)、Ⅳ(6.0mg)、Ⅴ(10.5mg)、Ⅵ(18.3mg)、Ⅶ(10.1mg)、Ⅷ(9mg)。經(jīng)與標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照品進(jìn)行HPLC對(duì)照，確定化合物Ⅷ為丹參素；利用1H-NMR、13C-NMR、MS等現(xiàn)代波譜技術(shù)，鑒定出化合物Ⅶ為咖啡酸庚酯，化合物Ⅵ為異阿魏酸，其中咖啡酸庚酯為首次從丹參中分離得到。 本論文研究發(fā)現(xiàn)丹參須狀細(xì)根中主要化學(xué)成分的含量高于主根，同時(shí)發(fā)現(xiàn)丹參地上部分也有較高的利用價(jià)值；纖維素酶法可以顯著提高丹參須狀細(xì)根中有效成分