甲烷利用細菌的篩選及可溶性甲烷單加氧酶基因簇的克隆.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、該研究利用傳統(tǒng)微生物學的方法,從南寧市廣西大學田的土樣中篩選到一株甲烷利用細菌Y2(83),能夠在以甲烷為唯一碳源和能源的無機培養(yǎng)基上生長,通過形態(tài)觀察及16SrRNA編碼序列同源性比較分析,我們初步鑒定該菌株為甲基孢囊菌.通過對Y2(83)菌株在不同溫度、pH值條件下的生長的情況,我們初步確定了Y2(83)的最適生長和降解苯酚的溫度為32℃,最適pH值為7.0,TCE最高的耐受濃度為30mg/L.苯胺最高的耐受濃度為1500mg/L.

2、苯酚最高的耐受濃度為800mg/L.根據(jù)可溶性甲烷單加氧酶(sMMO)所共有的保守序列設計合成了一對引物,以Y2(83)總DNA為模板,通過PCR反應,擴增出242bp的同源片段.對該DNA序列測序,并通過序列分析表明,該片段與已報道的可溶性甲烷單加氧酶的編碼基因中的mmoX有85％的同源性.以此DNA片段為探針,通過Southern blot的方法,從用部分酶切的Y2(83)總DNA中獲得陽性印跡,確認其可溶性甲烷單加氧酶的編碼基因的

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