點(diǎn)擊功能化納米探針的制備及其在腫瘤診斷中的應(yīng)用.pdf

1、隨著人們對(duì)納米科學(xué)和納米技術(shù)研究的日益深入，各種納米增強(qiáng)光學(xué)效應(yīng)不斷被揭示。利用這些納米光學(xué)效應(yīng)所提供的信息以及表面生物修飾技術(shù)，可以設(shè)計(jì)和發(fā)展一系列具有高靈敏性和高選擇性的化學(xué)/生物傳感器。與現(xiàn)有的生物醫(yī)學(xué)診斷方法相比，納米光學(xué)效應(yīng)傳感器不僅具有優(yōu)異的信號(hào)放大能力，而且具有成本低、快速便捷等優(yōu)勢(shì)。在本論文中，利用納米粒子及其表面的點(diǎn)擊化學(xué)修飾策略，分別制備了葉酸受體靶向的熒光二氧化硅納米探針和表面增強(qiáng)拉曼散射(SERS)納米探針，并將

2、其成功地應(yīng)用于腫瘤細(xì)胞的選擇性識(shí)別與成像研究。此外，通過(guò)設(shè)計(jì)磷酸化誘導(dǎo)的銀納米粒子聚集體結(jié)構(gòu)，利用SERS熱點(diǎn)及其光譜技術(shù)，實(shí)現(xiàn)了對(duì)蛋白激酶A活性的高靈敏檢測(cè)。主要的研究?jī)?nèi)容總結(jié)如下:
　　(1)采用點(diǎn)擊化學(xué)偶聯(lián)法對(duì)包裹釕聯(lián)吡啶的二氧化硅納米粒子表面進(jìn)行葉酸功能化修飾，構(gòu)建了一種葉酸受體靶向的熒光納米探針，并將其成功地用于腫瘤細(xì)胞的成像研究。細(xì)胞成像結(jié)果表明，該探針能夠有效地標(biāo)記葉酸受體呈陽(yáng)性的人宮頸癌細(xì)胞，而葉酸受體呈陰性的人肺

3、癌細(xì)胞未觀察到明顯的熒光。同時(shí)，葉酸競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合試驗(yàn)驗(yàn)證了這種葉酸受體介導(dǎo)的腫瘤細(xì)胞成像機(jī)制。更為重要的是，該探針能夠?qū)崿F(xiàn)混合細(xì)胞體系中人宮頸癌細(xì)胞的選擇性識(shí)別與熒光成像。與酰胺化反應(yīng)偶聯(lián)葉酸的策略相比，這種點(diǎn)擊功能化的納米探針具有合成方法簡(jiǎn)單、反應(yīng)條件溫和、產(chǎn)率高等優(yōu)點(diǎn)。通過(guò)選擇不同的生物配體并結(jié)合點(diǎn)擊化學(xué)高效的表面修飾特性，該策略有望發(fā)展成為一種制備多功能生物熒光納米探針的通用方法。
　　(2)設(shè)計(jì)和合成了含有疊氮官能團(tuán)的拉曼活

4、性分子，并將其共價(jià)修飾在金納米空心球表面，然后與含有炔基官能團(tuán)的葉酸衍生物進(jìn)行點(diǎn)擊反應(yīng)，發(fā)展了一種具有高標(biāo)記效率以及優(yōu)異細(xì)胞靶向能力的SERS納米探針，并成功地實(shí)現(xiàn)了對(duì)葉酸受體高表達(dá)腫瘤細(xì)胞的選擇性識(shí)別與SERS成像。與分子熒光探針相比，這種新型的SERS納米探針可以有效地減少或避免其在細(xì)胞表面的非特異性吸附，有望發(fā)展成為腫瘤靶向成像及治療的理想造影劑。
　　(3)利用精胺修飾的銀納米粒子以及多肽磷酸化前后電荷量的改變，設(shè)計(jì)了磷酸