可降解鎂合金支架體外降解產(chǎn)物對(duì)神經(jīng)細(xì)胞的安全性評(píng)價(jià).pdf

1、鎂合金作為性能優(yōu)越的可降解合金被廣泛應(yīng)用于醫(yī)療內(nèi)置物材料，已在骨植入物、心血管支架方面進(jìn)入臨床觀察階段，而這種鎂合金材料能否作為腦血管支架材料仍是未知數(shù)。目前神經(jīng)介入治療中所應(yīng)用的永久性支架存在植入后對(duì)血管造成的機(jī)械性損傷、支架植入處再狹窄、且后續(xù)無(wú)法順利行MRI檢查等缺點(diǎn)，而可降解鎂合金支架的優(yōu)點(diǎn)在于可完全降解，能有效避免了永久性支架帶來(lái)的損傷。已知鎂合金在降解過(guò)程中會(huì)釋放Mg離子、Al離子、以及會(huì)造成局部酸堿度的改變，而這些改變對(duì)神

2、經(jīng)系統(tǒng)是否會(huì)產(chǎn)生影響目前尚未見研究，也是鎂合金支架能否運(yùn)用于腦血管內(nèi)重建治療的關(guān)鍵。本實(shí)驗(yàn)就可降解鎂合金支架AZ31的降解對(duì)神經(jīng)細(xì)胞SY5Y的安全性進(jìn)行研究。
　　目的:
　　明確鎂合金支架AZ31對(duì)神經(jīng)細(xì)胞SYSY生物學(xué)行為的影響。
　　方法:
　　本實(shí)驗(yàn)采用間接法和直接法兩種評(píng)估方法。
　　間接法:測(cè)定Al及Mg的濃度變化對(duì)SY5Y死亡率的影響。配制含不同濃度梯度MgCl2及AlCl3的細(xì)胞培養(yǎng)液，用于

3、培養(yǎng)SY5Y細(xì)胞，根據(jù)其MTT實(shí)驗(yàn)結(jié)果，評(píng)估Al及Mg的濃度與SY5Y細(xì)胞死亡率間的關(guān)系。
　　收集降解過(guò)程中的降解液，每3天檢測(cè)其中Al及Mg濃度，根據(jù)估測(cè)的安全濃度范圍，評(píng)估降解過(guò)程中所產(chǎn)生的Mg、 Al濃度對(duì)神經(jīng)細(xì)胞是否存在細(xì)胞毒性。
　　直接法:將收集所得降解液直接用于SY5Y細(xì)胞的培養(yǎng)，為了確定降解液局部引起的pH值變化對(duì)細(xì)胞生存率是否會(huì)產(chǎn)生影響，將pH調(diào)節(jié)至正常范圍定為pH調(diào)節(jié)組，與未調(diào)節(jié)pH的降解液組對(duì)比。

4、r>　　對(duì)照組:普通DMEM/F12培養(yǎng)液;
　　實(shí)驗(yàn)組1（未調(diào)節(jié)pH值）:每隔三日收集的降解液處理細(xì)胞組---第1d組，第4d組，第7d組…第88d組;
　　實(shí)驗(yàn)組2（調(diào)節(jié)pH值）:每隔三日收集的降解液調(diào)整pH值后處理細(xì)胞組---第1d組，第4d組，第7d組…第88d組;
　　MTT法測(cè)定各組OD值，并計(jì)算細(xì)胞死亡率。
　　結(jié)果:
　　間接法:SY5Y細(xì)胞的死亡率均隨著Mg濃度及Al濃度的增高而上升，并且

5、，SY5Y細(xì)胞的死亡率與Mg離子濃度呈線性相關(guān)(P＜0.01)。
　　Mg:體外降解的過(guò)程中，約10％天數(shù)降解產(chǎn)生Mg濃度低于1.8mmol/L，細(xì)胞毒性為1級(jí)，其他時(shí)間可能產(chǎn)生2級(jí)細(xì)胞毒性。
　　Al:測(cè)定得出Al在降解液中濃度極低，故可以認(rèn)為，AZ31鎂合金可降解支架在降解過(guò)程中產(chǎn)生的Al濃度范圍對(duì)SY5Y神經(jīng)細(xì)胞是安全的。
　　直接法:pH未調(diào)節(jié)組細(xì)胞死亡率主要與pH值相關(guān)(P＜0.01)，pH調(diào)節(jié)組死亡率與Mg

6、濃度相關(guān)(P<0.01)，兩組細(xì)胞死亡率均與A1無(wú)關(guān)。不考慮pH值的影響，降解過(guò)程中約有10天，Mg對(duì)SY5Y產(chǎn)生2級(jí)的細(xì)胞毒性。
　　結(jié)論:
　　1.AZ31可降解鎂合金產(chǎn)生的降解產(chǎn)物Al對(duì)神經(jīng)細(xì)胞是安全的，不產(chǎn)生細(xì)胞毒性。
　　2.AZ31可降解鎂合金產(chǎn)生的降解產(chǎn)物中Mg濃度偏高，對(duì)于神經(jīng)細(xì)胞存在2級(jí)毒性反應(yīng)。
　　3.體外降解引起的pH值變化，對(duì)神經(jīng)細(xì)胞存在細(xì)胞毒性。
　　4.實(shí)驗(yàn)結(jié)果可以為鎂合金材料