大鼠丘腦背外側(cè)核5-羥色胺和5-羥色胺2A受體的表達(dá).pdf

1、大鼠丘腦背外側(cè)核(LD)是丘腦外側(cè)核群的組成部分，與空間學(xué)習(xí)和記憶有關(guān)。其又分為背內(nèi)側(cè)部(LDDM)和腹外側(cè)部(LDVL)。5-羥色胺(5-HT)作為重要的神經(jīng)遞質(zhì)與其2A型受體(5-HTR2A)也被認(rèn)為在學(xué)習(xí)和記憶過程中發(fā)揮著非常重要的作用。
　　 目的：本實(shí)驗(yàn)應(yīng)用免疫組化技術(shù)，通過觀察5-羥色胺及其2A受體在大鼠丘腦背外側(cè)核不同部位的表達(dá)情況，為進(jìn)一步研究丘腦背外側(cè)核、5-羥色胺及其2A受體與學(xué)習(xí)記憶的關(guān)系提供形態(tài)學(xué)資料。<

2、br>　　 方法：實(shí)驗(yàn)動物采用SD成年大鼠8只，雌雄各半，體重200～250g。由大連醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動物中心提供。4％水合氯醛腹腔麻醉（1ml/100g體重），仰臥固定，用剪刀剪開胸壁暴露心臟，將灌注針經(jīng)左心室插至升主動脈。剪開右心耳，快速灌注生理鹽水200ml直至右心耳流出液變得無色透明，再灌注4%多聚甲醛固定液(pH7.4)300ml，前100ml快速灌注，后200ml緩慢灌注，持續(xù)灌注約2h。灌畢立即取腦，剔凈腦表面的腦膜，置于4

3、%多聚甲醛固定液中4℃過夜，然后用振動切片機(jī)連續(xù)冠狀切片，片厚30μm。切取3套，一套用于檢測5-HT，一套用于檢測5-HTR2A，一套做對照實(shí)驗(yàn)。采用免疫組織化學(xué)染色方法，光鏡下觀察5-HT及5-HTR2A在丘腦背外側(cè)核不同部位的表達(dá)情況，所有標(biāo)本均使用同一套圖像分析系統(tǒng)進(jìn)行拍照并應(yīng)用圖像分析系統(tǒng)進(jìn)行分析，所得數(shù)據(jù)應(yīng)用SPSS11.5軟件進(jìn)行配對資料t檢驗(yàn)。
　　 結(jié)果：1.5-HT免疫組化結(jié)果：光鏡下，大鼠丘腦背外側(cè)核LDD

4、M和LDVL兩部位均可見棕黃色免疫反應(yīng)陽性的5-HT能神經(jīng)纖維終末，高倍鏡下可見纖維終末走行距離較長，呈串珠狀。LDDM和LDVL兩部位平均光密度值比較，數(shù)值無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05)。陰性對照未見陽性表達(dá)。2.5-HTR2A免疫組化結(jié)果：在丘腦背外側(cè)核LDDM和LDVL兩部位均可見棕黃色的免疫反應(yīng)陽性神經(jīng)元，分布均勻，其胞體呈中等大小，免疫反應(yīng)陽性產(chǎn)物主要定位于神經(jīng)元胞膜，胞質(zhì)和胞核不著色。LDDM和LDVL兩部位平均灰度值比較，數(shù)