山東甜菜夜蛾抗藥性監(jiān)測及應用cPASA技術檢測高效氯氰菊酯的抗性.pdf

1、甜菜夜蛾(Spodoptera exigua(Hübner)是一種世界性農業(yè)害蟲，近年來在山東地區(qū)頻繁發(fā)生、危害嚴重，尤其是對蔬菜、棉花等經濟作物。目前甜菜夜蛾的防治以化學防治為主，而長期單一的化學防治使甜菜夜蛾對許多殺蟲劑產生了抗藥性。本研究采用了浸葉法監(jiān)測了山東的泰安、章丘、安丘、滕州和濱州五地區(qū)甜菜夜蛾種群對11種防治藥劑的抗性。在監(jiān)測中發(fā)現，傳統(tǒng)的生物測定檢測法存在著工作量大、不適于早期抗性檢測等缺點，因此在明確甜菜夜蛾對菊酯抗

2、性是與鈉離子通道基因IIS6上亮氨酸到苯并氨酸突變(L1014F)緊密有關的基礎上，設計了相應的競爭性等位基因PCR方案(cPASA)，用于田間甜菜夜蛾對高效氯氰菊酯的抗性檢測，并與浸葉法進行了相關性分析。主要結果如下:
　　 1、甜菜夜蛾的抗藥性監(jiān)測
　　 采用浸葉法測定了2011、2012年山東泰安、章丘、安丘、滕州和濱州五地區(qū)甜菜夜蛾種群對11種殺蟲劑（氯蟲苯甲酰胺、氟蟲雙酰胺、甲維鹽、溴蟲腈、多殺菌素、茚蟲威、蟲

3、酰肼、甲氧蟲酰肼、氟啶脲、高效氯氰菊酯和毒死蜱）的敏感性。結果表明:(
　　 )2011、2012年田間甜菜夜蛾各地種群對不同種類殺蟲劑表現出不同抗性水平。氯蟲苯甲酰胺和氟蟲雙酰胺是近年在甜菜夜蛾上使用的高效殺蟲劑，對甜菜夜蛾有較高的毒力，LC50值均＜10.00mg/L。對氯蟲苯甲酰胺安丘種群沒有檢測到抗性，其他四地區(qū)發(fā)現非常低到中等水平抗性，其中2012年濱州種群抗性最高，抗性倍數也僅為28.77倍。氟蟲雙酰胺抗性規(guī)律類似于

4、氯蟲苯甲酰胺，相比于2011年，甜菜夜蛾對這兩種藥劑抗性均有所上升。雖然在五地區(qū)均監(jiān)測到甜菜夜蛾對甲維鹽產生了非常低到中等水平抗藥性，但甜菜夜蛾對甲維鹽仍保持非常高的敏感性，LC50＜1.00mg/L。對溴蟲腈兩年均沒有監(jiān)測到抗性存在，抗性倍數RR＜2。對茚蟲威、多殺菌素甜菜夜蛾表現低到高的不同水平抗性，抗性倍數分別介于8.64-84.19倍、9.23-86.31倍，其中對茚蟲威安丘種群抗性有明顯上升，由29.76上升到49.03，對多

5、殺菌素濱州種群抗性有明顯上升，由38.99上升到68.14。
　　 對昆蟲生長調節(jié)劑類殺蟲劑蟲酰肼、甲氧蟲酰肼和氟啶脲表現出高到非常高水平抗性，其中氟啶脲的抗性最為突出，抗性倍數RR＞200，這表明甜菜夜蛾對氟啶脲變得非常不敏感，不適于田間繼續(xù)使用。對蟲酰肼抗性倍數RR介于52.03-125.87，對甲氧蟲酰肼抗性倍數RR介于131.25-675.00。對擬除蟲菊酯高效氯氰菊酯的抗性，2011年抗性倍數為54.88-183.77

6、，2012年抗性倍數為62.23-146.82，其中滕州、泰安、章丘和安丘表現出緩慢下降趨勢，這可能與菊酯藥劑的使用減少有關。甜菜夜蛾對毒死蜱的抗性在監(jiān)測五地區(qū)均表現出非常高水平的抗性，抗性倍數為106.29-349.51，雖然毒死蜱的抗性在監(jiān)測藥劑中不是最高的，但對甜菜夜蛾的敏感性最低，大部分地區(qū)的LC50＞1000mg/L。
　　 監(jiān)測地區(qū)殺蟲劑選擇壓的不同和甜菜夜蛾的遷飛習性可能是造成甜菜夜蛾對不同藥劑抗性水平差異的主要原

7、因，此外不同地區(qū)的耕作制度和藥劑之間的交互抗藥性可能也是抗性產生原因。
　　 2、競爭性等位基因PCR檢測高效氯氰菊酯的抗性
　　 以甜菜夜蛾的敏感種群和高效氯氰菊酯抗性種群為材料，通過對鈉離子通道基因片段的序列分析，發(fā)現了與擊倒抗性相關的亮氨酸到苯丙氨酸(L1014F)的突變，并建立(L1014F)突變的競爭性特異等位基因PCR檢測技術(cPASA)。結果表明:敏感種群個體均沒有發(fā)現突變等位基因，田間章丘種群92％個體