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文檔簡介
1、Vangl1蛋白是平面細(xì)胞極性信號通路(PCP)的核心蛋白,其表達(dá)異常與胚胎發(fā)育不良高度相關(guān),尤其是神經(jīng)管缺陷(NTDs)。由于目前缺乏Vangl1蛋白的痕量檢測方法,因此研究并建立相關(guān)超靈敏檢測分析技術(shù)可能對神經(jīng)管缺陷的精確診斷發(fā)揮潛在的臨床價(jià)值。
近年來生物傳感器以其具有操作簡單、成本低、檢測限低和靈敏度高等優(yōu)勢,被廣泛應(yīng)用于臨床診斷和生物樣品分析領(lǐng)域,已經(jīng)成為一種生物標(biāo)志物檢測的理想分析技術(shù)。其工作原理是將生物活性物質(zhì)(
2、核酸、抗體、抗原、酶等)在電極表面發(fā)生分子識別事件轉(zhuǎn)換為聲、光、電物理等可以測定物的信號,再進(jìn)行分析。本文主要從納米復(fù)合物的制備以及信號放大策略的選擇來構(gòu)建Vangl1蛋白免疫傳感器,并對其分析性能進(jìn)行研究和檢測,具體研究內(nèi)容和結(jié)果如下:
首先采用原位還原方法,在C60表面固載AuPt NPs形成C60-AuPt納米復(fù)合材料,作為信標(biāo)材料,通過催化H2O2產(chǎn)生電信號,實(shí)現(xiàn)信號的放大。其次,為進(jìn)一步提高免疫傳感器的靈敏度,選用P
3、TC-NH2修飾的rGO-TEPA復(fù)合物PTC-NH2-rGO-TEPA作為基底材料,兩者均含有豐富的氨基集團(tuán),通過戊二醛(GA)的交聯(lián)作用與抗體結(jié)合,可以固載大量的抗體;同時(shí)進(jìn)行條件優(yōu)化,在最優(yōu)的實(shí)驗(yàn)條件下,所構(gòu)建的免疫傳感器在0.1pg/mL-450ng/mL范圍內(nèi),得到了較好的線性結(jié)果,最低檢測限為0.03pg/mL。最后驗(yàn)證該免疫傳感器具有良好的穩(wěn)定性與重現(xiàn)性,可用于血液樣品中Vangl1蛋白的檢測。
本研究對NTD等
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