腦缺血再灌流后大鼠大腦皮質(zhì)神經(jīng)細(xì)胞和星形膠質(zhì)細(xì)胞的體視學(xué)研究.pdf

1、為了觀察不同缺血時(shí)間，不同再灌流時(shí)間大鼠大腦皮質(zhì)不同區(qū)域神經(jīng)細(xì)胞和星形膠質(zhì)細(xì)胞的形態(tài)學(xué)變化，本實(shí)驗(yàn)選取42只SD大鼠，隨機(jī)分為7個(gè)組，各組分別為：對(duì)照組(C)、缺血15min再灌流后6h組(15m-6)、缺血2h再灌流后6h組(2h-6)、缺血15min再灌流后12h組(15m-12)、缺血2h再灌流后12h組(2h-12)、缺血15min再灌流后24h組(15m-24)和缺血2h再灌流后24h組(2h-24)，每組6只。通過(guò)結(jié)扎左側(cè)頸

2、總動(dòng)脈，動(dòng)脈夾夾閉右側(cè)頸總動(dòng)脈15min或2h松開(kāi)動(dòng)脈夾恢復(fù)血流，然后分別存活6h、12h、24h的方法構(gòu)建腦缺血再灌流模型。動(dòng)物處死后采用Nissl染色，GFAP免疫組化方法在光鏡下，分別觀察海馬CA1、CA2、CA3、CA4區(qū)、齒狀回及頂葉皮質(zhì)神經(jīng)細(xì)胞和星形膠質(zhì)細(xì)胞的形態(tài)學(xué)變化．并按體視學(xué)方法測(cè)算其體積密度(Vv)和表面積密度(Sv)。結(jié)果如下： Nissl染色可見(jiàn)各缺血再灌流組神經(jīng)細(xì)胞出現(xiàn)了程度不等的異常變化，缺血15mi

3、n再灌流后6h即可見(jiàn)神經(jīng)細(xì)胞輕度改變，包括細(xì)胞層排列紊亂，膠質(zhì)細(xì)胞增生等，隨著缺血和再灌流時(shí)間的延長(zhǎng)，神經(jīng)細(xì)胞出現(xiàn)水腫，尼氏體減少，細(xì)胞核固縮等現(xiàn)象，到缺血2h再灌流24h，可見(jiàn)神經(jīng)細(xì)胞周圍間隙增寬，細(xì)胞層變薄，尼氏體甚至消失等現(xiàn)象。 GFAP免疫組化顯示隨著缺血再灌流后存活時(shí)間的延長(zhǎng)，星形膠質(zhì)細(xì)胞出現(xiàn)胞體增大，著色加深，突起增多、增粗等現(xiàn)象，到缺血2h再灌流后24h，則可見(jiàn)陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)量達(dá)到頂峰，細(xì)胞肥大深染，突起粗大變形。

4、 神經(jīng)細(xì)胞Vv、Sv隨著缺血再灌流后存活時(shí)間的延長(zhǎng)而減少，其中海馬區(qū)和齒狀回各缺血再灌流組與對(duì)照組相比，差異均具有顯著性(P<0.05或P<0.01)，頂葉皮質(zhì)除缺血15min再灌流后6h組與對(duì)照組比較，無(wú)顯著性差異外(P>0.05)，其余各缺血再灌流組與對(duì)照組相比，均具有顯著性差異(P<0.05)。 同一再灌流時(shí)間下，缺血2h與缺血15min比較，各區(qū)缺血2h再灌流組神經(jīng)細(xì)胞Vv，Sv比相應(yīng)15min的要小，其中海馬CA1

5、、CA2區(qū)在缺血2h再灌流后6h、12h、24h與缺血15min比較具有顯著性差異(P<0.05)，而海馬CA3、CA4及齒狀回、頂葉皮質(zhì)下降不明顯(P>0.05)。15m-6組星形膠質(zhì)細(xì)胞Vv、Sv與對(duì)照組相比無(wú)顯著性差異(P>0.05)，15m-12組海馬CA1、CA2、CA3、CA4區(qū)、齒狀回Vv、Sv與對(duì)照組相比，顯著增加(P<0.05)，而頂葉皮質(zhì)與對(duì)照組無(wú)明顯差異(P>0.05)。其余各缺血再灌流組與對(duì)照組相比，大腦皮質(zhì)各區(qū)

6、均具有顯著性差異(P<0.05)。 同一再灌流時(shí)間下，星形膠質(zhì)細(xì)胞Vv、Sv在缺血2h與缺血15min比較：2h-6組與缺血15m-6組比較各區(qū)均無(wú)顯著性差異(P>0．05)，2h-12與15m-12，2h-24與15m-24比較發(fā)現(xiàn)，海馬CA1、CA2和項(xiàng)葉皮質(zhì)有差異(P<0.05)，而海馬CA3、CA4及齒狀回?zé)o顯著性差異(P>0.05)。 同一缺血再灌流條件下，不同區(qū)域比較：神經(jīng)細(xì)胞與星形膠質(zhì)細(xì)胞Vv、Sv在CA。

7、區(qū)與CA2比較無(wú)顯著性差異，CA3、CA4、齒狀回和項(xiàng)葉皮質(zhì)兩兩比較無(wú)顯著性差異，CA1、CA2與CA3、CA4、齒狀回、頂葉皮質(zhì)比較具有顯著性差異(P<0.05或P<0.01)。 同一區(qū)域左右兩側(cè)比較，結(jié)果表明，大腦皮質(zhì)同一區(qū)域左右兩側(cè)的神經(jīng)細(xì)胞和星形膠質(zhì)細(xì)胞體視學(xué)參數(shù)均無(wú)顯著性差異(P>0.05)。 以上結(jié)果表明，大腦皮質(zhì)神經(jīng)細(xì)胞隨著缺血再灌流時(shí)間的延長(zhǎng)受損加重，而星形膠質(zhì)細(xì)胞功能趨于活躍且與神經(jīng)細(xì)胞損傷密切相關(guān)。