連續(xù)棒狀離子交換色譜柱的制備及其性能的考察.pdf

1、連續(xù)棒狀離子交換色譜柱是近年來發(fā)展的一種新型高效液相色譜柱，已廣泛應(yīng)用于蛋白質(zhì)、肽、核酸、寡核苷酸以及多糖的分離和純化。它的優(yōu)點(diǎn)是：1)具有開放性支持骨架，大分子可以自由進(jìn)入和迅速擴(kuò)散，可用于快速分離和制備；2)具有多孔性，表面積大、交換容量大；3)具有親水性，對大分子的吸附較弱，不致引起生物大分子變性或酶的失活，活性回收率高；另一方面，它還可以作為固相萃取(SPE)介質(zhì)用于痕量樣品分析前的預(yù)富集，與常規(guī)富集方法相比，具有有機(jī)溶劑用量少

2、、便捷、安全、高效、易實(shí)現(xiàn)自動(dòng)化在線分析等特點(diǎn)。 該文通過原位聚合之后在線化學(xué)修飾的方法合成了連續(xù)棒狀離子交換柱，研究了它對于生物大分子的吸附特性，以及在陰離子的在線富集和測定中的應(yīng)用。 全文共分三部分。 第一章：綜述了離子交換色譜法中有機(jī)基質(zhì)、無機(jī)基質(zhì)以及復(fù)合基質(zhì)固定相的研究進(jìn)展，并對其在生化研究中的應(yīng)用作了介紹。 第二章：直接以色譜柱管為模具，通過原位聚合之后在線化學(xué)修飾的方法合成了連續(xù)棒狀弱陽離子交

3、換柱；考察了不同流動(dòng)相體系、流速、溫度、pH值對標(biāo)準(zhǔn)蛋白(溶菌酶和牛血清白蛋白)在該色譜柱上色譜行為的影響。結(jié)果表明該色譜柱對堿性蛋白有明顯的吸附作用，具有典型的弱陽離子交換柱的特性，可以用來進(jìn)行堿性蛋白的分離純化，且重現(xiàn)性和穩(wěn)定性良好。 第三章：通過在線富集技術(shù)分析了樣品中痕量的碘離子和硫氰根離子。兩種陰離子被同時(shí)富集在分別用二乙胺或三乙胺在線修飾的聚甲基丙烯酸縮水甘油酯連續(xù)棒狀陰離子交換柱上，然后以0.3mol/L的溴化鉀溶