絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松癥腎陰虛證相關(guān)基因CLCF1表達(dá)的研究.pdf

1、目的:
　　 課題應(yīng)用RT-PCR技術(shù)檢測(cè)POP腎陰虛證組、POP腎陽(yáng)虛證組、POP其他腎虛證組、POP非腎虛證組及正常對(duì)照組CLCF1表達(dá)水平，通過(guò)比較各組間CLCF1表達(dá)水平，進(jìn)一步驗(yàn)證CLCF1與絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松癥腎陰虛證的關(guān)聯(lián)性，為后續(xù)研究絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松癥腎陰虛證的基因組學(xué)機(jī)制提供參考。
　　 方法:
　　 隨機(jī)選擇福州地區(qū)絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松癥受試者，通過(guò)問(wèn)卷調(diào)查、雙能X線骨密度檢測(cè)(Dual energy X

2、-ray bone mineral density testing DXA)及中醫(yī)辨證分型，分為POP腎陰虛證組(32例)、POP腎陽(yáng)虛證組(26例)、POP其他腎虛證組(43例)和POP非腎虛證組(30例)，另外，選擇健康絕經(jīng)后婦女為正常組(30例)。分別抽取靜脈血，進(jìn)行紅細(xì)胞裂解，分離出靜脈血中的白細(xì)胞，用Trizol一步法提取白細(xì)胞中的總RNA，檢測(cè)RNA質(zhì)量后，將樣品RNA逆轉(zhuǎn)錄為cDNA。將各組的目的基因(CLCF1)和內(nèi)參基

3、因(GAPDH)進(jìn)行RT-PCR反應(yīng)，繪制梯度稀釋DNA標(biāo)準(zhǔn)曲線，將每個(gè)樣品的CLCF1的濃度除以GAPDH的濃度，即為此樣品此基因的校正后的相對(duì)濃度。最后，SPSS統(tǒng)計(jì)，比較各組CLCF1表達(dá)水平。
　　 結(jié)果:
　　 各組的CLCF1校正后的相對(duì)濃度分別為:POP腎陰虛證組:0.0171±0.0109; POP腎陽(yáng)虛證組:0.0867±0.2881;POP其他腎虛證組:0.1776±0.4895; POP無(wú)腎虛證組:

4、0.0672±0.2539;正常對(duì)照組:0.1642±0.4290。POP腎陰虛證組與POP腎陽(yáng)虛證組、POP其他腎虛證組、POP非腎虛證組相比，CLCF1表達(dá)水平無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)，與正常對(duì)照組相比，POP腎陰虛證組CLCF1表達(dá)水平顯著下調(diào)(P＜0.01);POP腎陽(yáng)虛證組與POP其他腎虛證組、POP非腎虛證組、正常對(duì)照組相比，CLCF1表達(dá)水平無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05); POP其他腎虛證組與POP非腎虛證組、正常對(duì)照

5、組比較，CLCF1表達(dá)無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05); POP非腎虛證與正常對(duì)照組比較，CLCF1表達(dá)無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。
　　 結(jié)論:
　　 通過(guò)RT-PCR技術(shù)比較各組中CLCF1的表達(dá)情況，其中僅POP腎陰虛證組與正常對(duì)照組相比，CLCF1表達(dá)水平顯著下調(diào)(P＜0.01)，其余各組間CLCF1表達(dá)均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。這與前期課題中基因芯片的檢測(cè)結(jié)果是基本吻合的。進(jìn)一步證實(shí):絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松癥腎陰虛證與CLCF1表