神經(jīng)管缺陷相關蛋白Vangl1的新型免疫傳感器構建.pdf

1、Vangl1蛋白是平面細胞極性信號通路(PCP）的核心蛋白，其表達異常與胚胎發(fā)育不良高度相關，尤其是神經(jīng)管缺陷（NTDs）。由于目前缺乏Vangl1蛋白的痕量檢測方法，因此研究并建立相關超靈敏檢測分析技術可能對神經(jīng)管缺陷的精確診斷發(fā)揮潛在的臨床價值。
　　近年來生物傳感器以其具有操作簡單、成本低、檢測限低和靈敏度高等優(yōu)勢，被廣泛應用于臨床診斷和生物樣品分析領域，已經(jīng)成為一種生物標志物檢測的理想分析技術。其工作原理是將生物活性物質（

2、核酸、抗體、抗原、酶等）在電極表面發(fā)生分子識別事件轉換為聲、光、電物理等可以測定物的信號，再進行分析。本文主要從納米復合物的制備以及信號放大策略的選擇來構建Vangl1蛋白免疫傳感器，并對其分析性能進行研究和檢測，具體研究內(nèi)容和結果如下：
　　首先采用原位還原方法，在C60表面固載AuPt NPs形成C60-AuPt納米復合材料，作為信標材料，通過催化H2O2產(chǎn)生電信號，實現(xiàn)信號的放大。其次，為進一步提高免疫傳感器的靈敏度，選用P

3、TC-NH2修飾的rGO-TEPA復合物PTC-NH2-rGO-TEPA作為基底材料，兩者均含有豐富的氨基集團，通過戊二醛（GA）的交聯(lián)作用與抗體結合，可以固載大量的抗體；同時進行條件優(yōu)化，在最優(yōu)的實驗條件下，所構建的免疫傳感器在0.1pg/mL-450ng/mL范圍內(nèi)，得到了較好的線性結果，最低檢測限為0.03pg/mL。最后驗證該免疫傳感器具有良好的穩(wěn)定性與重現(xiàn)性，可用于血液樣品中Vangl1蛋白的檢測。
　　本研究對NTD等