泛素E3連接酶在DNA損傷修復途徑里的大規(guī)模篩選及其功能研究.pdf

1、細胞基因組時刻遭受著來自內外因素的損傷威脅，如果這些損傷無法得到及時、準確的修復，將會導致基因組的不穩(wěn)定，甚至是細胞死亡與腫瘤發(fā)生。
　　為了應對各種不同的DNA損傷，機體演化出了一系列精細的應對機制，包括細胞周期阻遏、損傷修復，以及其他細胞信號通路。參與這一系列應對機制的蛋白功能的發(fā)揮往往依賴于蛋白翻譯后修飾信號的調控，如磷酸化、乙酰化、甲基化、泛素化、蘇素化等。泛素化修飾是很多參與DNA損傷修復蛋白發(fā)揮功能的重要調控手段之一。

2、蛋白泛素化修飾信號通過E1激活酶、E2結合酶和E3連接酶的信號傳遞和層疊而完成。
　　目前在人類中，已有大約500余種的泛素連接酶被定義。為了發(fā)現(xiàn)更多未知的蛋白，我們克隆了300余種E3連接酶的cDNA。以53BP1在電離輻射損傷誘導下的foci作為檢測標志物，利用免疫熒光實驗手段，篩選可能影響53BP1招募的E3連接酶。在此次篩選中，我們找到了許多已經報道的參與到DNA損傷修復通路的E3連接酶（如RNF4、RNF8、RNF168