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文檔簡(jiǎn)介
1、中國是世界上第一養(yǎng)豬大國,養(yǎng)豬業(yè)已成為我國農(nóng)業(yè)和農(nóng)村經(jīng)濟(jì)的重要組成部分。上世紀(jì)九十年代以來,隨著養(yǎng)豬業(yè)迅猛發(fā)展,我國的養(yǎng)豬業(yè)生產(chǎn)方式已從傳統(tǒng)的小規(guī)模飼養(yǎng)向大型規(guī)模化集約化養(yǎng)殖方向轉(zhuǎn)變。但與此同時(shí)也帶來了因糞污大量集中排放與資源環(huán)境之間的突出矛盾。厭氧生物技術(shù)是目前我國養(yǎng)豬廢水處理的關(guān)鍵技術(shù)?,F(xiàn)有的畜禽厭氧生物處理技術(shù)研究往往僅停留在研究脫氮、除磷、化學(xué)需氧量(COD)的去除效率和產(chǎn)氣率等的工藝參數(shù)方面,而對(duì)于好氧酸化處理增強(qiáng)厭氧發(fā)酵體系
2、的過程方面研究比較匱乏。本研究運(yùn)用了現(xiàn)代分子生物學(xué)技術(shù)對(duì)外源微生物進(jìn)行了系統(tǒng)的鑒定,通過梯度變性凝膠電泳(DGGE)、16SrDNA文庫分析等分子生物學(xué)技術(shù)和細(xì)菌篩選、分離鑒定解析了養(yǎng)豬廢水厭氧生物處理的酸化預(yù)處理對(duì)系統(tǒng)啟動(dòng)時(shí)的影響。為實(shí)現(xiàn)養(yǎng)豬廢水厭氧生物高效處理、可控運(yùn)行提供理論和實(shí)踐依據(jù)。
實(shí)驗(yàn)采用了意大利ABT公司通過發(fā)酵工藝得到了外源菌粉,采用DGGE和16SrDNA的文庫構(gòu)建分析了該菌粉中的主要菌體構(gòu)成。通過16Sr
3、DNA分析得到了223個(gè)陽性克隆子,DGGE分析得到10條條帶切膠后對(duì)其中的DNA進(jìn)行回收后測(cè)序。經(jīng)過測(cè)序分析結(jié)果表明,微生物群落組成為不動(dòng)桿菌(Acinetobacter)、異常海桿菌(Marinobacter)、假單胞菌(Pseudomonadaceae)、芽孢桿菌(Bacillaceae)和纖維弧菌(Cellvibrio)。通過223個(gè)克隆子構(gòu)建的基因文庫中不動(dòng)桿菌(Acinetobacter)占50.2%、異常海桿菌(Marin
4、obacter)占19.73%、假單胞菌(Pseudomonadaceae)占19.73%、芽孢桿菌(Bacillaceae)和纖維弧菌(Cellvibrio)各占9.86%。文庫分析和DGGE測(cè)序所得結(jié)果一致。
以現(xiàn)有生產(chǎn)廢水及處理污泥為原材料,實(shí)驗(yàn)室模擬建立好氧輔助及厭氧反應(yīng)器,確定了污泥提升好氧酸化效果有助于提高厭氧甲烷產(chǎn)量,為啟動(dòng)主反應(yīng)器提供參數(shù);以現(xiàn)有生產(chǎn)廢水啟動(dòng)運(yùn)行主反應(yīng)器系統(tǒng)。通過投加外源菌粉與投加滅活的外源菌粉
5、以及原水在相同條件下進(jìn)行對(duì)比,在好氧條件下投加菌粉后原水的揮發(fā)性脂肪酸可以提升到1400mg/L,并將厭氧沼氣產(chǎn)量最大值從99.2mL提高了350mL,厭氧啟動(dòng)時(shí)間縮短了4天,且最終出水COD在小試反應(yīng)器9天后滿足好氧處理的條件。
將菌粉中可培養(yǎng)的降解細(xì)菌進(jìn)行分離與富集。采用了不同的富集培養(yǎng)基,第一次富集得到了不動(dòng)桿菌和假單胞菌,第二次富集得到芽孢桿菌。將兩次富集的細(xì)菌以及菌粉還有菌粉轉(zhuǎn)接液,對(duì)現(xiàn)有的廢水進(jìn)行酸化。實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)外源
6、細(xì)菌的投加對(duì)揮發(fā)性脂肪酸的提高作用較明顯,且最高可以達(dá)到2000mg/L。同時(shí),投加外源細(xì)菌后只需4小時(shí)即可達(dá)到酸化的效果最佳效果,而未加外源細(xì)菌的原水揮發(fā)性脂肪酸增加不明顯。對(duì)酸化效果較好的菌群利用16S rDNA進(jìn)行分子鑒定,結(jié)果表明兩株菌分別為水解淀粉芽孢桿菌和臘樣芽孢桿菌,通過對(duì)該兩種芽孢桿菌的生理生化特性進(jìn)行研究,檢測(cè)到兩種菌株可以產(chǎn)生酪蛋白酶和過氧化氫酶等胞外酶。IMViC實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,兩個(gè)菌株均不產(chǎn)吲哚但C3菌株可以分解含
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