黑莓籽和赤芍血栓作用機(jī)制研究.pdf

1、本論文由三章組成。第一章綜述血栓形成機(jī)理及抗血栓藥物的研究進(jìn)展。第二章論述黑莓籽的體外凝血四項(xiàng)指標(biāo)的研究、纖溶活性和尿激酶纖溶抑制活性研究以及體內(nèi)的抗血栓作用及其作用機(jī)制研究。第三章論述赤芍及其活性成分的抗血栓作用及作用機(jī)制研究。
　　第一章、血栓形成及抗血栓藥物研究進(jìn)展
　　綜述血栓形成的機(jī)理：(1)心血管功能的損傷；(2)血小板的粘附聚集和凝血系統(tǒng)的激活；(3)血流狀態(tài)的改變，如血流緩慢或停滯、渦流的形成等。介紹抗血栓藥

2、物的研究進(jìn)展，包括抗凝血藥、抗血小板聚集藥和溶栓藥。
　　第二章、黑莓籽抗血栓作用機(jī)制研究
　　本章分為四節(jié)。
　　第一節(jié)，首次采用體外活化部分凝血活酶時(shí)間(activated partial thromboplastin time,APTT)、凝血酶原時(shí)間(prothrombin time,PT)、凝血酶時(shí)間(thrombin time,TT)、纖維蛋白原(fibrinogen,FIB)對(duì)黑莓籽進(jìn)行體外凝血活性研究。

3、結(jié)果顯示，黑莓籽乙醇總浸膏、石油醚部位、正丁醇部位以及分離得到的8個(gè)化合物(十六烷酸、1α,2α,3β,19α-四羥基-12-烯-28-烏蘇酸、委陵菜酸、熊果酸、9(Z)-octadecenamide、suavissimoside R1、pomolic acid-28-O-β-D-glucopyranosyl ester和3,5,7,2',5'-pentahydroxy-flavan)均具有良好的體外抗凝血活性。而黑莓籽乙酸乙酯部位以及

4、薔薇酸和齊墩果酸具有一定的體外促凝血活性。
　　第二節(jié)，通過建立纖溶途徑抑制模型，采用纖維蛋白原-瓊脂糖平板法首次對(duì)黑莓籽提取物及分離得到的10個(gè)化合物的體外纖溶活性和尿激酶激活的纖溶途徑抑制活性進(jìn)行研究。結(jié)果顯示，黑莓籽乙醇總浸膏和正丁醇部位具有一定的體外纖溶活性；黑莓籽乙醇總浸膏、石油醚部位、乙酸乙酯部位、正丁醇部位以及10個(gè)化合物均對(duì)尿激酶激活的纖溶途徑有抑制作用。
　　第三節(jié)，采用皮下注射鹽酸腎上腺素結(jié)合冰水浴的方法

5、制備大鼠的急性血瘀模型。通過大鼠急性血瘀模型首次對(duì)黑莓籽的體內(nèi)抗血栓活性及抗血栓作用機(jī)制進(jìn)行研究。試驗(yàn)結(jié)果表明，黑莓籽乙醇總浸膏、石油醚部位、乙酸乙酯部位和正丁醇部位均具有良好的抗血栓活性。且它們降低急性血瘀模型大鼠全血粘度(whole blood viscosity,WBV)可能是通過降低紅細(xì)胞壓積(packedcellvolume,PCV)，降低血漿粘度(plasma viscosity,PV)可能是通過降低紅細(xì)胞沉降率(eryth

6、rocytesedimentationrate,ESR)；通過內(nèi)源性凝血途徑、外源性凝血途徑、凝血共同途徑以及降低血漿中纖維蛋白原的含量來抑制血液的凝固，從而達(dá)到抗血栓的效果；通過降低內(nèi)皮素(endothelin-1,ET-1)和升高一氧化氮合酶(endothelial nitric oxide synthase,eNOS)的含量來抑制血栓的形成；黑莓籽乙醇總浸膏、石油醚部位、乙酸乙酯部位通過降低急性血瘀模型大鼠血清中血栓素 B2(Th

7、romboxane B2,TXB2)和升高6-酮-前列腺素F1α(6-keto-prostaglandinF1α,6-Keto-PGF1α)的含量來抑制血栓的形成，黑莓籽正丁醇部位通過降低急性血瘀模型大鼠血清中TXB2的含量來抑制血栓的形成，且黑莓籽提取物對(duì)6-Keto-PGF1α/ TXB2的平衡具有良好的調(diào)節(jié)作用。
　　第四節(jié)，采用大鼠急性血瘀模型首次對(duì)熊果酸的體內(nèi)抗血栓活性及抗血栓作用機(jī)制進(jìn)行研究。試驗(yàn)結(jié)果表明，熊果酸具有良

8、好的抗血栓活性，且熊果酸降低急性血瘀模型大鼠WBV可能是通過降低PCV，降低PV可能是通過降低ESR；通過內(nèi)源性凝血途徑、外源性凝血途徑、凝血共同途徑以及降低血漿中纖維蛋白原的含量來抑制血液的凝固，從而達(dá)到抗血栓的效果；通過降低ET-1的含量來抑制血栓的形成；通過降低TXB2和升高6-Keto-PGF1α以及維持6-Keto-PGF1α/ TXB2的動(dòng)態(tài)平衡來抑制血栓的形成且熊果酸是黑莓籽抗血栓的活性成分之一。
　　第三章、赤芍抗

9、血栓作用機(jī)制研究
　　本章分為兩節(jié)。
　　第一節(jié)，采用急性血瘀模型首次對(duì)赤芍乙醇總浸膏、乙酸乙酯部位和正丁醇部位進(jìn)行體內(nèi)抗血栓作用及其作用機(jī)制研究。試驗(yàn)結(jié)果表明：赤芍乙醇總浸膏、乙酸乙酯部位和正丁醇部位均具有良好的抗血栓活性，且它們降低急性血瘀模型大鼠WBV可能是通過降低PCV，降低PV可能是通過降低ESR；通過內(nèi)源性凝血途徑、外源性凝血途徑、凝血共同途徑以及降低血漿中纖維蛋白原的含量來抑制血液的凝固，從而達(dá)到抗血栓的效果；

10、赤芍乙醇總浸膏和乙酸乙酯部位通過降低ET-1和升高eNOS的含量來抑制血栓的形成，正丁醇部位通過升高eNOS的含量來抑制血栓的形成；赤芍乙醇總浸膏和正丁醇部位通過降低TXB2和升高6-Keto-PGF1α來抑制血栓的形成，乙酸乙酯部位通過降低TXB2的含量來抑制血栓的形成，且它們對(duì)6-Keto-PGF1α/TXB2均有良好的平衡作用。
　　第二節(jié)，采用大鼠的急性血瘀模型首次對(duì)從赤芍中分離得到的4個(gè)化合物(原兒茶酸、芍藥內(nèi)酯苷、芍藥

11、苷和1,2,3,4,6-O-五沒食子酰葡萄糖)進(jìn)行體內(nèi)抗血栓作用及其作用機(jī)制研究。試驗(yàn)結(jié)果表明，原兒茶酸、芍藥內(nèi)酯苷、芍藥苷和1,2,3,4,6-O-五沒食子酰葡萄糖均有良好的抗血栓活性，且它們降低急性血瘀模型大鼠WBV可能是通過降低PCV，降低PV可能是通過降低ESR；通過內(nèi)源性凝血途徑、外源性凝血途徑、凝血共同途徑以及降低血漿中纖維蛋白原的含量來抑制血液的凝固，從而達(dá)到抗血栓的效果；芍藥苷和芍藥內(nèi)酯苷通過降低ET-1和升高eNOS的

12、含量來抑制血栓的形成，原兒茶酸和1,2,3,4,6-O-五沒食子酰葡萄糖通過升高eNOS的含量來抑制血栓的形成。芍藥內(nèi)酯苷和1,2,3,4,6-O-五沒食子酰葡萄糖通過降低TXB2和升高6-Keto-PGF1α來抑制血栓的形成，原兒茶酸和芍藥苷通過升高6-Keto-PGF1α來抑制血栓的形成；且它們對(duì)6-Keto-PGF1α/TXB2均有良好的平衡作用。原兒茶酸，芍藥內(nèi)酯苷、芍藥苷和1,2,3,4,6-O-五沒食子酰葡萄糖是赤芍抗血栓的