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文檔簡介
1、揚州大學碩士學位論文由成年波爾山羊體細胞產(chǎn)生的克隆羊姓名:唐慧林申請學位級別:碩士專業(yè):臨床獸醫(yī)學指導教師:成勇20020401唐慧林由成年波爾山羊體細胞產(chǎn)生的克隆羊!Absl:ractFibroblastswereseparatedfromtheboer21。(aboutlg)eartipandculturedinvitrofordonorcellstoPll~P12,andMIIstageoocytesweregotfromdel詛
2、oftheChangjiangRiverthroughsuperovulationWhenthecellsconnllcnceabout80%,apartwasselectedforsynchronizationtoMstages:the銜ststep,treatwithThymidinefor16hours,thenrecoverculturefor5hours,thethirdstepwastreatit1rithNocodazol
3、efor78hours,thelastwas30minutesbeforetransferselectthecellswithdigestion;theotherwastreatedwithnothingandselectfornucleartransferThereconstructedembryoswhichwereproducedbyelectrofusingthedonorcellsintotherecipientcytopla
4、stswereculturedfor46hoursbeforeactivatedAfteractivated,embeddedtheseembryoswith1%agarosefortwotimes。thentransferdthemintotheligatedoviductofsynchronizedrecipientgoatResults:(1)Thedifferencebetweenthefusionrateandthedevel
5、opmentrateofreconstructedembryoswhichweretreatedwithThymidineandNocodazole(4057%、4102呦andwhichweretreatedwithnothing(4464%、4265%)werenotobvious:(2)ThereconstructedembryosofboergoatsomaticcellsandtheMIIstageenuclearoocyte
6、sweredeveloptoterm:(3)Thedonoreellswhichwereusedfortransferwereculturedinvitl“OtoP11~PJ2,thesesuggestafterlongtimeculture如riLroboergoaxtcellsalsohavetotipotentpotentialofdevelopment:(4)Intheory。Thedonorcellswhichweretrea
7、tedwithchemistryregentatMstageusedtonucleartransfercangetclonedgoat(5)Fromthephenotype,suggestthattermisaclonedboergoat:(6)ThealalyseofmicrosatelliteDNAfurtherprovedthattermisaclonedboergoatKeywords:nucleartransfer,hybri
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